| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-35页 |
| 1.1 癌症研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 癌症以及肝癌 | 第10-11页 |
| 1.3 原癌基因与抑癌基因 | 第11-20页 |
| 1.3.1 原癌基因 | 第12-20页 |
| 1.3.2 抑癌基因 | 第20页 |
| 1.4 肿瘤细胞能量代谢异常 | 第20-35页 |
| 1.4.1 葡萄糖代谢 | 第23-26页 |
| 1.4.2 谷氨酰胺代谢 | 第26-29页 |
| 1.4.3 一碳代谢(丝/甘氨酸代谢) | 第29-31页 |
| 1.4.4 cMyc与肿瘤代谢 | 第31-35页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第35-63页 |
| 2.1 细胞培养与试剂 | 第35页 |
| 2.2 缺陷培养基的配制 | 第35-38页 |
| 2.2.1 各种营养缺陷培养基 | 第35页 |
| 2.2.2 各种营养物质 | 第35-36页 |
| 2.2.3 各种营养物质母液配制 | 第36页 |
| 2.2.4 细胞培养及实验过程试剂 | 第36-37页 |
| 2.2.5 细胞培养及实验过程所需实验仪器 | 第37-38页 |
| 2.3 Western blotting | 第38-43页 |
| 2.3.1 准备蛋白样品(方法适用于贴壁粘附细胞) | 第38-39页 |
| 2.3.2 转膜(针对湿转) | 第39页 |
| 2.3.3 抗体敷育及显影 | 第39-40页 |
| 2.3.4 免疫印迹相关buffer配制 | 第40-43页 |
| 2.4 荧光实时定量PCR | 第43-46页 |
| 2.4.1 Total RNA的提取 | 第43-44页 |
| 2.4.2 第一链cDNA的合成 | 第44-45页 |
| 2.4.3 PCR或者qPCR反应 | 第45-46页 |
| 2.5 胶回收、PCR产物纯化及质粒构建 | 第46-47页 |
| 2.6 感受态细胞的制备以及外源DNA的转化 | 第47-48页 |
| 2.7 质粒DNA小量抽提 | 第48-50页 |
| 2.8 质粒DNA转染(病毒包装及感染) | 第50-51页 |
| 2.9 ChIP | 第51-53页 |
| 2.10 谷胱甘肽水平检测 | 第53-54页 |
| 2.11 还原型与氧化型谷胱甘肽比例检测 | 第54-57页 |
| 2.12 细胞周期检测 | 第57-58页 |
| 2.13 细胞凋亡检测 | 第58页 |
| 2.14 细胞ROS检测 | 第58-59页 |
| 2.15 NMR检测~(13)C标记的代谢物 | 第59-61页 |
| 2.16 动物实验 | 第61页 |
| 2.17 临床样本检测与分析 | 第61页 |
| 2.18 免疫组化(1mmunohistochemistry) | 第61页 |
| 2.19 数据处理 | 第61-63页 |
| 第三章 实验结果 | 第63-91页 |
| 3.1 营养缺失条件下代谢通路的活化可以激活丝氨酸从头合成通路 | 第63-66页 |
| 3.2 cMyc在转录水平激活参与丝氨酸从头合成通路代谢酶的表达 | 第66-72页 |
| 3.3 cMyc介导的PSPH的表达以及丝氨酸代谢通路的活化通过调节细胞内GSH、ROS、凋亡、核苷酸的合成来维持细胞增殖 | 第72-78页 |
| 3.4 cMyc和PSPH对营养压力条件下肿瘤细胞的生长至关重要 | 第78-81页 |
| 3.5 PSPH在cMyc发挥体内外成瘤过程中起着重要的作用 | 第81-84页 |
| 3.6 临床上HCC中异常表达的PSPH预示较差的预后 | 第84-86页 |
| 3.7. 讨论 | 第86-91页 |
| 附录 | 第91-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第116页 |
