| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-19页 |
| 1 研究问题的由来 | 第9页 |
| 2 文献综述 | 第9-18页 |
| 2.1 miRNAs的发现和分类 | 第9-10页 |
| 2.2 miRNAs的生物合成和加工 | 第10页 |
| 2.3 miRNAs的功能 | 第10-11页 |
| 2.4 内含子miRNAs的表达调控 | 第11-12页 |
| 2.5 内含子miRNAs靶基因预测方法 | 第12-13页 |
| 2.6 microRNAs与SNPs | 第13-14页 |
| 2.7 miRNAs与脂肪沉积 | 第14-15页 |
| 2.8 影响脂肪沉积相关基因及其通路 | 第15-17页 |
| 2.9 克伦特罗功能及其危害 | 第17页 |
| 2.10 miR-483-3p及IGF2相关基因研究进展 | 第17-18页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料和方法 | 第19-28页 |
| 1 材料 | 第19-22页 |
| 1.1 样品 | 第19页 |
| 1.2 菌株、载体和细胞系 | 第19-20页 |
| 1.3 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 1.4 主要试剂 | 第21页 |
| 1.5 主要试剂的配制 | 第21页 |
| 1.6 主要分子生物学软件和网站 | 第21-22页 |
| 2 试验方法 | 第22-28页 |
| 2.1 组织总RNA提取方法 | 第22-23页 |
| 2.2 总RNA完整性及浓度的检测 | 第23页 |
| 2.3 总RNA的反转录 | 第23-24页 |
| 2.4 用于实验的引物设计 | 第24页 |
| 2.5 PCR扩增反应 | 第24-25页 |
| 2.6 双荧光素酶报告载体psi-check2载体的构建 | 第25-26页 |
| 2.7 双荧光素酶报告基因验证miR-483-3p预测靶基因结合位点 | 第26页 |
| 2.8 Western blot蛋白凝胶电泳验证miR-483-3p预测靶基因 | 第26-27页 |
| 2.9 细胞培养 | 第27页 |
| 2.10 性状关联分析 | 第27-28页 |
| 第三章 结果 | 第28-43页 |
| 1 MIR-483-3P与其宿主基因IGF2功能比较研究 | 第28-33页 |
| 1.1 猪miR-483-3p的定位 | 第28-30页 |
| 1.2 猪miR-483-3p与IGF2组织表达谱 | 第30页 |
| 1.3 miR-483-3p初级转录本SNP位点性状关联分析 | 第30-33页 |
| 2 MIR-483-3P靶基因预测及验证 | 第33-39页 |
| 2.1 miR-483-3p靶基因预测及其筛选 | 第33-35页 |
| 2.2 双荧光素酶报告基因载体PSI-CHECK2对miR-483-3p靶基因的验证 | 第35-36页 |
| 2.3 3T3L_1前体脂肪细胞中过表达miR-483-3p,PPARBP和CTNNB1 mRNA水平的检测 | 第36-38页 |
| 2.4 3T3L_1前体脂肪细胞中过表达miR-483-3p,PPARBP和CTNNB1蛋白水平的检测 | 第38-39页 |
| 3 瘦肉精饲喂恩施黑猪MIR-483-3P及相关基因MRNA水平检测 | 第39-43页 |
| 3.1 瘦肉精饲喂后miR-483-3p及其宿主基因IGF2组织的表达趋势变化 | 第39-40页 |
| 3.2 不同组织饲喂瘦肉精后miR-483-3p及其相关基因mRNA水平变化 | 第40-43页 |
| 第四章 讨论 | 第43-47页 |
| 1 猪MIR-483-3P与其宿主基因IGF2功能相关性 | 第43页 |
| 2 内含子MIRNAs靶基因的预测及验证 | 第43-44页 |
| 3 内含子MIRNAs的表达调控 | 第44-47页 |
| 第五章 小结 | 第47-49页 |
| 1 本研究的主要成果 | 第47-48页 |
| 2 本研究的创新点和特色 | 第48页 |
| 3 本研究不足之处及进一步工作建议 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 在读期间已发表或拟发表论文题录 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
