| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 生物发光 | 第11页 |
| 1.2 发光菌 | 第11-22页 |
| 1.2.1 发光菌的种类及生存环境 | 第11-12页 |
| 1.2.2 发光菌的发光机理 | 第12-15页 |
| 1.2.3 发光的应用 | 第15-20页 |
| 1.2.4 生物发光的测定 | 第20页 |
| 1.2.5 发光菌及 lux 基因应用的优缺点 | 第20-21页 |
| 1.2.6 青海弧菌的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3 试验目的 | 第22-23页 |
| 第二章 青海弧菌发光基因的克隆与生物信息学分析 | 第23-40页 |
| 2.1 试验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 酶与试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 青海弧菌 Q67 的活化培养 | 第25页 |
| 2.2.2 菌种保存 | 第25页 |
| 2.2.3 青海弧菌 Q67 基因组 DNA 提取 | 第25-26页 |
| 2.2.4 16S rDNA PCR 扩增及测序 | 第26-28页 |
| 2.2.5 青海弧菌 Q67 lux 基因的克隆 | 第28-30页 |
| 2.2.6 基因序列拼接及生物信息学分析 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-38页 |
| 2.3.1 基因组 DNA 提取 | 第30-31页 |
| 2.3.2 16S rDNA 的克隆 | 第31-32页 |
| 2.3.3 16S rDNA 序列生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 2.3.4 lux 基因的克隆 | 第33-34页 |
| 2.3.5 luxCDABE 基因的生物信息学分析 | 第34-38页 |
| 2.4 小结 | 第38-40页 |
| 第三章 lux 基因的重组表达 | 第40-56页 |
| 3.1 试验材料 | 第40-42页 |
| 3.1.1 菌株与质粒 | 第40-41页 |
| 3.1.2 酶与试剂 | 第41页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第41-42页 |
| 3.2 试验方法 | 第42-47页 |
| 3.2.1 lux 基因引物设计及 PCR 扩增 | 第42-44页 |
| 3.2.2 限制性内切酶酶切 | 第44-45页 |
| 3.2.3 酶切后的基因纯化 | 第45页 |
| 3.2.4 pHSG396 载体酶切后去磷酸化 | 第45页 |
| 3.2.5 构建重组质粒 | 第45-46页 |
| 3.2.6 重组质粒转化大肠杆菌 TOP10 | 第46页 |
| 3.2.7 重组大肠杆菌筛选 | 第46-47页 |
| 3.2.8 重重组菌发光特特性检验 | 第47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-54页 |
| 3.3.1 luxAB、luxCDABE 基因表达质粒的构建 | 第47-50页 |
| 3.3.2 重组质粒构建及转化 E. coli TOP10 | 第50-51页 |
| 3.3.3 lux 基因原核表达特性的测定 | 第51-54页 |
| 3.4 小结 | 第54-56页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第56-59页 |
| 4.1 结论 | 第56页 |
| 4.2 讨论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 附录1 溶液、试剂、培养基 | 第70-74页 |
| 附录2 碱基序列 | 第74-79页 |
| 附录3 试验使用的菌株和质粒 | 第79-80页 |
| 附录4 缩略词 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 作者简介 | 第82页 |
