| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-24页 |
| 1.1 瓜类细菌性果斑病研究概述 | 第14-18页 |
| 1.1.1 瓜类细菌性果斑病发生与为害 | 第14-15页 |
| 1.1.2 西瓜噬酸菌分类地位及病原生物学 | 第15页 |
| 1.1.3 发病症状及病害侵染循环 | 第15-16页 |
| 1.1.4 西瓜噬酸菌的遗传多样性 | 第16页 |
| 1.1.5 西瓜噬酸菌致病机理 | 第16-17页 |
| 1.1.6 瓜类细菌性果斑病的防治方法 | 第17-18页 |
| 1.2 植物与病原细菌互作机制研究进展 | 第18-21页 |
| 1.2.1 植物免疫系统概述 | 第18-19页 |
| 1.2.2 植物病原细菌T3SS调控T3Es的表达 | 第19-20页 |
| 1.2.3 植物病原细菌T3Es的鉴定方法 | 第20页 |
| 1.2.4 植物病原细菌T3Es抑制植物免疫反应 | 第20-21页 |
| 1.2.5 西瓜噬酸菌中T3Es研究进展 | 第21页 |
| 1.3 光与植物病原细菌致病性的关系 | 第21-23页 |
| 1.3.1 光对植物病原细菌及寄主抗性反应的影响 | 第21-22页 |
| 1.3.2 细菌中光受体蛋白研究进展 | 第22页 |
| 1.3.3 LOV蛋白研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 1.4.1 效应蛋白鉴定及功能分析 | 第23页 |
| 1.4.2 光调控西瓜噬酸菌致病性差异 | 第23-24页 |
| 第二章 T3SS核心基因hrpG以及hrpX的功能分析 | 第24-48页 |
| 2.1 试验材料、试剂及仪器 | 第24-27页 |
| 2.1.1 供试菌株、质粒及培养条件 | 第24-25页 |
| 2.1.2 试验中所用到的培养基及溶液 | 第25-27页 |
| 2.1.3 试验中用到的试剂及仪器 | 第27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-36页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第27-29页 |
| 2.2.2 细菌基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.3 载体构建 | 第30-32页 |
| 2.2.4 筛选突变体菌株 | 第32-33页 |
| 2.2.5 互补菌株的构建 | 第33页 |
| 2.2.6 致病性测定及过敏性坏死反应测定 | 第33-34页 |
| 2.2.7 活性氧(ROS)测定 | 第34页 |
| 2.2.8 生物膜测定 | 第34页 |
| 2.2.9 目的基因转录水平表达测定 | 第34-35页 |
| 2.2.10 启动子活性测定 | 第35页 |
| 2.2.11 Westernblot试验 | 第35-36页 |
| 2.2.12 统计分析 | 第36页 |
| 2.3 结果与分析 | 第36-45页 |
| 2.3.1 西瓜噬酸菌Aac5菌株中hrpG以及hrpX基因同源性分析 | 第36-37页 |
| 2.3.2 西瓜噬酸菌Aac5中hrpG以及hrpX缺失突变体的构建 | 第37-39页 |
| 2.3.3 西瓜噬酸菌Aac5中hrpG以及hrpX互补菌株的构建 | 第39页 |
| 2.3.4 hrpG以及hrpX负调控西瓜噬酸菌生物膜的形成 | 第39-40页 |
| 2.3.5 hrpG以及hrpX正调控西瓜噬酸菌诱导非寄主HR能力 | 第40-41页 |
| 2.3.6 hrpG以及hrpX负调控西瓜噬酸菌诱导寄主ROS爆发能力 | 第41-42页 |
| 2.3.7 hrpG以及hrpX正调控西瓜噬酸菌致病性 | 第42-43页 |
| 2.3.8 hrpG为hrpX上游调控因子 | 第43-44页 |
| 2.3.9 hrpG以及hrpX调控T3Es的表达 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-48页 |
| 第三章 西瓜噬酸菌中候选T3Es的筛选 | 第48-58页 |
| 3.1 材料与方法 | 第48-49页 |
| 3.1.1 供试菌株、质粒及培养条件 | 第48-49页 |
| 3.1.2 试验中所用到的培养基及溶液 | 第49页 |
| 3.1.3 试验中用到的试剂及仪器 | 第49页 |
| 3.2 试验方法 | 第49-53页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第49-52页 |
| 3.2.2 转录组测定及分析过程 | 第52页 |
| 3.2.3 生物信息学预测分析T3Es | 第52页 |
| 3.2.4 Ace1与PCD激发子共表达试验 | 第52-53页 |
| 3.2.5 定量PCR分析基因表达量变化 | 第53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-57页 |
| 3.3.1 转录组差异基因分析 | 第53-54页 |
| 3.3.2 转录组差异基因与生物信息学关联分析预测T3Es | 第54-55页 |
| 3.3.3 候选效应蛋白抑制Bax诱导的PCD能力 | 第55-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 候选效应蛋白Ace1的鉴定及功能分析 | 第58-71页 |
| 4.1 材料与方法 | 第58页 |
| 4.1.1 供试菌株、质粒及培养条件 | 第58页 |
| 4.1.2 试验中所用到的培养基及溶液 | 第58页 |
| 4.1.3 试验中用到的试剂及仪器 | 第58页 |
| 4.2 试验方法 | 第58-61页 |
| 4.2.1 引物设计 | 第58-59页 |
| 4.2.2 生物信息学分析 | 第59页 |
| 4.2.3 ace1基因敲除及互补菌株构建 | 第59页 |
| 4.2.4 西瓜噬酸菌在寄主体内生长能力测定 | 第59-60页 |
| 4.2.5 ROS测定试验 | 第60页 |
| 4.2.6 胼胝质沉积测定试验 | 第60页 |
| 4.2.7 蛋白亚细胞定位试验 | 第60页 |
| 4.2.8 Ace1抑制AvrPto诱导PCD能力试验 | 第60-61页 |
| 4.2.9 IP试验及质谱分析 | 第61页 |
| 4.2.10 luc双分子荧光试验 | 第61页 |
| 4.3 结果与分析 | 第61-69页 |
| 4.3.1 Ace1的克隆及生物信息学分析 | 第61-62页 |
| 4.3.2 Ace1为T3SS分泌的效应蛋白 | 第62-63页 |
| 4.3.3 T3SS中核心基因hrpG及hrpX调控ace1的表达 | 第63-64页 |
| 4.3.4 ace1缺失突变株以及互补菌株的构建 | 第64-65页 |
| 4.3.5 Ace1正调控西瓜噬酸菌致病能力 | 第65-66页 |
| 4.3.6 Ace1在本氏烟中定位于整个细胞 | 第66-67页 |
| 4.3.7 Ace1抑制寄主中ROS爆发 | 第67页 |
| 4.3.8 Ace1抑制寄主中胼胝质的沉积能力 | 第67-68页 |
| 4.3.9 Ace1抑制AvrPto诱导的PCD反应 | 第68-69页 |
| 4.3.10 Ace1与ACAT1互作关系验证 | 第69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-71页 |
| 第五章 光照及黑暗条件对西瓜噬酸菌致病性的差异研究 | 第71-83页 |
| 5.1 材料与方法 | 第71-72页 |
| 5.1.1 供试菌株、质粒及培养条件 | 第71页 |
| 5.1.2 培养基及溶液 | 第71-72页 |
| 5.1.3 试验中所用到的试剂及仪器 | 第72页 |
| 5.2 试验方法 | 第72-74页 |
| 5.2.1 引物设计 | 第72页 |
| 5.2.2 光照以及黑暗条件下运动性测定 | 第72-73页 |
| 5.2.3 光照以及黑暗条件下生物膜测定 | 第73页 |
| 5.2.4 突变体的构建及互补菌株的构建 | 第73页 |
| 5.2.5 光照以及黑暗条件下ROS测定 | 第73页 |
| 5.2.6 光照以及黑暗条件下胼胝质测定 | 第73页 |
| 5.2.7 光照以及黑暗条件下菌落形态观察 | 第73页 |
| 5.2.8 目的基因转录水平检测 | 第73页 |
| 5.2.9 致病性测定 | 第73-74页 |
| 5.3 结果与分析 | 第74-81页 |
| 5.3.1 光照抑制西瓜噬酸菌运动性 | 第74页 |
| 5.3.2 光照抑制西瓜噬酸菌生物膜形成 | 第74-75页 |
| 5.3.3 光照及黑暗条件下西瓜噬酸菌菌落形态存在差异 | 第75页 |
| 5.3.4 光照促进寄主响应西瓜噬酸菌后胼胝质沉积 | 第75-76页 |
| 5.3.5 光照促进寄主响应西瓜噬酸菌后ROS爆发 | 第76-77页 |
| 5.3.6 光照抑制西瓜噬酸菌T3SS的表达 | 第77-78页 |
| 5.3.7 光照抑制西瓜噬酸菌对本氏烟的致病能力 | 第78页 |
| 5.3.8 lov在光照条件下抑制西瓜噬酸菌的运动能力 | 第78-79页 |
| 5.3.9 lov对西瓜噬酸菌致病能力无显著影响 | 第79-80页 |
| 5.3.10 光照及黑暗条件下西瓜噬酸菌蛋白组差异分析 | 第80页 |
| 5.3.11 黑暗条件诱导潜在III型效应蛋白Ace4的表达 | 第80-81页 |
| 5.4 讨论 | 第81-83页 |
| 第六章 结论与展望 | 第83-85页 |
| 6.1 结论 | 第83-84页 |
| 6.2 展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 作者简介 | 第97页 |
