| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 B细胞及功能 | 第11-12页 |
| 1.2 B细胞相关疾病及治疗 | 第12-14页 |
| 1.2.1 B细胞与自身免疫疾病 | 第12页 |
| 1.2.2 B细胞相关自身免疫疾病 | 第12-13页 |
| 1.2.3 B细胞相关自身免疫疾病 | 第13-14页 |
| 1.3 纳米递送载体及免疫细胞相关疾病的治疗 | 第14-17页 |
| 1.3.1 纳米递送载体 | 第14-15页 |
| 1.3.2 纳米递送载体用于免疫治疗 | 第15页 |
| 1.3.3 纳米载体表面特性与免疫细胞颗粒摄取 | 第15-17页 |
| 1.4 本课题的选题目的及主要研究内容 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-25页 |
| 第二章 优化的阳离子脂质辅助纳米载体用于递送干预B细胞功能的核酸药物 | 第25-49页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.2.1 聚合物材料及脂质 | 第26页 |
| 2.2.2 主要试剂和设备 | 第26-27页 |
| 2.2.3 实验小鼠 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.3.1 纳米载体库的构建 | 第27-29页 |
| 2.3.2 纳米载体性质的表征 | 第29-30页 |
| 2.3.3 纳米载体在B细胞中分布 | 第30页 |
| 2.3.4 骨髓淋巴细胞的分离 | 第30-31页 |
| 2.3.5 淋巴结淋巴细胞的分离 | 第31页 |
| 2.3.6 脾脏淋巴细胞的分离 | 第31页 |
| 2.3.7 流式细胞术检测B细胞中Cy5荧光信号 | 第31-32页 |
| 2.3.8 包载pX458质粒(pCas9-GFP)的双乳化纳米颗粒的制备 | 第32页 |
| 2.3.9 骨髓、淋巴结和淋巴结B细胞GFP的表达 | 第32-33页 |
| 2.3.10 流式细胞术检测骨髓、淋巴结和淋巴结B细胞BAFF-R的表达 | 第33页 |
| 2.3.11 靶向BAFF-R的siRNA有效序列的筛选 | 第33-34页 |
| 2.3.12 流式细胞术检测注射NPsiBAFF-R后B细胞BAFF-R的表达及B细胞数量变化 | 第34页 |
| 2.4 结果和讨论 | 第34-46页 |
| 2.4.1 表面特性不同的阳离子脂质辅助纳米载体的构建 | 第34-37页 |
| 2.4.2 初筛选不同特性的纳米颗粒在B细胞中的分布 | 第37-40页 |
| 2.4.3 初筛选出纳米颗粒在不同脏器B细胞亚群中的分布 | 第40-43页 |
| 2.4.4 遴选的纳米颗粒荷载CRISPR/Cas9基因编辑系统 | 第43页 |
| 2.4.5 遴选的纳米颗粒荷载递送CRISPR/Cas9基因编辑系统进入B细胞 | 第43-45页 |
| 2.4.6 遴选的纳米颗粒递送siBAFF-R干预B细胞BAFF-R的表达 | 第45-46页 |
| 2.5 本章小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 第三章 阳离子脂质辅助的四价铂键合前药用于顺铂耐药肺癌的治疗 | 第49-67页 |
| 3.1 引言 | 第49-50页 |
| 3.2 实验材料 | 第50-51页 |
| 3.2.1 聚合物材料 | 第50页 |
| 3.2.2 细胞株和实验动物 | 第50页 |
| 3.2.3 主要药品和试剂 | 第50-51页 |
| 3.3 实验方法 | 第51-55页 |
| 3.3.1 阳离子键合药纳米颗粒的构建 | 第51-52页 |
| 3.3.1.1 PLA-Pt/PEG-PLA比例的确定 | 第51页 |
| 3.3.1.2 不同表面电势纳米颗粒的构建 | 第51-52页 |
| 3.3.2 不同表面电势纳米颗粒在血清中的稳定性检测 | 第52页 |
| 3.3.3 不同表面电势纳米颗粒的Pt的释放 | 第52页 |
| 3.3.4 蛋白免疫印迹法检测肿瘤细胞膜上铜转运蛋白CTR1蛋白的表达 | 第52-53页 |
| 3.3.5 ICP-MS定量检测A549R细胞对不同表面电势纳米颗粒的摄取情况 | 第53页 |
| 3.3.6 胞内DNA-Pt耦合物的检测 | 第53页 |
| 3.3.7 激光共聚焦检测DNA损伤情况 | 第53-54页 |
| 3.3.8 MTT法检测细胞增殖情况 | 第54页 |
| 3.3.9 流式细胞仪细胞凋亡情况 | 第54-55页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第55-62页 |
| 3.4.1 阳离子键合药纳米颗粒的构建和表征 | 第55页 |
| 3.4.2 确定颗粒制备过程中PLA-Pt与PEG-PLA比例 | 第55页 |
| 3.4.3 阳离子键合药纳米颗粒的制备和表征 | 第55-57页 |
| 3.4.4 A549R细胞对顺铂的耐受性 | 第57-58页 |
| 3.4.5 A549R细胞对阳离子键合药纳米颗粒摄取 | 第58-61页 |
| 3.4.6 A549R细胞对阳离子键合药纳米颗粒摄取 | 第61-62页 |
| 3.5 本章小结 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 附录一 仪器 | 第67-68页 |
| 附录二 主要溶液配制 | 第68-70页 |
| 附录三 常规实验方法 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第75页 |
