| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| 1.1 根瘤菌研究历史 | 第10-11页 |
| 1.2 根瘤菌-豆科植物共生固氮 | 第11-13页 |
| 1.2.1 根瘤菌侵染 | 第11-12页 |
| 1.2.2 固氮作用形成 | 第12-13页 |
| 1.3 影响根瘤菌-豆科植物共生体系的环境因子 | 第13-17页 |
| 1.3.1 水分 | 第13-14页 |
| 1.3.2 温度 | 第14页 |
| 1.3.3 pH值 | 第14-15页 |
| 1.3.4 土壤肥力 | 第15页 |
| 1.3.5 重金属 | 第15-16页 |
| 1.3.6 其它环境因子 | 第16-17页 |
| 1.4 植物和微生物镉耐受机理简述 | 第17-19页 |
| 1.4.1 植物耐镉机制 | 第17-19页 |
| 1.4.2 微生物耐镉机制 | 第19页 |
| 1.5 根瘤菌共生体系修复重金属污染的有关研究 | 第19-20页 |
| 1.5.1 镉胁迫对豆科植物共生固氮体系的影响 | 第19-20页 |
| 1.5.2 根瘤菌及共生体系与土壤重金属修复 | 第20页 |
| 1.6 利用冰核蛋白作为运载蛋白的细胞表面展示技术 | 第20-25页 |
| 1.6.1 微生物细胞表面展示原理 | 第20-21页 |
| 1.6.2 微生物细胞表面展示系统 | 第21-25页 |
| 1.7 研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-32页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.3 培养基 | 第28-29页 |
| 2.1.4 Fahraeus无氮营养液 | 第29-30页 |
| 2.1.5 抗生素 | 第30页 |
| 2.1.6 PCR引物 | 第30-31页 |
| 2.1.7 试剂 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.2.1 细菌质粒制备 | 第32页 |
| 2.2.2 琼脂糖凝胶电泳分析 | 第32页 |
| 2.2.3 PCR扩增目的片段 | 第32-33页 |
| 2.2.4 质粒酶切、酶连及片段回收 | 第33页 |
| 2.2.5 感受态制备及氯化钙法转化 | 第33页 |
| 2.2.6 三亲本接合转移 | 第33页 |
| 2.2.7 根瘤菌总DNA提取 | 第33-34页 |
| 2.2.8 镉对出发菌和重组菌生长的影响 | 第34页 |
| 2.2.9 根瘤菌镉耐受能力测定 | 第34页 |
| 2.2.10 根瘤菌镉吸附能力测定 | 第34页 |
| 2.2.11 静态吸附实验 | 第34-35页 |
| 2.2.12 重组菌与大豆共生盆栽实验 | 第35-36页 |
| 2.2.13 R-TPCR | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-51页 |
| 3.1 重组质粒的构建 | 第37-40页 |
| 3.2 重组根瘤菌的构建与筛选 | 第40-41页 |
| 3.3 不同镉浓度处理下重组菌和出发菌的生长情况 | 第41-43页 |
| 3.4 重组根瘤菌和出发菌对镉的耐受能力比较研究 | 第43-44页 |
| 3.5 重组根瘤菌和出发菌对镉的吸附量比较研究 | 第44-45页 |
| 3.6 静态吸附实验测定重组菌对镉的吸附能力 | 第45页 |
| 3.7 重组根瘤菌在共生体系下对镉的富集及共生表型 | 第45-51页 |
| 3.7.1 共生表型测定 | 第45-47页 |
| 3.7.2 定量分析大豆植株(根及根瘤)对Cd的富集 | 第47-50页 |
| 3.7.3 RT-PCR检测目的基因在根瘤中的表达 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录 | 第64-68页 |
| 论文发表情况 | 第68页 |
