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一氧化氮调节金黄色葡萄球菌生物被膜形成的作用机制探讨

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
前言第13-31页
 1 NO的理化性质第13-14页
 2 NO的生成过程第14-15页
 3 NO在动植物中的作用研究第15-19页
   ·动物细胞中NO的生理功能及作用机理第15-17页
   ·植物细胞中NO的生理功能及作用机理第17-19页
 4 NO在微生物中的研究第19-28页
   ·微生物中NO的来源第20-21页
   ·微生物中NO的生物学作用及作用机理第21-24页
   ·NO与细菌生物被膜第24-28页
 5 小结和本论文的研究内容第28-31页
第一部分 N-乙酰氨基葡聚糖苷酶(DSPB)对金黄色葡萄球菌电击转化的促进作用研究第31-38页
 1 实验材料和仪器第31-32页
   ·菌株和质粒第31-32页
   ·试剂与溶液第32页
   ·仪器第32页
 2 实验方法第32-34页
   ·金黄色葡萄球菌的电击转化第32-34页
 3 结果与讨论第34-37页
   ·DSPB对金黄色葡萄球菌中所提取质粒的影响第34-35页
   ·电击电压对转化效率的影响第35-36页
   ·DSPB处理对转化率和存活率的影响第36页
   ·实验方法应用的普遍性第36-37页
 4 小结第37-38页
第二部分 NO对S.aureus RN6390生物被膜形成的影响研究第38-47页
 1 实验材料和仪器第38-39页
   ·质粒和菌株第38页
   ·试剂第38-39页
   ·仪器第39页
 2 试验方法第39-42页
   ·金黄色葡萄球菌RN6390△nos中nos基因的回补第39-40页
   ·S.aureus RN6390不同生物被膜模型的构建第40-41页
   ·NO对S.aureus RN6390生物被膜形成的影响第41-42页
 3 结果与讨论第42-46页
   ·RN6390△nos-PMGS100-nos和RN6390中nos基因的表达第42-43页
   ·S.aureus RN6390不同生物被膜模型的构建第43-44页
   ·外源性NO对S.aureus RN6390生物被膜形成的影响第44-46页
   ·内源性NO对S.aureus RN6390生物被膜形成的影响第46页
 4 小结第46-47页
第三部分 胞外多糖在NO对S.aureus生物被膜促进过程中的作用第47-54页
 1 实验材料和仪器第47-48页
   ·菌株和质粒第47页
   ·常用缓冲液及其他溶液配制第47-48页
   ·试剂第48页
   ·仪器第48页
 2 实验方法第48-50页
   ·NO对S.aureus RN6390胞外总多糖含量的影响第48-49页
   ·定量PCR检测NO对S.aureus RN6390 ica表达的影响第49页
   ·NO对S.aureus RN6390 PIA表达量的影响第49-50页
   ·NO对S.aureus 15981和15981△ica成膜能力的影响第50页
 3 结果与讨论第50-53页
   ·NO对S.aureus RN6390胞外总多糖产生的影响第50-51页
   ·定量PCR检测NO对S.aureus RN6390中ica表达的影响第51-52页
   ·NO对S.aureus RN6390 PIA产生的影响第52-53页
   ·NO对S.aureus 15981和15981△ica成膜能力的影响第53页
 4 小结第53-54页
第四部分 双组分系统srrAB在NO对S.aureus生物被膜促进过程中的作用研究第54-70页
 1 实验材料与仪器第54-57页
   ·菌株和质粒第54-55页
   ·试剂第55页
   ·常用缓冲液及溶液第55页
   ·仪器第55-57页
 2 实验方法第57-63页
   ·定量PCR检测S.aureus RN6390生物膜及浮游菌中srrAB基因的表达差异第57页
   ·打靶载体pMAD△srrAB的构建第57-61页
   ·同源重组质粒pMAD△srrAB电转入S.aureus RN4220及RN6390第61页
   ·S.aureus RN6390srrAB基因缺失突变株的筛选第61-62页
   ·S.aureus RN6390srrAB基因缺失突变菌株的鉴定第62-63页
   ·NO对RN6390及RN6390△srrAB成膜能力的影响第63页
 3 结果与讨论第63-69页
   ·S.aureus RN6390浮游菌及生物膜细菌中srrAB基因的表达差异第63-65页
   ·质粒pMAD△srrAB的构建第65-66页
   ·同源重组质粒pMAD△srrAB电转入S.aureus RN4220及RN6390第66页
   ·S.aureus RN6390 srrAB基因缺失突变株的筛选第66-67页
   ·S.aureus RN6390 srrAB基因缺失突变株的鉴定第67-68页
   ·NO对S.aureus RN6390及RN6390△srrAB成膜能力的影响第68-69页
 4 小结第69-70页
参考文献第70-78页
致谢第78-79页
个人简历第79页
攻读硕士期间撰写的文章第79页

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