摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
目录 | 第9-12页 |
英文缩写词对照表 | 第12-15页 |
引言 | 第15-17页 |
1 实验材料 | 第17-22页 |
1.1 实验动物 | 第17页 |
1.2 实验试剂与药品 | 第17-19页 |
1.3 实验仪器与耗材 | 第19-20页 |
1.4 常用液体的配置 | 第20-22页 |
2 实验方法 | 第22-34页 |
2.1 新生大鼠 HIBD 模型的建立 | 第22-23页 |
2.2 动物分组与给药 | 第23页 |
2.3 TTC 染色 | 第23-24页 |
2.4 自主活动实验 | 第24页 |
2.5 Morris 水迷宫实验 | 第24-25页 |
2.5.1 定位航行实验 | 第25页 |
2.5.2 空间探索实验 | 第25页 |
2.6 Real-time PCR | 第25-29页 |
2.6.1 组织样本的制备 | 第25-26页 |
2.6.2 RNA 提取前器皿的处理与注意事项 | 第26页 |
2.6.3 总 RNA 的提取 | 第26-27页 |
2.6.4 总 RNA 纯度的检测 | 第27页 |
2.6.5 总 RNA 完整性的鉴定 | 第27页 |
2.6.6 Real-time PCR 的引物设计与合成 | 第27-28页 |
2.6.7 RNA 反转录反应 | 第28-29页 |
2.6.8 实时荧光定量 PCR 反应 | 第29页 |
2.7 Western Blotting | 第29-32页 |
2.7.1 组织样本的制备 | 第29页 |
2.7.2 脑组织中总蛋白的提取 | 第29-30页 |
2.7.3 BCA 法测定蛋白浓度 | 第30页 |
2.7.4 蛋白样品的处理 | 第30页 |
2.7.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE 电泳) | 第30-31页 |
2.7.6 转膜 | 第31页 |
2.7.7 免疫反应 | 第31页 |
2.7.8 ECL 化学发光、显影定影 | 第31-32页 |
2.8 免疫组织化学实验 | 第32-33页 |
2.8.1 组织样本的制备 | 第32页 |
2.8.2 免疫组化染色步骤 | 第32-33页 |
2.8.3 结果判定与分析 | 第33页 |
2.9 统计学分析 | 第33-34页 |
3 实验结果 | 第34-42页 |
3.1 HIBD 模型的建立及缺氧过程中行为学观察 | 第34页 |
3.2 安定对脑缺血缺氧新生大鼠脑梗死体积的影响 | 第34-35页 |
3.3 自主活动测定结果 | 第35-36页 |
3.4 安定对脑缺血缺氧新生大鼠学习记忆能力的影响 | 第36-38页 |
3.4.1 定位航行实验结果 | 第36-37页 |
3.4.2 空间探索实验结果 | 第37-38页 |
3.5 新生大鼠脑缺血缺氧后 KCC2-mRNA 的表达变化 | 第38-40页 |
3.5.1 RNA 纯度和完整性的鉴定结果 | 第38页 |
3.5.2 KCC2-mRNA 的表达变化 | 第38-40页 |
3.6 新生大鼠脑缺血缺氧后 KCC2 蛋白的表达变化 | 第40-41页 |
3.7 免疫组织化学实验结果 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-50页 |
4.1 HIBD 的发病机制 | 第42-45页 |
4.1.1 细胞内钙离子的超载 | 第43页 |
4.1.2 兴奋性氨基酸的释放 | 第43页 |
4.1.3 自由基的生成 | 第43-44页 |
4.1.4 炎性因子的参与 | 第44页 |
4.1.5 神经元细胞的死亡 | 第44-45页 |
4.2 新生大鼠 HIBD 的建立 | 第45-46页 |
4.3 安定对 HIBD 新生大鼠的近期保护作用 | 第46页 |
4.4 安定对 HIBD 新生大鼠的远期保护作用 | 第46-47页 |
4.5 安定脑保护作用和 KCC2 的关系 | 第47-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
综述 钾-氯离子协同转运体-2 (KCC2)的研究进展 | 第56-67页 |
参考文献 | 第64-67页 |
个人简历 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |