摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
英文缩略表 | 第14-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-23页 |
1.1 生物学 | 第16-18页 |
1.1.1 弓形虫在生物界的分类地位 | 第16页 |
1.1.2 弓形虫在其生活史中的不同形态 | 第16-17页 |
1.1.3 弓形虫生活史 | 第17-18页 |
1.1.3.1 有性生殖 | 第17页 |
1.1.3.2 无性生殖 | 第17-18页 |
1.1.4 弓形虫侵袭细胞的机制 | 第18页 |
1.2 关于弓形虫基因型的流行性调查 | 第18-19页 |
1.2.1 弓形虫基因型的研究 | 第18-19页 |
1.2.2 弓形虫不同基因型在地理上的分布 | 第19页 |
1.3 虫株基因型和致病力的关系 | 第19-20页 |
1.4 弓形虫病的诊断技术 | 第20-22页 |
1.4.1 弓形虫病原学诊断方法 | 第21页 |
1.4.3 分子生物学诊断方法 | 第21-22页 |
1.4.3.1 PCR反应靶基因的选择 | 第21-22页 |
1.5 弓形虫病的治疗 | 第22页 |
1.6 展望 | 第22-23页 |
第二章 SHR虫株基因型鉴定分析 | 第23-34页 |
2.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第23页 |
2.1.2 虫株 | 第23-24页 |
2.1.3 工具酶和主要试剂 | 第24页 |
2.1.4 主要仪器 | 第24页 |
2.2 方法 | 第24-28页 |
2.2.1 SHR虫株的复苏 | 第24页 |
2.2.2 SHR虫株基因组的提取 | 第24-25页 |
2.2.3 提取DNA | 第25页 |
2.2.4 PCR引物的设计与合成 | 第25-27页 |
2.2.5 PCR反应条件及体系 | 第27页 |
2.2.6 DNA的纯化 | 第27页 |
2.2.7 目的DNA的酶切鉴定 | 第27-28页 |
2.3 结果 | 第28-32页 |
2.3.1 PCR扩增结果 | 第28-30页 |
2.3.2 酶切鉴定结果 | 第30-32页 |
2.4 讨论 | 第32-34页 |
第三章 四种药物治疗弓形虫Ⅲ型SHR虫株感染的效果分析 | 第34-40页 |
3.1 材料 | 第35页 |
3.1.1 实验动物 | 第35页 |
3.1.2 药物 | 第35页 |
3.1.3 弓形虫 | 第35页 |
3.2 方法 | 第35-36页 |
3.2.1 SHR虫株速殖子的收集 | 第35-36页 |
3.2.2 实验分组与给药 | 第36页 |
3.2.3 检测方法 | 第36页 |
3.3 结果 | 第36-38页 |
3.4 讨论 | 第38-40页 |
第四章 刚地弓形虫SHR虫株生物学特性研究 | 第40-67页 |
4.1 实验材料 | 第41-49页 |
4.1.1 实验动物 | 第41页 |
4.1.2 虫株来源 | 第41页 |
4.1.3 主要仪器 | 第41-42页 |
4.1.4 主要试剂 | 第42-49页 |
4.1.4.1 基因克隆相关试剂配法 | 第42-44页 |
4.1.4.2 蛋白纯化相关试剂配法 | 第44-49页 |
4.2 实验方法 | 第49-59页 |
4.2.1 虫体的冻存与复苏 | 第49-50页 |
4.2.2 SHR虫株速殖子的收集 | 第50页 |
4.2.3 兔子实验模型的构建 | 第50页 |
4.2.4 被SHR虫株感染的兔子体内抗体的动态变化 | 第50-57页 |
4.2.4.1 人工感染了SHR虫株的兔子的血清收集 | 第50-51页 |
4.2.4.2 人工感染了SHR虫株的鸡的血清收集 | 第51页 |
4.2.4.3 包被抗原SAG2的表达纯化 | 第51-53页 |
4.2.4.4 SAG2蛋白的纯化 | 第53-54页 |
4.2.4.5 SDS-PAGE电泳步骤: | 第54-55页 |
4.2.4.6 包被抗原SAG2的透析 | 第55页 |
4.2.4.7 SAG2浓度的测定 | 第55-56页 |
4.2.4.8 感染动物抗体水平检测 | 第56-57页 |
4.2.5 SHR虫株在被感染动物脏器内的动态分布 | 第57-59页 |
4.2.5.1 人工感染兔子并进行脏器的分离 | 第57页 |
4.2.5.2 人工感染三黄鸡并进行脏器的分离 | 第57页 |
4.2.5.3 DNA提取的方法 | 第57-58页 |
4.2.5.4 Real-time PCR检测 | 第58-59页 |
4.2.6 数据分析 | 第59页 |
4.3 结果 | 第59-65页 |
4.3.1 镜下观察复苏后的SHR虫株 | 第59页 |
4.3.2 弓形虫SHR虫株感染兔子实验模型构建情况 | 第59-60页 |
4.3.3 纯化后SAG2蛋白的定量结果 | 第60页 |
4.3.4 兔子和鸡感染弓形虫SHR虫株后,体内抗弓形虫SAG2蛋白抗体的动态变化 | 第60-62页 |
4.3.5 Real-time PCR检测被SHR虫株感染的兔子和鸡体内的虫体动态分布 | 第62-65页 |
4.4 讨论 | 第65-67页 |
第五章 全文结论 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第75页 |