| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 引言 | 第10-24页 |
| 1.1 羊口疮病毒(ORFVIRUS,ORFV)与ORFV125概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 ORFV流行病学 | 第10-11页 |
| 1.1.2 ORFV结构与基因组 | 第11-12页 |
| 1.1.3 ORFV进化机制 | 第12-13页 |
| 1.2 ORFV125的分子结构与功能 | 第13-15页 |
| 1.3 与本研究相关的细胞凋亡概述 | 第15-22页 |
| 1.3.1 细胞凋亡的概念 | 第15-16页 |
| 1.3.2 线粒体途径的凋亡 | 第16-18页 |
| 1.3.3 死亡途径的凋亡 | 第18-21页 |
| 1.3.4 Bcl-2样病毒蛋白ORFV125对细胞凋亡的研究 | 第21-22页 |
| 1.4 本研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 JC-1检测与CO-IP验证 | 第24-34页 |
| 1 材料与方法 | 第24-29页 |
| 1.1 染料、质粒、细胞及抗体 | 第24-25页 |
| 1.2 实验仪器 | 第25页 |
| 1.3 PK细胞培养 | 第25-26页 |
| 1.4 细胞转染 | 第26页 |
| 1.5 处理样品及染色 | 第26页 |
| 1.6 荧光显微镜观察 | 第26-27页 |
| 1.7 酵母双杂交筛选目的蛋白 | 第27-28页 |
| 1.8 免疫共沉淀 | 第28-29页 |
| 1.8.1 细胞转染 | 第28页 |
| 1.8.2 细胞的收获 | 第28页 |
| 1.8.3 洗Beads | 第28页 |
| 1.8.4 处理样品 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-32页 |
| 2.1 在荧光显微镜下观察细胞中线粒体膜电位变化 | 第29-30页 |
| 2.2 酵母双杂交CDNA文库构建 | 第30-31页 |
| 2.3 验证ORFV125与BIRC5互作 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第34-45页 |
| 1 材料与方法 | 第35-40页 |
| 1.1 染料,质粒,细胞系 | 第35页 |
| 1.2 试剂 | 第35页 |
| 1.3 溶液配制 | 第35-36页 |
| 1.4 实验仪器 | 第36-37页 |
| 1.5 实验设计 | 第37-40页 |
| 1.5.1 质粒的构建和合成 | 第37页 |
| 1.5.2 质粒的转化 | 第37页 |
| 1.5.3 质粒的提取 | 第37-39页 |
| 1.5.4 细胞培养(293T细胞) | 第39页 |
| 1.5.5 细胞转染 | 第39-40页 |
| 1.5.6 细胞接毒 | 第40页 |
| 1.5.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第40页 |
| 2 结果 | 第40-43页 |
| 2.1 流式细胞术检测293T细胞24h凋亡 | 第40-42页 |
| 2.2 流式细胞术检测293T细胞72h凋亡 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |