| 摘要 | 第8-10页 |
| Summary | 第10-11页 |
| 缩略词 | 第14-17页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 1 文献综述 | 第19-36页 |
| 1.1 绒毡层的发育及其功能 | 第19-26页 |
| 1.1.1 植物花粉囊和绒毡层发育过程 | 第19-21页 |
| 1.1.2 植物花粉形成过程 | 第21页 |
| 1.1.3 绒毡层降解与花粉发育 | 第21-23页 |
| 1.1.4 花粉四分体时期绒毡层表达的关键转录因子对花粉壁发育的影响 | 第23-26页 |
| 1.2 植物lncRNA的功能及作用机制 | 第26-36页 |
| 1.2.1 LncRNA的种类 | 第26-29页 |
| 1.2.2 植物lncRNA的高通量分析与鉴定 | 第29-30页 |
| 1.2.3 植物lncRNA在生物学过程中的作用机制 | 第30-36页 |
| 2 白菜BrMYB80bSSLncRNA表达验证及全长序列获得 | 第36-57页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-46页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第36-37页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第37页 |
| 2.1.3 白菜基因组DNA的提取 | 第37-38页 |
| 2.1.4 总RNA的提取与cDNA合成 | 第38-40页 |
| 2.1.5 BrMYB80bSSLncRNA以及BrMYB80a与BrMYB80b的时空表达分析 | 第40页 |
| 2.1.6 RACE法获得BrMYB80bSSLncRNA全长 | 第40-44页 |
| 2.1.7 BrMYB80b基因座转录本分析 | 第44-45页 |
| 2.1.8 LncRNA编码潜能分析与二级结构预测 | 第45页 |
| 2.1.9 AtMYB80与BrMYB80a和BrMYB80b之间共线性分析 | 第45-46页 |
| 2.2 结果与分析 | 第46-54页 |
| 2.2.1 BrMYB80bSSLncRNA以及BrMYB80a与BrMYB80b在'Bcajh97-01A/B'中的差异表达 | 第46页 |
| 2.2.2 BrMYB80bSSLncRNA全长序列的获得 | 第46页 |
| 2.2.3 BrMYB80b基因座的转录本分析 | 第46-54页 |
| 2.3 讨论 | 第54-57页 |
| 2.3.1 BrMYB80bSSLncRNA是一条正义lncRNA,可能参与白菜花粉发育调控 | 第54-55页 |
| 2.3.2 白菜的BrMYB80a与BrMYB80b可能出现亚功能化,其延后表达与'Bcajh97-01A'的花粉败育相关 | 第55-57页 |
| 3 BrMYB80bSSLncRNA在白菜花粉发育中的生物学功能鉴定 | 第57-79页 |
| 3.1 材料与方法 | 第57-67页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第57页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第57-58页 |
| 3.1.3 白菜BrMYB80bSSLncRNA过表达载体的构建 | 第58-59页 |
| 3.1.4 白菜BrMYB80bSSLncRNA过表达转基因材料的构建 | 第59-62页 |
| 3.1.5 转基因菜心的检测 | 第62-63页 |
| 3.1.6 转基因菜心的形态学和细胞学观察 | 第63-65页 |
| 3.1.7 拟南芥的遗传转化 | 第65-66页 |
| 3.1.8 拟南芥的筛选和检测及表型观察 | 第66-67页 |
| 3.2 结果与分析 | 第67-77页 |
| 3.2.1 成功构建BrMYB80bSSLncRNA过表达载体 | 第67页 |
| 3.2.2 成功获得BrMYB80bSSLncRNA过表达菜心 | 第67-68页 |
| 3.2.3 BrMYB80bSSLncRNA过表达的转基因菜心中花粉出现四个萌发沟 | 第68-75页 |
| 3.2.4 BrMYB80bSSLncRNA在拟南芥中的异源表达未引起花粉萌发沟的变化 | 第75-77页 |
| 3.3 讨论 | 第77-79页 |
| 3.3.1 BrMYB80bSSLncRNA在菜心中的过量表达可能会影响花粉萌发沟的形成 | 第77页 |
| 3.3.2 BrMYB80bSSLncRNA可能通过影响BrMYB80b的表达来影响花粉萌发沟形成 | 第77-79页 |
| 4 白菜BrMYB80a与BrMYB80b功能缺失转基因载体的构建和遗传转化 | 第79-87页 |
| 4.1 材料与方法 | 第79-82页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第79页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第79-80页 |
| 4.1.3 白菜BrMYB80a与BrMYB80b的CRISPR-cas9敲除载体的构建 | 第80-82页 |
| 4.1.4 白菜BrMYB80a与BrMYB80b功能缺失的转基因材料的构建 | 第82页 |
| 4.1.5 转基因菜心的检测 | 第82页 |
| 4.2 结果与分析 | 第82-85页 |
| 4.2.1 BrMYB80a与BrMYB80b序列分析 | 第82-83页 |
| 4.2.2 BrMYB80a与BrMYB80b功能缺失转基因载体的构建与遗传转化 | 第83-85页 |
| 4.3 讨论 | 第85-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-93页 |
