| 中文摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略语 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-21页 |
| 1 研究单链DNA结合蛋白的重要意义 | 第9-11页 |
| 2 随机突变技术 | 第11-12页 |
| 2.1 针对高GC含量DNA的可控突变频率的化学诱变随机突变技术 | 第11-12页 |
| 2.2 倾向错误的聚合酶链式反应(PCR) | 第12页 |
| 3 研究蛋白质多聚体或者蛋白质间相互作用的方法 | 第12-14页 |
| 3.1 细菌双杂交技术 | 第12-13页 |
| 3.2 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第13-14页 |
| 3.3 用于研究蛋白质间相互作用的其他方法 | 第14页 |
| 4 聚丙烯酰胺凝胶阻滞迁移分析(EMSA) | 第14-15页 |
| 5 微生物单链DNA结合蛋白的研究进展 | 第15-18页 |
| 5.1 噬菌体的单链DNA结合蛋白的研究进展 | 第15-16页 |
| 5.2 大肠杆菌的单链DNA结合蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
| 5.3 其它细菌单链DNA结合蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| 6 结核分枝杆菌单链DNA结合蛋白(MtuSSB)的研究进展 | 第18-19页 |
| 7 本课题的意义,内容和研究目标 | 第19-21页 |
| 7.1 研究意义和基本设想 | 第19页 |
| 7.2 研究思路 | 第19页 |
| 7.3 主要研究内容 | 第19-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-29页 |
| 1 材料 | 第21-25页 |
| 1.1 供试菌株 | 第21页 |
| 1.2 供试酶、试剂和试剂盒 | 第21页 |
| 1.3 供试抗生素 | 第21-22页 |
| 1.4 供试质粒 | 第22-23页 |
| 1.5 实验所需培养基 | 第23页 |
| 1.6 其余试剂和缓冲液 | 第23-25页 |
| 2 方法 | 第25-29页 |
| 2.1 分子生物学基本操作 | 第25页 |
| 2.2 重亚硫酸氢钠化学诱变随机突变法(Liu et al.,2009) | 第25页 |
| 2.3 融合蛋白的亲和纯化 | 第25-27页 |
| 2.4 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第27页 |
| 2.5 细菌双杂交实验(B2H) | 第27-28页 |
| 2.6 聚丙烯酰胺凝胶阻滞迁移分析(EMSA) | 第28-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-44页 |
| 1 MtuSSB的克隆,表达纯化和活性验证 | 第29-34页 |
| 1.1 MtuSSB的克隆 | 第29-31页 |
| 1.2 MtuSSB的表达纯化 | 第31-32页 |
| 1.3 MtuSSB的活性验证 | 第32-34页 |
| 2 MtuSSB突变文库的建立 | 第34-40页 |
| 2.1 Rv0054的定量分析 | 第34页 |
| 2.2 Rv0054诱变处理时间的确定 | 第34-35页 |
| 2.3 诱变后DNA的PCR,酶切和高效化转 | 第35-36页 |
| 2.4 小规模随机挑选转化子测序分析 | 第36-38页 |
| 2.5 大规模随机挑选转化子测序分析 | 第38页 |
| 2.6 测序结果统计 | 第38-40页 |
| 3 功能实验分析 | 第40-44页 |
| 3.1 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE) | 第40-41页 |
| 3.2 细菌双杂交(B2H) | 第41-44页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第44-48页 |
| 1 总结 | 第44页 |
| 2 讨论 | 第44-46页 |
| 2.1 MtuSSB突变体库的建立 | 第44-45页 |
| 2.2 MtuSSB功能位点的初步研究 | 第45-46页 |
| 3 研究展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
