| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 1 绪论 | 第11-23页 |
| 1.1 问题的提出与研究意义 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第12-18页 |
| 1.2.1 哮喘研究现状 | 第12-13页 |
| 1.2.2 气道高反应性在哮喘中的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.2.3 定量分析气道平滑肌细胞生物力学属性的研究方法 | 第14-16页 |
| 1.2.4 ADAM33 在哮喘中的研究现状 | 第16-18页 |
| 1.3 本课题研究内容和目的 | 第18-21页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第18-19页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第19-20页 |
| 1.3.3 技术路线 | 第20-21页 |
| 1.4 本课题创新点与拟解决的关键问题 | 第21-23页 |
| 1.4.1 创新点 | 第21页 |
| 1.4.2 拟解决关键问题 | 第21-23页 |
| 2 哮喘动物模型气道平滑肌细胞 ADAM33 蛋白表达量的检测 | 第23-35页 |
| 2.1 实验设备、材料和试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.1 所有实验设备、仪器及材料 | 第24页 |
| 2.1.2 所有实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法和步骤 | 第25-29页 |
| 2.2.1 OVA 致敏的慢性哮喘动物模型的制备 | 第25-26页 |
| 2.2.2 肺部组织病理切片 HE 染色鉴定鉴定哮喘模型 | 第26页 |
| 2.2.3 气道平滑肌细胞的原代培养与鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.4 ADAM33 蛋白表达量的检测 | 第27-29页 |
| 2.2.5 数据处理与统计分析 | 第29页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第29-33页 |
| 2.3.1 不同 OVA 致敏程度 SD 大鼠哮喘模型的构建 | 第29-30页 |
| 2.3.2 气道平滑肌细胞的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.3 正常及 OVA 致敏组 ASMC 中 ADAM33 蛋白表达水平 | 第31-32页 |
| 2.3.4 讨论 | 第32-33页 |
| 2.4 本章小结 | 第33-35页 |
| 3 ADAM33 蛋白表达与气道平滑肌细胞生物力学属性的相关性 | 第35-55页 |
| 3.1 实验设备、试剂和材料 | 第35-37页 |
| 3.1.1 实验设备、材料及仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.2 所有实验试剂 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第37-43页 |
| 3.2.1 光学磁粒扭转细胞测量技术（OMTC）测量细胞刚度与收缩性 | 第37-39页 |
| 3.2.2 运用傅立叶变换牵引力显微术（FTTM）测量细胞牵引力 | 第39-41页 |
| 3.2.3 Transwell 小室法测量气道平滑肌细胞的迁移行为 | 第41-42页 |
| 3.2.4 免疫染色与免疫荧光测量细胞骨架蛋白 F-actin 和 Vinculin 的表达 | 第42-43页 |
| 3.2.5 相关性分析与统计分析 | 第43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-52页 |
| 3.3.1 OVA 致敏对气道平滑肌细胞刚度与收缩性的影响 | 第43-45页 |
| 3.3.2 OVA 致敏对气道平滑肌细胞牵引力的影响 | 第45-47页 |
| 3.3.3 OVA 致敏对气道平滑肌细胞 F-actin 和 Vinculin 表达的影响 | 第47-49页 |
| 3.3.4 OVA 致敏对气道平滑肌细胞迁移能力的影响 | 第49-50页 |
| 3.3.5 ADAM33 蛋白表达与气道平滑细胞力学属性的相关性 | 第50页 |
| 3.3.6 讨论 | 第50-52页 |
| 3.4 本章小结 | 第52-55页 |
| 4 调控 ADAM33 蛋白表达对气道平滑肌细胞生物力学行为的影响 | 第55-67页 |
| 4.1 实验设备、材料和试剂 | 第55-57页 |
| 4.1.1 所有实验设备及仪器 | 第55-56页 |
| 4.1.2 所有实验材料和试剂 | 第56-57页 |
| 4.2 实验方法和步骤 | 第57-59页 |
| 4.2.1 慢病毒转染气道平滑肌细胞调控 ADAM33 蛋白表达 | 第57页 |
| 4.2.2 气道平滑肌细胞 ADAM33 蛋白表达的测量 | 第57-58页 |
| 4.2.3 气道平滑肌细胞细胞刚度的测量 | 第58页 |
| 4.2.4 气道平滑肌细胞牵引力的测量 | 第58-59页 |
| 4.2.5 数据处理与统计分析 | 第59页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第59-65页 |
| 4.3.1 重组慢病毒转染 OVA 致敏 4 周来源的气道平滑肌细胞 | 第59-60页 |
| 4.3.2 慢病毒转染气道平滑肌细胞后 ADAM33 蛋白表达水平 | 第60-61页 |
| 4.3.3 下调 ADAM33 蛋白表达对气道平滑肌细胞刚度的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.4 下调 ADAM33 蛋白表达对气道平滑肌细胞牵引力的影响 | 第62-64页 |
| 4.3.5 讨论 | 第64-65页 |
| 4.4 本章小结 | 第65-67页 |
| 5 结论与展望 | 第67-71页 |
| 5.1 主要结论 | 第67-68页 |
| 5.2 后续工作及展望 | 第68-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 附录 | 第81页 |
| A. 作者在攻读硕士学位期间发表及待发表的论文目录 | 第81页 |
| B. 作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第81页 |
