摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-20页 |
1.1 胚胎干细胞(ES 细胞)概念 | 第10-12页 |
1.1.1 ES 细胞的发展与应用 | 第10-11页 |
1.1.2 ES 细胞面临的问题 | 第11-12页 |
1.2 诱导多功能性干细胞(iPSC) | 第12-14页 |
1.2.1 诱导多功能性干细胞概念 | 第12页 |
1.2.2 iPSC 的发展历程 | 第12-13页 |
1.2.3 iPSC 的研究与应用 | 第13-14页 |
1.3 基因随机整合制备转基因小鼠的方法 | 第14-16页 |
1.3.1 逆转录病毒感染转法 | 第14页 |
1.3.2 精子载体法 | 第14-15页 |
1.3.3 原核注射 | 第15-16页 |
1.4 基因定位打靶制备嵌合体动物方法 | 第16-19页 |
1.5 立体依据及意义 | 第19-20页 |
2 材料和方法 | 第20-38页 |
2.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.1 实验选用小鼠 | 第20页 |
2.1.2 实验选用细胞 | 第20页 |
2.2 实验所用仪器及设备 | 第20-22页 |
2.2.1 实验仪器 | 第20-21页 |
2.2.2 实验耗材 | 第21-22页 |
2.3 实验试剂 | 第22-26页 |
2.3.1 基础试剂 | 第22-23页 |
2.3.2 实验配制试剂 | 第23-26页 |
2.4 实验方法 | 第26-38页 |
2.4.1 CD1 雄性结扎小鼠的制备 | 第26-27页 |
2.4.2 收集 CD1 小鼠胚胎并培养 | 第27-28页 |
2.4.3 显微注射操作针的制备 | 第28-30页 |
2.4.4 细胞制备与培养 | 第30-33页 |
2.4.5 胚胎进行显微注射 | 第33-35页 |
2.4.6 胚胎移植 | 第35-38页 |
3 结果与讨论 | 第38-50页 |
3.1 细胞方面的结果与讨论 | 第38-40页 |
3.1.1 用 CF1 及 DR4 小鼠成纤维细胞制备滋养层 | 第38-39页 |
3.1.2 iPSC 细胞的培养 | 第39-40页 |
3.2 显微注射针的制备 | 第40-41页 |
3.3 所用实验小鼠的结果与讨论 | 第41-42页 |
3.3.1 结扎雄性小鼠 | 第41页 |
3.3.2 供体及受体 CD1 小鼠 | 第41-42页 |
3.4 早期胚胎的体外培养 | 第42-45页 |
3.4.1 小鼠胚胎在体外的培养 | 第42-44页 |
3.4.2 不同时期获得胚胎发育到囊胚的比较 | 第44-45页 |
3.5 胚胎注射 | 第45-47页 |
3.6 胚胎移植嵌合体小鼠制备 | 第47-50页 |
4 结论 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58-59页 |