| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-18页 |
| 1.1 植物microRNA的简介 | 第11-12页 |
| 1.2 STTM简介 | 第12-14页 |
| 1.3 miR398、miR 164、miR 167和miR 169的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.3.1 miR398的研究进展 | 第14页 |
| 1.3.2 miR164的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.3 miR167的研究进展 | 第15页 |
| 1.3.4 miR169的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 干旱胁迫对植物的影响 | 第16页 |
| 1.5 本研究的技术路线和目的意义 | 第16-18页 |
| 1.5.1 技术路线 | 第16-17页 |
| 1.5.2 目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 实验过程 | 第18-34页 |
| 2.1 实验材料，试剂和仪器 | 第18-22页 |
| 2.1.1 实验材料，菌种 | 第18页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第18-21页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.2 实验步骤 | 第22-34页 |
| 2.2.1 设计引物 | 第22页 |
| 2.2.2 目的序列的PCR扩增 | 第22-23页 |
| 2.2.3 扩增得到的PCR产物回收 | 第23页 |
| 2.2.4 目的片段与表达载体连接 | 第23-24页 |
| 2.2.5 连接产物的转化 | 第24-26页 |
| 2.2.6 重组质粒的筛选与检测 | 第26-27页 |
| 2.2.7 烟草遗传转化和阳性植株的鉴定 | 第27-30页 |
| 2.2.8 对烟草的干旱胁迫处理 | 第30-31页 |
| 2.2.9 膜保护酶的活性测定 | 第31-32页 |
| 2.2.10 叶片相对水含量的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.11 可溶性蛋白质含量的测定 | 第33-34页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第34-45页 |
| 3.1 STTM的构建及鉴定 | 第34-35页 |
| 3.1.1 STTM的构建 | 第34页 |
| 3.1.2 PCR扩增与目的片段的获得 | 第34-35页 |
| 3.2 表达载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.1 表达载体的构建 | 第35页 |
| 3.2.2 菌落PCR鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2.3 酶切检测 | 第36页 |
| 3.2.4 测序分析 | 第36页 |
| 3.3 烟草的转化与阳性植株鉴定 | 第36-40页 |
| 3.3.1 农杆菌介导的烟草遗传转化途径 | 第36-37页 |
| 3.3.2 不同STTM筛选效率对比 | 第37-38页 |
| 3.3.3 烟草阳性植株的检测 | 第38-39页 |
| 3.3.4 烟草阳性植株移栽 | 第39-40页 |
| 3.4 植物的抗旱性结果与分析 | 第40-45页 |
| 3.4.1 烟草干旱处理 | 第40页 |
| 3.4.2 膜保护酶活力测定的结果与分析 | 第40-42页 |
| 3.4.3 可溶性蛋白含量测定的结果与分析 | 第42-43页 |
| 3.4.4 叶片相对水含量的测定结果与分析 | 第43-44页 |
| 3.4.5 综合指标分析 | 第44-45页 |
| 第四章 讨论 | 第45-47页 |
| 第五章 结论 | 第47-48页 |
| 5.1 全文总结 | 第47页 |
| 5.2 本实验的创新点 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 攻读硕士学位期间取得的成果 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-57页 |