中文摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-29页 |
1.1 盐胁迫对植物的伤害 | 第11-13页 |
1.1.1 渗透胁迫 | 第11-12页 |
1.1.2 离子毒害 | 第12页 |
1.1.3 营养亏缺 | 第12页 |
1.1.4 氧化胁迫 | 第12-13页 |
1.2 植物的抗盐机理 | 第13-16页 |
1.2.1 植物对盐分胁迫的表观适应 | 第13-14页 |
1.2.2 植物对盐分胁迫的生理适应 | 第14-16页 |
1.3 Na~+/H~+逆向转运蛋白研究进展 | 第16-21页 |
1.3.1 质膜Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第17-19页 |
1.3.2 液泡膜Na~+/H~+逆向转运蛋白 | 第19-21页 |
1.4 DNA shuffling技术 | 第21-28页 |
1.4.1 DNA shuffling技术简介 | 第22-23页 |
1.4.2 DNA shuffling技术的改进—family shuffling | 第23-24页 |
1.4.3 DNA改组文库的构建 | 第24-25页 |
1.4.4 DNA改组文库的筛选策略 | 第25页 |
1.4.5 DNA改组技术的应用 | 第25-28页 |
1.5 目的意义与研究内容 | 第28-29页 |
第二章 植物Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的家族改组及其筛选 | 第29-53页 |
2.1 材料 | 第29-31页 |
2.1.1 菌种及质粒 | 第29-30页 |
2.1.2 主要试剂 | 第30页 |
2.1.3 培养基 | 第30页 |
2.1.4 主要仪器和设备 | 第30-31页 |
2.2 方法 | 第31-39页 |
2.2.1 DNA family Shuffling过程 | 第31-35页 |
2.2.2 酵母突变质粒文库的构建 | 第35-36页 |
2.2.3 酵母突变株的转化及耐高盐筛选 | 第36-38页 |
2.2.4 改组克隆的序列测定及生物信息学分析 | 第38-39页 |
2.3 结果与分析 | 第39-49页 |
2.3.1 DNA family Shuffling | 第39-42页 |
2.3.2 改组文库的构建及筛选 | 第42-44页 |
2.3.3 改组基因序列分析 | 第44-49页 |
2.4 讨论 | 第49-52页 |
2.4.1 Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的家族改组 | 第49页 |
2.4.2 DNA改组程序的优化 | 第49-50页 |
2.4.3 改组文库的筛选 | 第50-51页 |
2.4.4 改组基因的序列分析 | 第51-52页 |
2.5 本章小结 | 第52-53页 |
第三章 改组基因的亚细胞定位及功能验证 | 第53-67页 |
3.1 材料 | 第53页 |
3.1.1 菌种 | 第53页 |
3.1.2 主要试剂 | 第53页 |
3.1.3 主要仪器及设备 | 第53页 |
3.2 方法 | 第53-58页 |
3.2.1 改组基因和亲本基因的耐盐性比较 | 第53-56页 |
3.2.2 改组基因和亲本基因对其他阳离子的耐受性比较 | 第56页 |
3.2.3 改组基因的亚细胞定位研究 | 第56-58页 |
3.3 结果与分析 | 第58-65页 |
3.3.1 改组基因的耐盐性 | 第58-62页 |
3.3.2 改组基因对KC1,LiCl和Hyg B的耐受性 | 第62页 |
3.3.3 改组蛋白在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位 | 第62-65页 |
3.4 讨论 | 第65-66页 |
3.4.1 改组Na~+/H~+逆向转运蛋白基因在酵母突变体中耐NaCl能力的比较 | 第65页 |
3.4.2 改组Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的定位 | 第65-66页 |
3.5 本章小结 | 第66-67页 |
第四章 过量表达改组Na~+/H~+逆向转运蛋白基因对转基因烟草耐盐性的影响 | 第67-95页 |
4.1 材料 | 第67-68页 |
4.1.1 菌种、质粒及烟草 | 第67页 |
4.1.2 主要试剂 | 第67页 |
4.1.3 培养基 | 第67-68页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第68页 |
4.2 方法 | 第68-78页 |
4.2.1 植物表达载体的构建及鉴定 | 第68页 |
4.2.2 表达载体的农杆菌转化 | 第68-69页 |
4.2.3 叶盘法转化烟草及植株再生 | 第69-70页 |
4.2.4 转基因烟草的PCR检测 | 第70-71页 |
4.2.5 转基因烟草的半定量PCR分析 | 第71-73页 |
4.2.6 转基因烟草的耐盐性检测 | 第73-78页 |
4.2.7 数据处理 | 第78页 |
4.3 结果及分析 | 第78-91页 |
4.3.1 植物表达载体构建及农杆菌转化 | 第78-79页 |
4.3.2 转基因烟草的获得 | 第79-80页 |
4.3.3 转基因烟草的分子鉴定 | 第80-82页 |
4.3.4 过表达改组基因提高了转基因烟草的耐盐能力 | 第82-91页 |
4.4 讨论 | 第91-93页 |
4.5 本章小结 | 第93-95页 |
第五章 结论与展望 | 第95-97页 |
5.1 主要研究结论 | 第95-96页 |
5.2 主要创新点 | 第96页 |
5.3 展望 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-107页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第107-109页 |
致谢 | 第109-110页 |