转DEHY基因旱稻纯合体鉴定及分析
| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第9-15页 |
| 1.1 LEA蛋白 | 第9-12页 |
| 1.1.1 LEA基因的简介 | 第9页 |
| 1.1.2 LEA蛋白的种类和作用 | 第9-11页 |
| 1.1.3 LEA蛋白的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 旱稻的背景与研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3 课题来源 | 第13页 |
| 1.4 研究内容和目的 | 第13-15页 |
| 1.4.1 研究内容 | 第13页 |
| 1.4.2 研究目的 | 第13-15页 |
| 第2章 纯合候选株系的筛选 | 第15-27页 |
| 2.1 概述 | 第15页 |
| 2.2 主要实验材料、试剂及仪器 | 第15-17页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第15-16页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第16页 |
| 2.2.3 主要溶液配制 | 第16-17页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第17页 |
| 2.3 实验方法 | 第17-21页 |
| 2.3.1 除草剂抗性预实验 | 第17页 |
| 2.3.2 种子消毒和除草剂筛选 | 第17-18页 |
| 2.3.3 提取植物基因组DNA | 第18页 |
| 2.3.4 质粒的提取 | 第18-19页 |
| 2.3.5 PCR引物 | 第19-20页 |
| 2.3.6 PCR鉴定 | 第20-21页 |
| 2.4 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.4.1 除草剂抗性预实验 | 第21页 |
| 2.4.2 大田除草剂筛选 | 第21-22页 |
| 2.4.3 除草剂抗性筛选 | 第22-23页 |
| 2.4.4 转DEHY纯合候选株系的PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.5 讨论 | 第24-25页 |
| 2.6 本章小结 | 第25-27页 |
| 第3章 抗性鉴定和突变体筛选 | 第27-33页 |
| 3.1 概述 | 第27页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第27-28页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第27页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 3.3 实验方法 | 第28页 |
| 3.3.1 除草剂的配制 | 第28页 |
| 3.3.2 PEG的配制 | 第28页 |
| 3.3.3 NaCl的配制 | 第28页 |
| 3.4 结果与分析 | 第28-32页 |
| 3.4.1 实验室除草剂耐受浓度测定 | 第28-29页 |
| 3.4.2 大田除草剂耐受浓度测定 | 第29-30页 |
| 3.4.3 室内抗旱实验 | 第30页 |
| 3.4.4 室内抗盐实验 | 第30-31页 |
| 3.4.5 突变体筛选 | 第31-32页 |
| 3.5 讨论 | 第32页 |
| 3.6 本章小结 | 第32-33页 |
| 第4章 Southern杂交分析 | 第33-45页 |
| 4.1 概述 | 第33页 |
| 4.2 实验材料、试剂及仪器 | 第33-34页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 4.2.2 主要实验试剂 | 第34页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第34页 |
| 4.3 实验方法 | 第34-39页 |
| 4.3.1 主要溶液的制备 | 第34页 |
| 4.3.2 DNA的提取 | 第34-35页 |
| 4.3.3 酶切体系的构建 | 第35-36页 |
| 4.3.4 转膜 | 第36页 |
| 4.3.5 探针的制备 | 第36-37页 |
| 4.3.6 探针标记效率测定 | 第37-38页 |
| 4.3.7 洗膜与显色 | 第38页 |
| 4.3.8 杂交 | 第38页 |
| 4.3.9 严谨洗膜 | 第38-39页 |
| 4.4 结果与分析 | 第39-42页 |
| 4.4.1 样品DNA的浓度检测 | 第39页 |
| 4.4.2 探针标记效率 | 第39-40页 |
| 4.4.3 酶切及转膜结果 | 第40-41页 |
| 4.4.4 转DEHY株系的Southern杂交 | 第41-42页 |
| 4.5 讨论 | 第42-43页 |
| 4.5.1 基因组DNA酶切产物的电泳 | 第42-43页 |
| 4.5.2 酶切体系的优化 | 第43页 |
| 4.5.3 其他影响因素 | 第43页 |
| 4.6 本章小结 | 第43-45页 |
| 第5章 TAIL-PCR探索目的基因侧翼序列 | 第45-49页 |
| 5.1 概述 | 第45页 |
| 5.2 试验材料及试剂 | 第45页 |
| 5.3 试验方法 | 第45-46页 |
| 5.3.1 引物 | 第45页 |
| 5.3.2 反应体系与反应程序 | 第45-46页 |
| 5.4 结果与分析 | 第46-48页 |
| 5.4.1 电泳结果 | 第46页 |
| 5.4.2 序列对比结果 | 第46-48页 |
| 5.5 讨论 | 第48页 |
| 5.5.1 引物 | 第48页 |
| 5.6 本章小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
