摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
英文缩略语 | 第13-17页 |
1 前言 | 第17-19页 |
2 材料与方法 | 第19-34页 |
2.1 材料 | 第19-23页 |
2.1.1 细胞系 | 第19页 |
2.1.2 非小细胞肺癌组织标本 | 第19-20页 |
2.1.3 表达载体 | 第20-21页 |
2.1.4 试剂 | 第21-22页 |
2.1.5 仪器 | 第22-23页 |
2.1.6 LncRNAXIST基因信息、引物、siRNA等。 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-34页 |
2.2.1 细胞培养 | 第23页 |
2.2.2 总RNA抽提 | 第23-24页 |
2.2.3 RNA逆转录获cDNA | 第24-25页 |
2.2.4 荧光定量PCR | 第25页 |
2.2.5 XISTsiRNA转染肺癌细胞 | 第25-26页 |
2.2.6 MTT实验 | 第26页 |
2.2.7 流式细胞仪检测细胞周期 | 第26页 |
2.2.8 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第26-27页 |
2.2.9 细胞迁移实验 | 第27页 |
2.2.10 Transwell实验 | 第27页 |
2.2.11 Westernblot检测细胞中PCNA、CCND1、Bcl2、MMP9的含量 | 第27-30页 |
2.2.12 裸鼠成瘤实验 | 第30页 |
2.2.13 LncRNAXIST和miRNA的生物信息学分析 | 第30页 |
2.2.14 转染siXIST后非小细胞肺癌细胞中miR-186的表达水平检测 | 第30-32页 |
2.2.15 miR-186mimic及inhibitor转染肺癌细胞 | 第32页 |
2.2.16 荧光素酶报告基因实验 | 第32页 |
2.2.17 RIP实验 | 第32-33页 |
2.2.18 营救实验 | 第33-34页 |
2.2.19 数据处理 | 第34页 |
3 结果 | 第34-52页 |
3.1 XIST在基因芯片GSE32867的表达情况 | 第34页 |
3.2 XIST在非小细胞肺癌细胞系的表达情况 | 第34-35页 |
3.3 XIST在非小细胞肺癌组织中的表达情况 | 第35-36页 |
3.4 流行病学资料 | 第36-37页 |
3.5 XISTsiRNA转染非小细胞肺癌后LncRNAXIST表达情况 | 第37页 |
3.6 敲减XIST抑制非小细胞肺癌细胞活性 | 第37-38页 |
3.7 敲减XIST影响非小细胞肺癌细胞周期情况 | 第38-39页 |
3.8 敲减XIST对非小细胞肺癌细胞系凋亡的影响 | 第39-40页 |
3.9 敲减XIST对非小细胞肺癌细胞迁移能力的影响 | 第40-41页 |
3.10 敲减XIST对非小细胞肺癌细胞侵袭能力的影响 | 第41页 |
3.11 敲减XIST后非小细胞肺癌细胞增殖侵袭相关蛋白的表达情况 | 第41-42页 |
3.12 裸鼠成瘤实验验证敲减XIST后对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响 | 第42-43页 |
3.13 生物信息学分析结果 | 第43-44页 |
3.14 转染siXIST后非小细胞肺癌细胞中miR-186的表达水平检测 | 第44页 |
3.15 miR-186mimic及inhibitor转染非小细胞肺癌细胞 | 第44-45页 |
3.16 miR-186-5p直接结合XIST | 第45-46页 |
3.17 miR-186-5p以Ago2依赖方式调控XIST | 第46页 |
3.18 miR-186抑制XIST的功能 | 第46-52页 |
3.18.1 miR-186抑制XIST促进细胞增殖的作用 | 第46-47页 |
3.18.2 miR-186抑制XIST对细胞周期的影响 | 第47-48页 |
3.18.3 miR-186抑制XIST对细胞凋亡的影响 | 第48-50页 |
3.18.4 miR-186抑制XIST增强非小细胞肺癌侵袭能力的作用 | 第50-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
本研究创新性的自我评价 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
综述 | 第65-84页 |
参考文献 | 第76-84页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
个人简介 | 第86页 |