摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-18页 |
1.1 番茄的介绍 | 第13页 |
1.2 番茄的研究意义 | 第13页 |
1.3 YABBY 家族基因研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 YABBY 家族基因概述 | 第13页 |
1.3.2 单子叶植物中 YABBY 家族基因的研究进展 | 第13-14页 |
1.3.3 双子叶植物中 YABBY 家族基因的研究 | 第14-15页 |
1.4 RNAi 的研究进展 | 第15-16页 |
1.5 研究目的与创新 | 第16页 |
1.6 研究内容 | 第16-17页 |
1.7 技术路线 | 第17-18页 |
2 番茄 YABBY 转录因子 SlYABBY5 基因的克隆与表达分析 | 第18-30页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第18-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第18页 |
2.1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.4 主要仪器设备 | 第19页 |
2.2 实验方法 | 第19-23页 |
2.2.1 提取 RNA 和 cDNA 第一链合成 | 第19-21页 |
2.2.2 SlYABBY5 基因的生物信息学分析 | 第21页 |
2.2.3 番茄中 SlYABBY5 基因引物的合成及 cDNA 的克隆 | 第21-22页 |
2.2.4 SlYABBY5 基因的 qRT-PCR 表达模式分析 | 第22页 |
2.2.5 胁迫处理的 SlYABBY5 表达模式分析 | 第22页 |
2.2.6 激素诱导的 SlYABBY5 表达模式分析 | 第22-23页 |
2.3 结果与分析 | 第23-28页 |
2.3.1 SlYABBY5 基因生物信息学分析 | 第23-25页 |
2.3.2 SlYABBY5 基因的克隆 | 第25-26页 |
2.3.3 SlYABBY5 基因的表达模式分析 | 第26-27页 |
2.3.4 激素诱导的 SlYABBY5 表达模式分析 | 第27-28页 |
2.3.5 逆境胁迫 SlYABBY5 的表达模式分析 | 第28页 |
2.4 讨论 | 第28-30页 |
3 番茄 YABBY 转录因子 SlYABBY1b 基因表达分析和功能研究 | 第30-51页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第30-34页 |
3.1.1 植物材料 | 第30页 |
3.1.2 菌株和质粒 | 第30页 |
3.1.3 试剂 | 第30页 |
3.1.4 主要仪器及设备 | 第30页 |
3.1.5 基本培养基的配制及其主要试剂配制 | 第30-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-41页 |
3.2.1 常用的分子生物学技术,植物组培养 | 第34-37页 |
3.2.2 总 RNA 提取和 cDNA 的合成 | 第37页 |
3.2.3 SlYABBY1b 基因的生物信息学分析 | 第37页 |
3.2.4 番茄中 SlYABBY1b 基因片段的克隆以及引物设计 | 第37-38页 |
3.2.5 SlYABBY1b 基因组织特异性表达模式分析 | 第38页 |
3.2.6 激素诱导的 SlYABBY1b 表达分析 | 第38页 |
3.2.7 逆境胁迫诱导的 SlYABBY1b 表达分析 | 第38页 |
3.2.8 SlYABBY1b 基因的沉默载体的构建以及遗传转化 | 第38-40页 |
3.2.9 番茄转基因分子鉴定及 SlYABBY1b 基因的功能研究 | 第40-41页 |
3.3 结果与分析 | 第41-49页 |
3.3.1 SlYABBY1b 基因生物信息学分析 | 第41页 |
3.3.2 SlYABBY1b 基因表达模式分析 | 第41-42页 |
3.3.3 SlYABBY1b 在激素诱导下的表达分析 | 第42-43页 |
3.3.4 非生物胁迫下 SlYABBY1b 基因表达分析 | 第43-44页 |
3.3.5 SlYABBY1b 沉默载体构建以及所连入目的基因片段的克隆 | 第44-45页 |
3.3.6 转基因分子鉴定以及转基因番茄株系的获得 | 第45-47页 |
3.3.7 RNAi 介导的 SlYABBY1b 基因沉默的功能研究 | 第47-49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
4 番茄 YABBY 家族 SlYABBY2a 基因克隆以及功能研究 | 第51-65页 |
4.1 实验材料与试剂 | 第51页 |
4.1.1 植物材料 | 第51页 |
4.1.2 菌株和质粒 | 第51页 |
4.1.3 试剂 | 第51页 |
4.1.4 主要仪器与设备 | 第51页 |
4.1.5 基本培养基以及主要试剂的配制 | 第51页 |
4.2 实验方法 | 第51-53页 |
4.2.1 常用分子生物学技术以及植物组培技术 | 第51页 |
4.2.2 总 RNA 提取和 cDNA 的合成 | 第51-52页 |
4.2.3 SlYABBY2a 基因的生物信息学分析 | 第52页 |
4.2.4 番茄中 SlYABBY2a 基因片段的克隆以及引物设计 | 第52页 |
4.2.5 SlYABBY2a 基因组织特异性表达模式分析 | 第52页 |
4.2.6 激素诱导的 SlYABBY2a 表达分析 | 第52页 |
4.2.7 逆境胁迫诱导的 SlYABBY2a 表达分析 | 第52页 |
4.2.8 SlYABBY2a 基因的沉默载体的构建以及遗传转化 | 第52-53页 |
4.2.9 番茄转基因分子鉴定 | 第53页 |
4.3 结果与分析 | 第53-63页 |
4.3.1 SlYABBY2a 基因生物信息学分析 | 第53-54页 |
4.3.2 SlYABBBY2a 基因组织表表达分析 | 第54-55页 |
4.3.3 外源激素处理的番茄 SlYABBY2a 基因表达分析 | 第55-56页 |
4.3.4 SlYABBY2a 基因在非生物胁迫下的表达分析 | 第56-57页 |
4.3.5 SlYABBY2a 目的基因片段的克隆以及沉默载体构建 | 第57-58页 |
4.3.6 SlYABBY2a 基因的克隆及其超表达载体构建 | 第58-59页 |
4.3.7 番茄转基因株系分子鉴定以及超表达和沉默转基因株系的获得 | 第59-61页 |
4.3.8 SlYABBY2a 超表达转基因株系低温表型观察 | 第61-63页 |
4.4 讨论 | 第63-65页 |
5 总论 | 第65-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
附录 | 第74页 |
A 硕士期间所获得的主要科研成果 | 第74页 |
B 硕士期间所获得荣誉 | 第74页 |