中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
缩略词表 | 第11-12页 |
1 绪论 | 第12-26页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 TCP家族的研究进展 | 第12-14页 |
1.2.1 TCP转录因子的发现、命名、分类和进化 | 第12-14页 |
1.2.2 TCP转录因子的进化 | 第14页 |
1.3 TCP蛋白的功能 | 第14-20页 |
1.3.1 TCP domain结构 | 第14-15页 |
1.3.2 TCP domain的生化功能 | 第15页 |
1.3.3 TCP的靶基因 | 第15-17页 |
1.3.4 蛋白-蛋白互作 | 第17页 |
1.3.5 TCP转录因子的调控 | 第17-18页 |
1.3.6 发育过程中TCP基因的作用 | 第18-19页 |
1.3.7 TCP基因的转录和转录后调控 | 第19-20页 |
1.4 TCP调控植物不同方面的发育 | 第20-23页 |
1.4.1 配子体的发育 | 第20页 |
1.4.2 花的发育 | 第20页 |
1.4.3 叶的发育 | 第20-21页 |
1.4.4 激素通路 | 第21-22页 |
1.4.5 线粒体生物发生学 | 第22页 |
1.4.6 种子萌发 | 第22页 |
1.4.7 昼夜节律的调控 | 第22-23页 |
1.5 课题研究的学术和应用意义 | 第23-24页 |
1.6 课题研究的目的、内容和技术路线 | 第24-26页 |
1.6.1 研究目的 | 第24页 |
1.6.2 研究内容 | 第24页 |
1.6.3 实验技术路线 | 第24-25页 |
1.6.4 创新之处 | 第25-26页 |
2 OsPCF7 基因的克隆、生物信息学分析与表达模式 | 第26-48页 |
2.1 材料、试剂及仪器 | 第26-28页 |
2.1.1 材料 | 第26页 |
2.1.2 工具酶及主要生化试剂 | 第26页 |
2.1.3 实验室中常用储存液和基本培养基 | 第26-27页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-36页 |
2.2.1 水稻叶片收集 | 第28页 |
2.2.2 水稻叶片总RNA的提取 | 第28-29页 |
2.2.3 RT-PCR | 第29页 |
2.2.4 引物的合成 | 第29-30页 |
2.2.5 PCR扩增目的基因片段 | 第30-31页 |
2.2.6 PCR产物的回收与纯化 | 第31页 |
2.2.7 构建pMD19-T-OsPCF7 重组质粒、转化以及鉴定 | 第31-34页 |
2.2.8 OsPCF7 基因表达模式分析 | 第34-36页 |
2.3 结果与分析 | 第36-46页 |
2.3.1 目的基因的克隆 | 第36-39页 |
2.3.2 OsPCF7 基因的生物信息学分析 | 第39-45页 |
2.3.3 OsPCF7 基因的表达模式分析 | 第45-46页 |
2.4 讨论 | 第46-48页 |
3 OsPCF7 基因的亚细胞定位研究 | 第48-60页 |
3.1 实验材料与设备 | 第48-49页 |
3.1.1 研究材料 | 第48页 |
3.1.2 实验常用试剂和试剂盒 | 第48页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第48页 |
3.1.4 常用试剂及培养基的配制 | 第48-49页 |
3.2 实验方法 | 第49-52页 |
3.2.1 OsPCF7 亚细胞定位载体的构建 | 第49-50页 |
3.2.2 农杆菌EHA105 感受态细胞的制备及转化 | 第50-52页 |
3.2.3 洋葱表皮侵染 | 第52页 |
3.3 结果与分析 | 第52-58页 |
3.3.1 OsPCF7 亚细胞定位载体的构建 | 第52-54页 |
3.3.2 35S:: OsPCF7-GFP载体的PCR鉴定及酶切鉴定 | 第54-56页 |
3.3.3 35S::OsPCF7-GFP载体转化农杆菌的PCR鉴定 | 第56-57页 |
3.3.4 构建了 35S::OsPCF7-GFP表达载体 | 第57页 |
3.3.5 35S:: OsPCF7-GFP载体转化洋葱表皮细胞的检测 | 第57-58页 |
3.4 讨论 | 第58-60页 |
4 OsPCF7 上调表达对水稻植株形态的影响 | 第60-78页 |
4.1 材料与主要仪器 | 第60-63页 |
4.1.1 菌种和转化材料 | 第60页 |
4.1.2 主要生化试剂及仪器 | 第60-61页 |
4.1.3 培养基的配置 | 第61-63页 |
4.2 实验方法 | 第63-69页 |
4.2.1 载体构建 | 第63-65页 |
4.2.2 35S::OsPCF7 转化农杆菌 | 第65页 |
4.2.3 重组农杆菌的鉴定 | 第65-66页 |
4.2.4 带有 35S::OsPCF7 质粒的农杆菌浸染水稻愈伤 | 第66-67页 |
4.2.5 愈伤组织的水洗、筛选、分化及生根 | 第67-68页 |
4.2.6 转基因苗的阳性检测 | 第68页 |
4.2.7 阳性苗进行炼苗及移栽 | 第68-69页 |
4.3 实验结果与分析 | 第69-76页 |
4.3.1 35S::OsPCF7 超表达载体的构建 | 第69-72页 |
4.3.2 对 35S::OsPCF7 转基因苗PCR的鉴定以及转基因苗的表型分析 | 第72-76页 |
4.4 讨论 | 第76-78页 |
5 OsPCF7 基因的下游基因的分析 | 第78-82页 |
5.1 实验用品 | 第78页 |
5.1.1 植物材料 | 第78页 |
5.1.2 主要试剂 | 第78页 |
5.1.3 主要仪器 | 第78页 |
5.2 实验方法与步骤 | 第78-79页 |
5.2.1 35S::OsPCF7 转基因植株种子和WT的萌发 | 第78页 |
5.2.2 定量引物的设计 | 第78-79页 |
5.2.3 水稻叶片总RNA的提取 | 第79页 |
5.2.4 RT-PCR | 第79页 |
5.3 实验结果与分析 | 第79-80页 |
5.4 讨论 | 第80-82页 |
6 OsPCF7 干扰载体的构建及对水稻的遗传转化 | 第82-88页 |
6.1 实验材料及试剂 | 第82页 |
6.1.1 实验材料 | 第82页 |
6.1.2 载体 | 第82页 |
6.1.3 工具酶及主要生化试剂 | 第82页 |
6.1.4 培养基及储存液配方 | 第82页 |
6.2 实验步骤 | 第82-85页 |
6.2.1 植物干扰载体的构建 | 第82-85页 |
6.3 结果与分析 | 第85-87页 |
6.4 讨论 | 第87-88页 |
7 主要结论、后续研究与展望 | 第88-90页 |
7.1 结论 | 第88-89页 |
7.2 后续研究工作展望 | 第89-90页 |
致谢 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-100页 |
附录 | 第100页 |
A. 作者攻读硕士期间发表的论文目录 | 第100页 |
B. 作者攻读硕士学位期间参与的科研项目 | 第100页 |