| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第15-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-24页 |
| 1.1 研究目的和意义 | 第16页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第16-19页 |
| 1.2.1 断奶应激对肠道形态发育及功能的影响 | 第16-17页 |
| 1.2.2 断奶应激对肠道黏膜屏障的影响 | 第17-19页 |
| 1.3 蛋白质组学 | 第19-23页 |
| 1.3.1 蛋白质组学概念及发展 | 第19页 |
| 1.3.2 基于质谱的蛋白质组学研究策略 | 第19-20页 |
| 1.3.3 蛋白质组学研究关键技术 | 第20-23页 |
| 1.4 研究内容和技术路线 | 第23-24页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第23页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 21日龄断奶对仔猪肠道屏障的影响研究 | 第24-37页 |
| 2.1 材料与方法 | 第24-29页 |
| 2.1.1 试剂与仪器准备 | 第24页 |
| 2.1.2 试验设计 | 第24-25页 |
| 2.1.3 样品采集与测定 | 第25-28页 |
| 2.1.4 数据统计与分析 | 第28-29页 |
| 2.2 结果 | 第29-35页 |
| 2.2.1 生长性能和腹泻率 | 第29页 |
| 2.2.2 肠道组织形态 | 第29-32页 |
| 2.2.3 肠上皮细胞结构和肠道通透性 | 第32-33页 |
| 2.2.4 肠道黏膜紧密连接蛋白基因表达量 | 第33页 |
| 2.2.5 肠道黏膜细胞因子基因表达量 | 第33-35页 |
| 2.3 讨论 | 第35-36页 |
| 2.4 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 仔猪肠道黏膜蛋白质组学的鉴定方法研究 | 第37-46页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-39页 |
| 3.1.1 试剂与仪器准备 | 第37页 |
| 3.1.2 试验材料 | 第37页 |
| 3.1.3 蛋白质提取和纯化方法 | 第37-38页 |
| 3.1.4 仔猪黏膜蛋白质组分析 | 第38-39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-43页 |
| 3.2.1 不同蛋白质提取缓冲液比较 | 第39-40页 |
| 3.2.2 不同蛋白质纯化方法比较 | 第40页 |
| 3.2.3 丙酮沉淀法质谱图精度分析 | 第40-42页 |
| 3.2.4 不同肽段洗脱梯度比较 | 第42-43页 |
| 3.3 讨论 | 第43-45页 |
| 3.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 第四章 基于SWATH技术研究断奶对仔猪肠道黏膜蛋白表达的影响 | 第46-58页 |
| 4.1 材料与方法 | 第46-49页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第46页 |
| 4.1.2 蛋白质提取和酶解 | 第46-47页 |
| 4.1.3 建立SWATH定量数据分析库 | 第47页 |
| 4.1.4 SWATH分析和目标数据提取 | 第47-48页 |
| 4.1.5 qRT-PCR检验差异蛋白的mRNA表达水平 | 第48页 |
| 4.1.6 数据库检索、统计和生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 4.2 结果 | 第49-54页 |
| 4.2.1 蛋白质浓度和条带分析 | 第49-50页 |
| 4.2.2 mapDIA软件重新组装离子 | 第50页 |
| 4.2.3 肠道黏膜蛋白鉴定结果 | 第50页 |
| 4.2.4 差异表达蛋白GO功能分析 | 第50-51页 |
| 4.2.5 差异表达蛋白KEGG通路分析 | 第51-54页 |
| 4.2.6 qRT-PCR验证差异蛋白 | 第54页 |
| 4.3 讨论 | 第54-56页 |
| 4.3.1 断奶应激诱导细菌感染肠道 | 第54-55页 |
| 4.3.2 断奶应激引起仔猪物质代谢紊乱 | 第55-56页 |
| 4.3.3 断奶应激打破细胞稳态 | 第56页 |
| 4.4 本章小结 | 第56-58页 |
| 第五章 全文结论 | 第58-59页 |
| 5.1 结论 | 第58页 |
| 5.2 有待深入研究的问题 | 第58页 |
| 5.3 主要创新点 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 附录 | 第68-79页 |
| 附图1 KEGG富集到的上皮细胞细菌入侵通路图 | 第68-69页 |
| 附表2 断奶应激相关的差异蛋白列表 | 第69-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 作者简历 | 第80页 |