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辐照致弱捻转血矛线虫三期幼虫凋亡坏死的细胞与分子基础的初步研究

摘要第4-6页
abstract第6-7页
英文缩略表第12-13页
第一章 绪论第13-26页
    1.1 捻转血矛线虫生物学概述第13-15页
        1.1.1 捻转血矛线虫及捻转血矛线虫病第13页
        1.1.2 捻转血矛生活史第13-14页
        1.1.3 捻转血矛线虫与宿主的相互作用第14-15页
    1.2 捻转血矛线虫疫苗第15-16页
        1.2.1 捻转血矛线虫疫苗的研究进展第15-16页
        1.2.2 辐照致弱捻转血矛线虫的研究进展第16页
    1.3 细胞凋亡与坏死第16-23页
        1.3.1 细胞凋亡通路第17-19页
            1.3.1.1 线粒体通路第17页
            1.3.1.2 死亡受体通路第17-18页
            1.3.1.3 内质网通路第18-19页
        1.3.2 细胞凋亡常用检测方法第19-20页
            1.3.2.1 形态学检测第19页
            1.3.2.2 DNA片段化检测第19-20页
            1.3.2.3 TUNEL测定法第20页
            1.3.2.4 流式细胞仪分析第20页
        1.3.3 线虫中的细胞凋亡第20页
        1.3.4 细胞的免疫原性死亡第20-23页
            1.3.4.1 钙网织蛋白第21页
            1.3.4.2 热休克蛋白第21-22页
            1.3.4.3 三磷酸腺苷(ATP)第22-23页
    1.4 钙网织蛋白和热休克蛋白概述第23-24页
        1.4.1 钙网织蛋白生物学功能第23-24页
        1.4.2 热休克生物学功能第24页
    1.5 山羊外周血淋巴细胞和细胞因子第24-26页
第二章 辐照致弱捻转血矛线虫三期幼虫细胞的凋亡和坏死研究第26-34页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 实验动物第26页
        2.1.2 主要试剂和仪器第26页
        2.1.3 溶液配制第26-27页
    2.2 实验方法第27-28页
        2.2.1 不同时期捻转血矛线虫三期幼虫虫体细胞凋亡坏死检测第27页
        2.2.2 不同时期捻转血矛线虫三期幼虫培养上清ATP检测第27-28页
    2.3 实验结果第28-32页
        2.3.1 不同时期捻转血矛线虫三期幼虫虫体细胞的凋亡情况第28-31页
        2.3.2 不同时期捻转血矛线虫三期幼虫培养上清ATP检测第31-32页
    2.4 讨论第32-34页
第三章 Hc-CRT和Hc-HSP70蛋白在辐照和正常捻转血矛线虫幼虫上的表达与分布研究第34-43页
    3.1 实验材料第34-35页
        3.1.1 实验菌株第34页
        3.1.2 实验动物第34页
        3.1.3 主要试剂和仪器第34-35页
    3.2 实验方法第35-37页
        3.2.1 Hc-CRT和Hc-Hsp70重组蛋白的表达第35页
        3.2.2 Hc-CRT和Hc-Hsp70重组蛋白的表达纯化第35-36页
        3.2.3 Hc-CRT和Hc-Hsp70重组蛋白的免疫原性分析第36-37页
        3.2.4 切片制备第37页
    3.3 实验结果第37-41页
        3.3.1 Hc-CRT和Hc-Hsp70蛋白的纯化和鉴定第37-38页
        3.3.2 Hc-CRT和Hc-Hsp70免疫原型鉴定第38-39页
        3.3.3 对Hc-CRT和Hc-HSP70两个蛋白在辐照组和正常组的三期捻转血矛线虫虫体/细胞上的表达特征进行比较研究第39-41页
    3.4 讨论第41-43页
第四章 Hc-CRT和Hc-HSP70活化羊PBMC免疫功能的研究第43-52页
    4.1 实验材料第43页
        4.1.1 实验动物第43页
        4.1.2 主要试剂和仪器第43页
    4.2 实验方法第43-46页
        4.2.1 抗血清的制备第43-44页
        4.2.2 Hc-CRT和Hc-Hsp70重组蛋白Westernblot分析第44页
        4.2.3 Hc-CRT和Hc-HSP70蛋白促进巨噬细胞增殖的检测第44页
        4.2.4 Griess法检测Hc-CRT和Hc-HSP70刺激巨噬细胞后NO的分泌情况第44-45页
        4.2.5 RT-PCR法检测PBMC细胞上几种细胞因子转录水平的表达第45-46页
    4.3 实验结果第46-50页
        4.3.1 Hc-CRT和Hc-Hsp70重组蛋白识别感染山羊血清的Western Blotting第46-47页
        4.3.2 Hc-CRT和Hc-Hsp70蛋白促进山羊PBMC细胞增殖的检测第47-48页
        4.3.3 Hc-CRT和Hc-Hsp70蛋白促进山羊PBMC细胞释放NO第48-49页
        4.3.4 RT-PCR检测山羊PBMC细胞细胞因子表达情况第49-50页
    4.4 讨论第50-52页
第五章 全文总结第52-54页
参考文献第54-58页
攻读学位期间取得的研究成果第58-59页
致谢第59页

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