| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第14-29页 |
| 1.1 UV-B 胁迫对植物生长发育的影响 | 第14-26页 |
| 1.1.1 UV-B 的主要特性 | 第14-15页 |
| 1.1.2 UV-B 辐射对植物的诱导作用 | 第15-16页 |
| 1.1.3 紫外胁迫对植物的次生代谢产物的影响 | 第16页 |
| 1.1.4 植物体内化合物对紫外 UV-B 胁迫的保护作用 | 第16-17页 |
| 1.1.5 UV-B 辐射导致的 DNA 细胞损伤研究 | 第17-19页 |
| 1.1.6 损伤 DNA 修复的原理和机制 | 第19-20页 |
| 1.1.7 紫外线诱导的 DNA 细胞损伤修复的主要机制和途径 | 第20-21页 |
| 1.1.8 DNA 修复与 26S-泛素蛋白酶系统关系 | 第21-23页 |
| 1.1.9 核酸剪切修复机制 | 第23-24页 |
| 1.1.10 植物中 NER 相关蛋白以及调控途径的研究 | 第24页 |
| 1.1.11 Rad23 基因在 NER 途径的作用 | 第24-26页 |
| 1.2 植物应对环境胁迫的响应 | 第26-27页 |
| 1.3 本课题研究的目的意义与设想 | 第27-29页 |
| 第2章 拟南芥 Rad23-4 基因的克隆及功能分析 | 第29-53页 |
| 2.1 材料和方法 | 第29-40页 |
| 2.1.1 实验主要材料 | 第29-30页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第30-40页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第40-51页 |
| 2.2.1 Rad23-4 基因的转录调控区域元件分析 | 第40-41页 |
| 2.2.2 拟南芥 Rad23 氨基酸序列的同源性分析 | 第41-42页 |
| 2.2.3 拟南芥体内 RAD23-4 蛋白序列结构预测 | 第42-43页 |
| 2.2.4 pEGAD-Rad23-4 载体的构建和转基因株系的获得 | 第43-44页 |
| 2.2.5 拟南芥 Rad23-4 基因的表达特异性分析 | 第44-46页 |
| 2.2.6 拟南芥 Rad23-4TDNA 插入突变体的分子鉴定及纯合子的获得 | 第46-47页 |
| 2.2.7 拟南芥 Rad23-4 突变体在紫外胁迫下的表型分析 | 第47-51页 |
| 2.3 本章小结 | 第51-53页 |
| 第3章 拟南芥 Rad23-4 基因介导胁迫应答的功能分析 | 第53-69页 |
| 3.1 材料与方法 | 第53-57页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第53-54页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第54-57页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第57-68页 |
| 3.2.1 Rad23-4::GFP 融合表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 3.2.2 35S::Rad23-4-GFP 重组表达载体的转化 | 第58-59页 |
| 3.2.3 基于洋葱表皮细胞的蛋白亚细胞定位检测 | 第59页 |
| 3.2.4 拟南芥 35:: Rad23-4-GFP 表达载体转基因株系的获得 | 第59-61页 |
| 3.2.5 胁迫条件下 Rad23-4 突变体植株的表型分析 | 第61-68页 |
| 3.3 本章小结 | 第68-69页 |
| 第4章 RAD23 原核表达载体构建及其及其活性分析 | 第69-85页 |
| 4.1 材料与方法 | 第69-75页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第69-71页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第71-75页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第75-84页 |
| 4.2.1 Rad23 基因的克隆与原核蛋白表达载体的构建 | 第75-76页 |
| 4.2.2 RAD23 蛋白原核诱导表达产物的 SDS-PAGE 检测 | 第76-77页 |
| 4.2.3 RAD23 重组蛋白在不同条件下的优化表达 | 第77-78页 |
| 4.2.4 RAD23 重组蛋白表达产物的纯化 | 第78-79页 |
| 4.2.5 Western-blotting 鉴定 RAD23 重组蛋白活性 | 第79页 |
| 4.2.6 小鼠免疫 | 第79-80页 |
| 4.2.7 抗血清校价和特异性鉴定 | 第80页 |
| 4.2.8 重组蛋白在体外对 Hela 细胞紫外的损伤保护作用 | 第80-81页 |
| 4.2.9 pCold-RAD23 蛋白对 Hela 细胞的增殖活性分析 | 第81-82页 |
| 4.2.10 Hoechst-PI 双染分析 pCold-RAD23 蛋白对 Hela 细胞的凋亡 | 第82-84页 |
| 4.3 本章小结 | 第84-85页 |
| 第5章 Rad23 家族基因克隆和功能分析 | 第85-111页 |
| 5.1 材料与方法 | 第85-91页 |
| 5.1.1 实验主要材料 | 第85-86页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第86-91页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第91-110页 |
| 5.2.1 Rad23::GFP 家族基因融合表达载体的构建 | 第91-95页 |
| 5.2.2 Rad23 基因在其组织表达的特异性鉴定 | 第95-96页 |
| 5.2.3 Rad23 T-DNA 突变体植株的分离鉴定和纯合子的筛选 | 第96-97页 |
| 5.2.4 Rad23 T-DNA 插入突变体在各种胁迫下的表型分析 | 第97页 |
| 5.2.5 Rad23 T-DNA 插入突变体种子萌发在 ABA 胁迫下表型分析 | 第97-101页 |
| 5.2.6 在 ABA 胁迫条件下 Rad23 基因突变体对脯氨酸代谢的调控 | 第101-102页 |
| 5.2.7 Rad23-2 突变体内胁迫调控基因 mRNA 表达水平的分析检测 | 第102-103页 |
| 5.2.8 拟南芥 Rad23-2 基因的组织表达 | 第103-105页 |
| 5.2.9 RAD23-2 蛋白在花器官中表达检测 | 第105-107页 |
| 5.2.10 Rad23-2 基因突变对花粉颗粒的活性影响 | 第107-108页 |
| 5.2.11 Rad23-2 突变对种子发育的影响 | 第108页 |
| 5.2.12 Rad23-2 调节花粉和绒毡层发育相关基因的表达 | 第108-110页 |
| 5.3 本章小结 | 第110-111页 |
| 结论 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-125页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
