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PSMC3抑制蛋白酶体对Argonaute2的降解及机制研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语第10-11页
前言第11-21页
    研究现状、成果第11-20页
    研究目的、方法第20-21页
一、PSMC3 N末端与Ago2蛋白相互作用第21-37页
    1.1 材料和方法第21-30页
        1.1.1 实验材料第21-24页
        1.1.2 实验方法第24-30页
    1.2 结果第30-33页
        1.2.1 利用酵母双杂交系统证实PSMC3的N末端与Ago2蛋白PIWI结构域相互作用第30-31页
        1.2.2 PSMC3 N末端卷曲螺旋结构域的预测第31-32页
        1.2.3 PSMC3通过N末端的卷曲螺旋结构域与内源性Ago2蛋白免疫共沉淀第32-33页
    1.3 讨论第33-36页
    1.4 小结第36-37页
二、PSMC3保护Ago2防止蛋白酶体降解第37-61页
    2.1 材料和方法第37-48页
        2.1.1 实验材料第37-39页
        2.1.2 实验方法第39-48页
    2.2 结果第48-57页
        2.2.1 HeLa细胞转染效率的确定第48-49页
        2.2.2 PSMC3特异性siRNA介导的PSMC3基因沉默第49-50页
        2.2.3 PSMC3调节Ago2的蛋白水平第50-52页
        2.2.4 沉默PSMC3使胞浆内Ago2的蛋白水平减少第52-53页
        2.2.5 沉默PSMC3使Ago2的蛋白质半衰期降低第53-54页
        2.2.6 沉默PSMC3促使Ago2的泛素化增加第54-56页
        2.2.7 抑制26S蛋白酶复合体可以防止Ago2蛋白降解第56-57页
    2.3 讨论第57-60页
    2.4 小结第60-61页
三、PSMC3对RNAi途径的影响第61-81页
    3.1 材料和方法第61-69页
        3.1.1 实验材料第61-63页
        3.1.2 实验方法第63-69页
    3.2 结果第69-76页
        3.2.1 沉默PSMC3抑制siRNA介导的mRNA剪切第69-70页
        3.2.2 沉默PSMC3抑制miRNA介导的mRNA剪切第70-72页
        3.2.3 沉默PSMC3不影响miRNA介导的翻译抑制第72-73页
        3.2.4 过表达野生型PSMC3不影响RNAi作用第73页
        3.2.5 过表达PSMC3突变体可以减弱沉默PSMC3对RISC的抑制作用第73-75页
        3.2.6 MG132可以减弱沉默PSMC3对RISC的抑制作用第75-76页
    3.3 讨论第76-80页
    3.4 小结第80-81页
全文结论第81-83页
论文创新点第83-84页
参考文献第84-95页
发表论文和参加科研情况说明第95-97页
综述第97-108页
    Argonaute蛋白家族第97-101页
    综述参考文献第101-108页
致谢第108页

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