| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 研究背景 | 第12-24页 |
| 1.1 生物浸矿 | 第12-13页 |
| 1.2 嗜酸性喜温硫杆菌简介 | 第13-14页 |
| 1.3 微生物锌镉抗性机制 | 第14-17页 |
| 1.3.1 Zn抗性机制 | 第15-16页 |
| 1.3.2 Cd抗性机制 | 第16页 |
| 1.3.3 浸矿微生物中可能存在的Zn/Cd抗性机制 | 第16-17页 |
| 1.4 cadCA操纵子的研究 | 第17-19页 |
| 1.5 DUF318家族透性酶的研究 | 第19-21页 |
| 1.6 本论文的研究目的及意义 | 第21-24页 |
| 1.6.1 本文的研究内容 | 第21页 |
| 1.6.2 本文的研究意义 | 第21-24页 |
| 第二章 △orf2634△orf2635双敲株的构建及基因簇功能研究 | 第24-44页 |
| 2.1 序言 | 第24-25页 |
| 2.2 材料与方法 | 第25-35页 |
| 2.2.1 菌株与质粒 | 第25-26页 |
| 2.2.2 培养基和培养条件 | 第26-27页 |
| 2.2.3 菌种保藏 | 第27-28页 |
| 2.2.4 仪器和试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.5 常规实验操作 | 第29-32页 |
| 2.2.6 A.caldus MTH-04总RNA提取 | 第32-34页 |
| 2.2.7 反转录 | 第34页 |
| 2.2.8 生长曲线的测定 | 第34-35页 |
| 2.3 结果讨论 | 第35-43页 |
| 2.3.1 共转录分析 | 第35-36页 |
| 2.3.2 敲除株A.caldus(△orf2634△orf2635)的构建 | 第36-41页 |
| 2.3.3 A.caldus(Wild Type)与 A. caldus(△orf2634△orf2635)在不同浓度Zn~(2+)/Cd~(2+)刺激下的生长曲线 | 第41-43页 |
| 2.4 小结 | 第43-44页 |
| 第三章 △orf2635敲株的构建及基因功能研究 | 第44-62页 |
| 3.1 序言 | 第44-45页 |
| 3.2 材料与方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 菌株与质粒 | 第45页 |
| 3.2.2 培养基和培养条件 | 第45-46页 |
| 3.2.3 菌种保藏 | 第46页 |
| 3.2.4 仪器和试剂 | 第46页 |
| 3.2.5 常规实验操作 | 第46-47页 |
| 3.2.6 A. caldus MTH-04总RNA提取 | 第47页 |
| 3.2.7 反转录 | 第47-48页 |
| 3.2.8 生长曲线的测定 | 第48页 |
| 3.3 结果讨论 | 第48-60页 |
| 3.3.1 敲除株A. caldus(△orf2635)的构建 | 第48-51页 |
| 3.3.2 过表达株A. caldus (pJRD21 5-Ptac-orf2635)的构建 | 第51-54页 |
| 3.3.3 A.caldus(Wild Type)与A. caldus(△orf2635)、A.caldus (pJRD215-Ptac-orf2635)在不同浓度Zn~(2+)/Cd~(2+)刺激下的生长曲线 | 第54-58页 |
| 3.3.4 荧光定量实验检测在Zn~(2+)/Cd~(2+)刺激9天时△orf2635中部分基因的表达量变化 | 第58-60页 |
| 3.4 小结 | 第60-62页 |
| 第四章 基因orf2634的功能研究 | 第62-78页 |
| 4.1 序言 | 第62-63页 |
| 4.2 材料与方法 | 第63-68页 |
| 4.2.1 菌株与质粒 | 第63-64页 |
| 4.2.2 培养基和培养条件 | 第64页 |
| 4.2.3 常规实验操作 | 第64-68页 |
| 4.3 结果讨论 | 第68-77页 |
| 4.3.1 CadC蛋白的表达 | 第68-70页 |
| 4.3.2 蛋白与DNA互作 | 第70-72页 |
| 4.3.3 过表达株A.caldus(pJRD215-Ptac-orf2634)的构建 | 第72-74页 |
| 4.3.4 A.caldus(pJRD215)与A. caldus(pJRD215-Ptac-orf2634)在不同浓度Zn~(2+)/Cd~(2+)刺激下的生长曲线 | 第74-77页 |
| 4.4 小结 | 第77-78页 |
| 第五章 该操纵子基因在E.coli中的过表达 | 第78-86页 |
| 5.1 序言 | 第78页 |
| 5.2 材料与方法 | 第78-80页 |
| 5.2.1 菌株与质粒 | 第78-79页 |
| 5.2.2 培养基和培养条件 | 第79页 |
| 5.2.3 菌种保藏 | 第79页 |
| 5.2.4 仪器和试剂 | 第79页 |
| 5.2.5 常规实验操作 | 第79-80页 |
| 5.2.6 生长曲线的测定 | 第80页 |
| 5.3 结果讨论 | 第80-84页 |
| 5.3.1 E.coli中过表达质粒的构建 | 第80-82页 |
| 5.3.2 E.coli中过表达株在不同浓度Zn刺激下的生长曲线 | 第82-84页 |
| 5.4 小结 | 第84-86页 |
| 第六章 全文总结与展望 | 第86-88页 |
| 6.1 本研究的主要创新点 | 第86-87页 |
| 6.2 本文的不足 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 附表 | 第93页 |
