| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-20页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 国内外生物冶金的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.3 浸矿微生物 | 第12-14页 |
| 1.3.1 浸矿微生物的种类 | 第12-14页 |
| 1.3.2 浸矿微生物的生长环境 | 第14页 |
| 1.3.3 嗜酸氧化亚铁硫杆菌(A.ferrooxidans) | 第14页 |
| 1.4 微生物的金属离子抗性机制 | 第14-17页 |
| 1.4.1 原核微生物中一般的铜离子抗性机制 | 第14-15页 |
| 1.4.2 微生物细胞的锌离子耐受机制 | 第15-17页 |
| 1.5 浸矿微生物的金属抗性 | 第17-19页 |
| 1.5.1 浸矿微生物对金属的耐受能力研究 | 第17-18页 |
| 1.5.2 浸矿微生物金属抗性机制研究现状 | 第18-19页 |
| 1.6 课题研究意义和内容 | 第19-20页 |
| 1.6.1 课题研究的意义 | 第19页 |
| 1.6.2 课题的研究目的和内容 | 第19-20页 |
| 2 17株A.ferrooxidans菌株对Cu~(2+)、Zn~(2+)抗性能力的测定及分类 | 第20-24页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第20-21页 |
| 2.2.1 菌株和培养条件 | 第20-21页 |
| 2.2.2 A.ferrooxidans菌株铜、锌离子抗性能力的测定及分类 | 第21页 |
| 2.2.3 细菌生长曲线的测定 | 第21页 |
| 2.2.4 Fe~(2+)氧化率的测定 | 第21页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第21-22页 |
| 2.3.1 17 株A.ferrooxidans菌株的铜离子抗性及分类 | 第21-22页 |
| 2.3.2 17 株A.ferrooxidans菌株的锌离子抗性及分类 | 第22页 |
| 2.4 分析与讨论 | 第22-23页 |
| 2.5 本章小结 | 第23-24页 |
| 3 17 株A.ferrooxidans菌株中金属抗性抗性相关基因的测序及生物信息学分析 | 第24-41页 |
| 3.1 引言 | 第24页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第24-27页 |
| 3.2.1 菌株和培养条件 | 第24页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第24-25页 |
| 3.2.3 细菌基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| 3.2.4 DNA浓度及纯度检测 | 第26页 |
| 3.2.5 金属抗性相关基因的鉴定 | 第26页 |
| 3.2.6 PCR产物纯化及测序 | 第26-27页 |
| 3.2.7 金属抗性相关基因的生物信息学分析 | 第27页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第27-39页 |
| 3.3.1 17 株A.ferroxidnas菌株中8个金属抗性相关基因的测序结果 | 第27-28页 |
| 3.3.2 8 个金属抗性相关基因的序列分析 | 第28-37页 |
| 3.3.3 金属抗性相关基因的生物信息学分析 | 第37-39页 |
| 3.4 分析与讨论 | 第39-40页 |
| 3.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 4 金属抗性相关基因在6株A.ferrooxidans菌株中的差异性表达 | 第41-54页 |
| 4.1 引言 | 第41页 |
| 4.2 材料与方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 实验菌株与培养基 | 第41页 |
| 4.2.2 菌株的培养及金属抗性能力的测定 | 第41页 |
| 4.2.3 细胞总RNA的提取及浓度检测 | 第41-42页 |
| 4.2.4 cDNA的合成 | 第42-43页 |
| 4.2.5 引物的设计及检测 | 第43-44页 |
| 4.2.6 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测 | 第44页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第44-51页 |
| 4.3.1 Cu~(2+)、Zn~(2+)对6株A.ferrooxidans代表菌株生长的影响 | 第44-46页 |
| 4.3.2 RNA质量的评估 | 第46页 |
| 4.3.3 引物的质量评估 | 第46页 |
| 4.3.4 目标基因和内参基因的标准曲线及熔解曲线 | 第46-49页 |
| 4.3.5 Cu~(2+)刺激下金属相关基因的差异表达 | 第49-50页 |
| 4.3.6 Zn~(2+)刺激下金属相关基因的差异表达 | 第50-51页 |
| 4.3.7 金属抗性相关基因差异性表达与菌株金属抗性间的相关性 | 第51页 |
| 4.4 分析与讨论 | 第51-52页 |
| 4.5 本章小结 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
