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番茄Trihelix转录因子家族基因在抗病反应中的功能研究

致谢第6-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-14页
第一章 文献综述及研究背景第15-31页
    1.1 植物先大免疫研究进展第15-20页
        1.1.1 PAMPs/MAMPs触发的植物免疫(PTI)第15-18页
        1.1.2 效应子发的植物免疫(ETI)第18-20页
    1.2 ROS在植物中的研究进展第20-25页
        1.2.1 ROS在植物中产生的来源第21-23页
            1.2.1.1 ROS与植物信号转导第21-22页
            1.2.1.2 ROS与植物NADPH氧化酶第22-23页
        1.2.2 ROS与植物根发育第23页
        1.2.3 ROS与植物免疫第23-25页
    1.3 植物Trihelix转录因子家族的生物学功能及其研究进展第25-29页
        1.3.1 Trihelix转录因子的生化与结构特征第25-26页
        1.3.2 Trihelix转录因子家族及其特性第26-27页
        1.3.3 Trihelix转录因子在植物生长发育中的调控作用第27-28页
        1.3.4 Trihelix转录因子在植物应对非生物与生物胁迫反应中的作用第28-29页
    1.4 本研究的目的意义及主要内容第29-31页
        1.4.1 研究的目的意义第29页
        1.4.2 研究的要内容第29-31页
第二章 材料与方法第31-40页
    2.1 试验材料第31-32页
        2.1.1 植物材料第31页
        2.1.2 植物培养与处理第31页
        2.1.3 菌株与载体第31-32页
        2.1.4 酶与各种生化试剂第32页
        2.1.5 引物第32页
    2.2 试验方法第32页
        2.2.1 Trihelix转录因子家族基因的鉴定与命名第32页
        2.2.2 DNA序列的测定及比对分析第32页
    2.3 基因cDNA克隆第32-33页
    2.4 总RNA的提取与反转录第33-34页
    2.5 荧光实时定量PCR(Real-timePCR)第34页
    2.6 VIGS载体构建和农杆菌转化第34-35页
    2.7 VIGS体系的构建第35页
    2.8 GFP过表达载体的构建第35-36页
    2.9 本氏烟瞬时表达体系的建立第36页
    2.10 总蛋白的提取第36页
    2.11 灰霉菌的培养第36-38页
        2.11.1 灰霉菌接种处理第37页
        2.11.2 灰霉菌病斑大小的统计第37页
        2.11.3 灰霉菌菌量测定第37-38页
    2.12 Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000接种处理第38页
    2.13 ROS的测定第38-39页
    2.14 台酚蓝染色、DAB和NBT染色第39页
    2.15 亚细胞定位第39-40页
第三章 Trhelix转录因子家族基因的鉴定、表达模式分析及抗病功能研究第40-74页
    3.1 Trhelix转录因子家族基因的鉴定和蛋白结构域分析第40-42页
        3.1.1 番茄Trihelix转录因子家族基因的克隆与鉴定第40页
        3.1.2 番茄Trihelix转录因子家族蛋白结构域分析第40-42页
    3.2 Trihelix转录因子家族基因在灰霉菌和丁香假单胞菌番茄致病变种诱导下的表达分析第42-46页
    3.3 Trhelix转录因子家族基因的抗病功能研究第46-58页
        3.3.1 接种灰霉菌的病害表型及病原菌生物量第46-52页
        3.3.2 本氏烟瞬时过表达4个Trihelix转录因子对灰霉菌的敏感性测定第52-56页
        3.3.3 4个Trihelix转录因子家族基因接种PstDC3000的病害表型及病原菌生物量第56-58页
    3.4 4个Trihelix转录因子家族基因的抗病机理分析第58-72页
        3.4.1 SIGT7/SIGT13/SIGT14/SIGT15沉默植株在chitooctaose与flg22诱导下的ROS检测第58-60页
        3.4.2 SIGT7/SIGT13/SIGT14/SIGT15沉默植株在灰霉菌诱导下的过氧化氢与超氧阴离子积累情况第60-68页
        3.4.3 SIGT7/SIGT13/SIGT14/SIGT15沉默植株在灰霉菌诱导时PR基因的表达分析第68-72页
    3.5 SIGT7、SIGT13、SIGT14和SIGT15亚细胞定位第72-74页
第四章 小结与讨论第74-77页
参考文献第77-93页
附录 本文的引物序列第93-101页

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