| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第11-16页 |
| 1.1 环状RNA简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 环状RNA的研究历程 | 第11页 |
| 1.1.2 环状RNA的特征 | 第11-12页 |
| 1.1.3 环状RNA的形成机制 | 第12-13页 |
| 1.1.4 环状RNA的生物学功能 | 第13页 |
| 1.1.5 环状RNA在植物中的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2 突变体创制方法与基因编辑技术 | 第14-15页 |
| 1.3 立题依据及意义 | 第15页 |
| 1.4 研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第16页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 工程菌株 | 第16页 |
| 2.2 实验试剂 | 第16-17页 |
| 2.3 实验仪器 | 第17页 |
| 2.4 实验方法 | 第17-34页 |
| 2.4.1 水稻CRISPR-Cas9定向修饰骨架载体 | 第17-18页 |
| 2.4.2 水稻circRNA的sgRNA靶位点选择及设计 | 第18-19页 |
| 2.4.3 载体构建过程 | 第19-21页 |
| 2.4.4 大肠杆菌DH5α感受态制备及转化 | 第21-22页 |
| 2.4.5 菌落PCR筛选阳性菌落 | 第22-23页 |
| 2.4.6 质粒提取 | 第23-24页 |
| 2.4.7 水稻原生质体制备及转化 | 第24页 |
| 2.4.8 农杆菌感受态制备及转化 | 第24-25页 |
| 2.4.9 水稻遗传转化 | 第25页 |
| 2.4.10 水稻基因组DNA提取 | 第25-26页 |
| 2.4.11 水稻再生植株转基因阳性检测 | 第26页 |
| 2.4.12 水稻环状RNA单位点定向修饰突变体材料鉴定 | 第26-29页 |
| 2.4.13 环状RNA大片段敲除突变体检测 | 第29-32页 |
| 2.4.14 环状RNA大片段敲除纯合突变体检测 | 第32-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-49页 |
| 3.1 水稻环状RNA的CRISPR-Cas9定向修饰表达载体构建 | 第34-35页 |
| 3.2 水稻环状RNA敲除CRISPR-Cas9定向修饰表达载体活性验证 | 第35-36页 |
| 3.3 水稻再生植株转基因阳性鉴定 | 第36-37页 |
| 3.4 T0代水稻环状RNA单位点突变体材料鉴定 | 第37-38页 |
| 3.5 T0代环状RNA大片段敲除突变体材料鉴定 | 第38-41页 |
| 3.5.1 Os02circ25329位点大片段敲除突变体材料鉴定 | 第39页 |
| 3.5.2 Os06circ02797位点大片段敲除突变体材料鉴定 | 第39页 |
| 3.5.3 Os03circ00204位点大片段敲除突变体材料鉴定 | 第39-40页 |
| 3.5.4 Os01circ14411位点大片段敲除突变体材料鉴定 | 第40页 |
| 3.5.5 Os05circ02465位点大片段敲除突变体材料鉴定 | 第40-41页 |
| 3.6 T1代水稻环状RNA大片段敲除纯合突变体材料筛选 | 第41-49页 |
| 3.6.1 Os02circ25329位点大片段敲除纯合突变体T1代材料筛选 | 第41-43页 |
| 3.6.2 Os06circ02797位点大片段敲除纯合突变体T1代材料筛选 | 第43-44页 |
| 3.6.3 Os03circ00204位点大片段敲除纯合突变体T1代材料筛选 | 第44-46页 |
| 3.6.4 Os01circ14411位点大片段敲除纯合突变体T1代材料筛选 | 第46页 |
| 3.6.5 Os05circ02465位点大片段敲除纯合突变体T1代材料筛选 | 第46-49页 |
| 第四章 讨论 | 第49-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 攻硕期间取得的研究成果 | 第57页 |
