摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
文献综述 | 第12-22页 |
第一章 布鲁氏菌的研究进展 | 第12-22页 |
1.1 布鲁氏菌LPS的结构和感染机制 | 第12-13页 |
1.2 布鲁氏菌LPS引起的炎症和内质网应激关系 | 第13-18页 |
1.2.1 内质网应激 | 第13-14页 |
1.2.2 内质网应激和炎症的相互关系 | 第14-18页 |
1.3 细胞凋亡与内质网应激 | 第18页 |
1.4 细胞自噬的研究进展 | 第18-20页 |
1.5 NLRP3炎症小体的研究进展 | 第20-21页 |
1.6 本试验研究目的及主要内容 | 第21-22页 |
试验研究 | 第22-50页 |
第二章 布鲁氏菌LPS的提取纯化和鉴定 | 第22-29页 |
2.1 试验材料及仪器设备 | 第22-23页 |
2.1.1 菌株和细胞系 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
2.1.3 主要仪器 | 第23页 |
2.2 方法 | 第23-25页 |
2.2.1 布鲁氏菌的培养 | 第23页 |
2.2.2 布鲁氏菌LPS粗品制备 | 第23-24页 |
2.2.3 布鲁氏菌LPS的纯化 | 第24页 |
2.2.4 布鲁氏菌LPS银染鉴定 | 第24页 |
2.2.5 硫酸-苯酚法测布鲁氏菌LPS浓度 | 第24页 |
2.2.6 山羊子宫内膜上皮细胞的培养 | 第24-25页 |
2.2.7 CCK8法测布鲁菌LPS对山羊EEC最适作用浓度 | 第25页 |
2.3 结果 | 第25-27页 |
2.3.1 布鲁氏菌LPS银染鉴定结果 | 第25-26页 |
2.3.2 布鲁氏菌LPS浓度测定结果 | 第26-27页 |
2.3.3 CCK8毒性试验结果 | 第27页 |
2.4 讨论 | 第27-28页 |
2.5 小结 | 第28-29页 |
第三章 布鲁氏菌LPS对山羊子宫内膜上皮细胞的影响 | 第29-43页 |
3.1 试验材料 | 第29-30页 |
3.1.1 细胞系 | 第29页 |
3.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
3.1.3 主要仪器 | 第30页 |
3.2 试验方法 | 第30-37页 |
3.2.1 山羊子宫内膜上皮细胞的培养 | 第30页 |
3.2.2 山羊子宫内膜上皮细胞的处理 | 第30-31页 |
3.2.3 布鲁氏菌LPS对EEC内质网应激标志蛋白表达量影响 | 第31-32页 |
3.2.4 布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC内质网应激UPR反应相关分子mRNA表达影响 | 第32-33页 |
3.2.5 布鲁氏菌LPS对山羊EEC的UPR通路中IRE1、ATF6活性的检测 | 第33页 |
3.2.6 布鲁氏菌LPS对山羊EEC凋亡变化 | 第33-34页 |
3.2.7 布鲁氏菌LPS对山羊EECCyt-cmRNA表达影响 | 第34页 |
3.2.8 布鲁氏菌LPS对山羊EEC自噬的影响 | 第34-35页 |
3.2.9 布鲁氏菌LPS对山羊EEC炎性细胞因子IL-1β、IL-8和NLRP3炎症小体相关因子mRNA水平的变化 | 第35页 |
3.2.10 布鲁氏菌LPS对EEC炎性细胞因子IL-1β的分泌 | 第35-36页 |
3.2.11 布鲁氏菌LPS对EEC炎性细胞因子IL-8的分泌 | 第36-37页 |
3.3 结果 | 第37-40页 |
3.3.1 布鲁氏菌LPS对山羊EEC内质网应激标志蛋白表达量变化 | 第37页 |
3.3.2 布鲁氏菌LPS对山羊EEC内质网应激UPR信号通路的激活作用 | 第37-38页 |
3.3.3 布鲁氏菌LPS对山羊EEC的IRE1、ATF6信号通路蛋白表达影响 | 第38页 |
3.3.4 布鲁氏菌LPS对山羊EEC凋亡的影响 | 第38-39页 |
3.3.5 布鲁氏菌LPS对山羊EEC自噬的影响 | 第39页 |
3.3.6 布鲁氏菌LPS对山羊EECNLRP3炎症小体相关因子的影响 | 第39-40页 |
3.3.7 布鲁氏菌LPS对山羊EEC炎性细胞因子IL-1β和IL-8分泌的影响 | 第40页 |
3.4 讨论 | 第40-42页 |
3.5 小结 | 第42-43页 |
第四章 内质网应激状态对布鲁氏菌LPS刺激山羊EEC的影响 | 第43-50页 |
4.1 试验材料及仪器设备 | 第43-44页 |
4.1.1 细胞系 | 第43页 |
4.1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
4.1.3 主要仪器 | 第44页 |
4.2 试验方法 | 第44-45页 |
4.2.1 山羊子宫内膜上皮细胞的培养 | 第44页 |
4.2.2 山羊子宫内膜细胞的处理 | 第44-45页 |
4.2.3 Western Blot检测内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP和相关通路蛋白的表达 | 第45页 |
4.2.4 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC后凋亡的影响 | 第45页 |
4.2.5 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC凋亡标志因子Cyt-c mRNA的表达 | 第45页 |
4.2.6 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC自噬的影响 | 第45页 |
4.2.7 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC炎性细胞因子IL-1β、IL-8和NLRP3炎症小体相关因子mRNA的变化 | 第45页 |
4.2.8 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染EEC炎性因子IL-1β的分泌 | 第45页 |
4.2.9 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染EEC炎性因子IL-8 的分泌 | 第45页 |
4.3 结果 | 第45-48页 |
4.3.1 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC内质网应激蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
4.3.2 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC凋亡的影响 | 第46-47页 |
4.3.3 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC自噬的影响 | 第47页 |
4.3.4 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EECNLRP3炎症小体的影响 | 第47-48页 |
4.3.5 4-PBA对布鲁氏菌LPS侵染山羊EEC的IL-1β、IL-8分泌的影响 | 第48页 |
4.4 讨论 | 第48-49页 |
4.5 小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
附录 | 第57-58页 |
缩略词 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |