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山东小麦根茎部主要真菌病害病原的分离鉴定和分子检测

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 引言第12-34页
    1.1 小麦根茎部主要真菌病害的研究进展第12-29页
        1.1.1 小麦纹枯病研究进展第12-18页
            1.1.1.1 小麦纹枯病的发病规律第13-15页
            1.1.1.2 病原第15-16页
            1.1.1.3 病害防治第16-18页
        1.1.2 小麦根腐病研究进展第18-23页
            1.1.2.1 小麦根腐病发病规律第19-20页
            1.1.2.2 病原第20-21页
            1.1.2.3 病害防治第21-23页
        1.1.3 小麦全蚀病的研究进展第23-29页
            1.1.3.1 小麦全蚀病发病规律第23-25页
            1.1.3.2 病原第25-27页
            1.1.3.3 病害防治第27-29页
    1.2 植物病原真菌的分子检测技术研究进展第29-32页
    1.3 本研究的目的意义第32-34页
2 材料与方法第34-41页
    2.1 小麦根茎部病害样本的采集及菌株的分离与鉴定第34页
        2.1.1 田间样本的采集第34页
        2.1.2 供试培养基第34页
        2.1.3 病原物的分离纯化第34页
    2.2 镰孢属真菌菌株形态鉴定第34页
    2.3 供试菌株DNA的提取第34-39页
        2.3.1 DNA提取试剂第35页
        2.3.2 所用仪器第35页
        2.3.3 DNA提取步骤第35-36页
        2.3.4 PCR扩增第36-37页
        2.3.5 特异性扩增片段的回收第37-38页
        2.3.6 回收产物检测第38页
        2.3.7 特异性扩增片段的克隆第38-39页
            2.3.7.1 克隆反应体系的建立第38页
            2.3.7.2 转化第38页
            2.3.7.3 单克隆检测第38页
            2.3.7.4 序列测定及分析第38-39页
    2.4 小麦根腐病病原菌的致病性测定第39页
        2.4.1 致病性待测菌株的选取第39页
        2.4.2 温室内接种致病性的测定第39页
    2.5 小麦根茎部发病植株上病菌的分子检测第39页
        2.5.1 发病部位基因组DNA的提取第39页
        2.5.2 对提取的总DNA进行分子检测第39页
    2.6 特异性引物的设计第39-40页
        2.6.1 引物设计的原则第39-40页
        2.6.2 引物设计软件第40页
    2.7 利用建立的多重PCR体系对小麦苗期根茎部样本进行分子检测第40-41页
3 结果与分析第41-70页
    3.1 小麦根茎部主要病害病原真菌的分离鉴定第41-55页
        3.1.1 分离得到病菌的形态学特征第49-52页
            3.1.1.1 麦根腐平脐蠕孢第49-50页
            3.1.1.2 尖孢镰孢菌第50页
            3.1.1.3 层出镰孢菌第50-51页
            3.1.1.4 黄色镰孢菌第51页
            3.1.1.5 禾谷丝核菌第51-52页
        3.1.2 蠕孢菌和纹枯病菌5.8S rDNA-ITS区序列和镰孢菌EF-1α序列分析第52-55页
    3.2 小麦根腐病病原菌的致病性测定第55-58页
    3.3 小麦根茎部发病植株上病原菌的分子检测第58-64页
        3.3.1 各地区分子检测结果第60-64页
    3.4 多重PCR体系的优化第64-70页
        3.4.1 引物RBF-2/RBR-2的特异性检测第65页
        3.4.2 引物的灵敏度检测第65-66页
        3.4.3 利用建立的多重PCR体系对山东部分地区小麦根茎部样本的检测第66-70页
4 讨论第70-72页
    4.1 关于小麦根茎部主要真菌病害的病原组成第70页
    4.2 关于小麦根茎部发病植株上病原菌的分子检测第70页
    4.3 关于小麦根腐病病原菌的致病性测定第70-71页
    4.4 关于小麦苗期根茎部样本的多重PCR检测第71-72页
5 结论第72-73页
参考文献第73-83页
致谢第83页

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