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水稻转录因子PCF7的功能研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
缩略词表第11-12页
1 绪论第12-26页
    1.1 引言第12页
    1.2 TCP家族的研究进展第12-14页
        1.2.1 TCP转录因子的发现、命名、分类和进化第12-14页
        1.2.2 TCP转录因子的进化第14页
    1.3 TCP蛋白的功能第14-20页
        1.3.1 TCP domain结构第14-15页
        1.3.2 TCP domain的生化功能第15页
        1.3.3 TCP的靶基因第15-17页
        1.3.4 蛋白-蛋白互作第17页
        1.3.5 TCP转录因子的调控第17-18页
        1.3.6 发育过程中TCP基因的作用第18-19页
        1.3.7 TCP基因的转录和转录后调控第19-20页
    1.4 TCP调控植物不同方面的发育第20-23页
        1.4.1 配子体的发育第20页
        1.4.2 花的发育第20页
        1.4.3 叶的发育第20-21页
        1.4.4 激素通路第21-22页
        1.4.5 线粒体生物发生学第22页
        1.4.6 种子萌发第22页
        1.4.7 昼夜节律的调控第22-23页
    1.5 课题研究的学术和应用意义第23-24页
    1.6 课题研究的目的、内容和技术路线第24-26页
        1.6.1 研究目的第24页
        1.6.2 研究内容第24页
        1.6.3 实验技术路线第24-25页
        1.6.4 创新之处第25-26页
2 OsPCF7 基因的克隆、生物信息学分析与表达模式第26-48页
    2.1 材料、试剂及仪器第26-28页
        2.1.1 材料第26页
        2.1.2 工具酶及主要生化试剂第26页
        2.1.3 实验室中常用储存液和基本培养基第26-27页
        2.1.4 主要仪器设备第27-28页
    2.2 实验方法第28-36页
        2.2.1 水稻叶片收集第28页
        2.2.2 水稻叶片总RNA的提取第28-29页
        2.2.3 RT-PCR第29页
        2.2.4 引物的合成第29-30页
        2.2.5 PCR扩增目的基因片段第30-31页
        2.2.6 PCR产物的回收与纯化第31页
        2.2.7 构建pMD19-T-OsPCF7 重组质粒、转化以及鉴定第31-34页
        2.2.8 OsPCF7 基因表达模式分析第34-36页
    2.3 结果与分析第36-46页
        2.3.1 目的基因的克隆第36-39页
        2.3.2 OsPCF7 基因的生物信息学分析第39-45页
        2.3.3 OsPCF7 基因的表达模式分析第45-46页
    2.4 讨论第46-48页
3 OsPCF7 基因的亚细胞定位研究第48-60页
    3.1 实验材料与设备第48-49页
        3.1.1 研究材料第48页
        3.1.2 实验常用试剂和试剂盒第48页
        3.1.3 主要仪器设备第48页
        3.1.4 常用试剂及培养基的配制第48-49页
    3.2 实验方法第49-52页
        3.2.1 OsPCF7 亚细胞定位载体的构建第49-50页
        3.2.2 农杆菌EHA105 感受态细胞的制备及转化第50-52页
        3.2.3 洋葱表皮侵染第52页
    3.3 结果与分析第52-58页
        3.3.1 OsPCF7 亚细胞定位载体的构建第52-54页
        3.3.2 35S:: OsPCF7-GFP载体的PCR鉴定及酶切鉴定第54-56页
        3.3.3 35S::OsPCF7-GFP载体转化农杆菌的PCR鉴定第56-57页
        3.3.4 构建了 35S::OsPCF7-GFP表达载体第57页
        3.3.5 35S:: OsPCF7-GFP载体转化洋葱表皮细胞的检测第57-58页
    3.4 讨论第58-60页
4 OsPCF7 上调表达对水稻植株形态的影响第60-78页
    4.1 材料与主要仪器第60-63页
        4.1.1 菌种和转化材料第60页
        4.1.2 主要生化试剂及仪器第60-61页
        4.1.3 培养基的配置第61-63页
    4.2 实验方法第63-69页
        4.2.1 载体构建第63-65页
        4.2.2 35S::OsPCF7 转化农杆菌第65页
        4.2.3 重组农杆菌的鉴定第65-66页
        4.2.4 带有 35S::OsPCF7 质粒的农杆菌浸染水稻愈伤第66-67页
        4.2.5 愈伤组织的水洗、筛选、分化及生根第67-68页
        4.2.6 转基因苗的阳性检测第68页
        4.2.7 阳性苗进行炼苗及移栽第68-69页
    4.3 实验结果与分析第69-76页
        4.3.1 35S::OsPCF7 超表达载体的构建第69-72页
        4.3.2 对 35S::OsPCF7 转基因苗PCR的鉴定以及转基因苗的表型分析第72-76页
    4.4 讨论第76-78页
5 OsPCF7 基因的下游基因的分析第78-82页
    5.1 实验用品第78页
        5.1.1 植物材料第78页
        5.1.2 主要试剂第78页
        5.1.3 主要仪器第78页
    5.2 实验方法与步骤第78-79页
        5.2.1 35S::OsPCF7 转基因植株种子和WT的萌发第78页
        5.2.2 定量引物的设计第78-79页
        5.2.3 水稻叶片总RNA的提取第79页
        5.2.4 RT-PCR第79页
    5.3 实验结果与分析第79-80页
    5.4 讨论第80-82页
6 OsPCF7 干扰载体的构建及对水稻的遗传转化第82-88页
    6.1 实验材料及试剂第82页
        6.1.1 实验材料第82页
        6.1.2 载体第82页
        6.1.3 工具酶及主要生化试剂第82页
        6.1.4 培养基及储存液配方第82页
    6.2 实验步骤第82-85页
        6.2.1 植物干扰载体的构建第82-85页
    6.3 结果与分析第85-87页
    6.4 讨论第87-88页
7 主要结论、后续研究与展望第88-90页
    7.1 结论第88-89页
    7.2 后续研究工作展望第89-90页
致谢第90-92页
参考文献第92-100页
附录第100页
    A. 作者攻读硕士期间发表的论文目录第100页
    B. 作者攻读硕士学位期间参与的科研项目第100页

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