| 英文缩略词 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 鸡性成熟启动研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.1 跨突触调节 | 第13页 |
| 1.1.2 神经胶质调节 | 第13页 |
| 1.2 GnRH与GnRHR基因的生物学特征 | 第13-16页 |
| 1.2.1 GnRH基因生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.2.2 GnRHR基因的结构特点 | 第14-15页 |
| 1.2.3 GnRHR基因的组织表达及在性成熟启动中的功能 | 第15-16页 |
| 1.3 DNA甲基化 | 第16-20页 |
| 1.3.1 DNA甲基化的机制 | 第16-17页 |
| 1.3.2 DNA去甲基化的机制 | 第17-18页 |
| 1.3.3 DNA甲基化与基因表达的关系 | 第18页 |
| 1.3.4 CpG-SNPs | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验动物及样品采样 | 第20页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.3 主要试剂及来源 | 第21页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第21-22页 |
| 2.1.5 主要分子生物学数据库及软件 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-37页 |
| 2.2.1 鸡基因组DNA提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 DNA产物回收 | 第23页 |
| 2.2.3 鸡下丘脑和卵巢组织RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.4 RNA浓度和质量检测 | 第24页 |
| 2.2.5 基因组DNA重亚硫酸氢盐修饰 | 第24-25页 |
| 2.2.6 GnRHR-Ⅱ基因-647~-38与+1206~+1778片段的获取 | 第25-26页 |
| 2.2.7 -647~-38片段与PMD18-T载体的连接与转化 | 第26-27页 |
| 2.2.8 挑菌与测序 | 第27页 |
| 2.2.9 GnRHR-Ⅱ基因启动子删除载体构建 | 第27-33页 |
| 2.2.10 鸡卵泡颗粒细胞的分离培养 | 第33-35页 |
| 2.2.11 细胞瞬时转染 | 第35页 |
| 2.2.12 双荧光素酶活性检测 | 第35-36页 |
| 2.2.13 GnRHR-Ⅱ基因启动子区SNPs筛选 | 第36页 |
| 2.2.14 SNPs群体遗传学分析及其与鸡产蛋性状关联分析 | 第36-37页 |
| 2.3 统计与分析 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-61页 |
| 3.1 GnRHR-Ⅱ基因在鸡性发育过程中甲基化特征分析 | 第38-53页 |
| 3.1.1 鸡下丘脑与卵巢基因组的提取 | 第38页 |
| 3.1.2 GnRHR-Ⅱ基因CpG岛分布预测 | 第38-39页 |
| 3.1.3 鸡下丘脑组织中GnRHR-Ⅱ基因甲基化变化规律 | 第39-43页 |
| 3.1.4 鸡卵巢组织中GnRHR-Ⅱ基因甲基化变化规律 | 第43-48页 |
| 3.1.5 下丘脑与卵巢组织中GnRHR-Ⅱ甲基化水平变化的差异比较 | 第48-52页 |
| 3.1.6 GnRHR-Ⅱ基因启动子区甲基化显著变化位点转录因子预测 | 第52-53页 |
| 3.2 GnRHR-Ⅱ5′启动子区荧光活性分析 | 第53-55页 |
| 3.2.1 GnRHR-Ⅱ基因启动子区片段扩增 | 第53-54页 |
| 3.2.2 PGL-GnRHR-3282载体序列比对分析 | 第54页 |
| 3.2.3 GnRHR-Ⅱ启动子区删除载体构建 | 第54-55页 |
| 3.2.4 双荧光素酶分析GnRHR-Ⅱ启动子区不同片段活性 | 第55页 |
| 3.3 GnRHR-Ⅱ基因启动子区SNPs的筛选与分析 | 第55-61页 |
| 3.3.1 混池测序检测GnRHR-Ⅱ启动子区SNPs | 第55-57页 |
| 3.3.2 GnRHR-Ⅱ基因启动子区在不同鸡种中的等位基因和基因型频率 | 第57-58页 |
| 3.3.4 GnRHR-Ⅱ启动子区突变位点与产蛋性能的关联分析 | 第58-61页 |
| 4 讨论 | 第61-64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 6 参考文献 | 第65-72页 |
| 7 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第73页 |
