| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-18页 |
| 1.1 木薯概述 | 第10-11页 |
| 1.2 植物的抗寒性 | 第11-13页 |
| 1.2.1 细胞膜系统与抗寒性 | 第11-12页 |
| 1.2.2 抗氧化系统与抗寒性 | 第12-13页 |
| 1.2.3 渗透调节物质与抗寒性 | 第13页 |
| 1.3 抗寒性相关基因的研究 | 第13-16页 |
| 1.3.1 LEA蛋白基因的研究 | 第14页 |
| 1.3.2 冷调节基因的研究 | 第14-15页 |
| 1.3.3 基因表达转录水平的研究 | 第15-16页 |
| 1.4 木薯抗寒性研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第18页 |
| 2.2 试验仪器与试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.1 仪器 | 第18页 |
| 2.2.2 试剂 | 第18-19页 |
| 2.3 基因克隆相关试验方法 | 第19-27页 |
| 2.3.1 木薯总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.3.2 总RNA的浓度测定及电泳分析 | 第20-21页 |
| 2.3.3 总RNA逆转录合成cDNA | 第21-22页 |
| 2.3.4 CBF1和CBF2基因的克隆 | 第22-23页 |
| 2.3.5 目的基因片段的回收 | 第23-24页 |
| 2.3.6 目的基因片段的转化 | 第24页 |
| 2.3.7 质粒DNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.3.8 CBF1基因的双酶切 | 第25-26页 |
| 2.3.9 酶切后的CBF1基因与PBI121-GFP载体质粒的连接 | 第26-27页 |
| 2.4 目的基因的实时荧光定量 | 第27-30页 |
| 2.4.1 RNA反转录生成cDNA第一条链 | 第27-28页 |
| 2.4.2 实时荧光定量PCR | 第28-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-51页 |
| 3.1 木薯总RNA及cDNA的质量分析 | 第30-31页 |
| 3.2 木薯CBF1基因的克隆及双酶切 | 第31-33页 |
| 3.3 CBF1基因在不同木薯品种中的差异分析 | 第33-36页 |
| 3.4 CBF1基因所表达的蛋白结构分析 | 第36-39页 |
| 3.5 CBF1基因的实时荧光定量分析 | 第39-42页 |
| 3.6 木薯CBF2基因的克隆及蛋白分析 | 第42-46页 |
| 3.7 抗寒相关生理指标的研究 | 第46-50页 |
| 3.7.1 脯氨酸 | 第46-47页 |
| 3.7.2 可溶性糖 | 第47-48页 |
| 3.7.3 SOD活性 | 第48页 |
| 3.7.4 CAT活性 | 第48-49页 |
| 3.7.5 丙二醛 | 第49-50页 |
| 3.8 木薯抗寒基因功能的初步分析 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-55页 |
| 4.1 CBF1及CBF2基因的克隆 | 第51-52页 |
| 4.2 木薯抗寒性不同品种CBF1及CBF2基因的差异表达 | 第52页 |
| 4.3 木薯抗寒基因CBF1及CBF2的蛋白结构 | 第52-53页 |
| 4.4 木薯抗寒生理特性 | 第53-55页 |
| 5 结论 | 第55-56页 |
| 6 创新点 | 第56-57页 |
| 7 问题与展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第65页 |