| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩写 | 第9-16页 |
| 第1章 绪论 | 第16-31页 |
| 1.1 癌症 | 第16页 |
| 1.2 腺癌及其分子分型 | 第16-17页 |
| 1.3 乳腺癌的恶性转移 | 第17-26页 |
| 1.3.1 肿瘤转移 | 第17-20页 |
| 1.3.2 乳腺癌转移的相关研究 | 第20-21页 |
| 1.3.3 上皮-间质转化 | 第21-26页 |
| 1.4 转录因子FOXA2 | 第26-29页 |
| 1.4.1 FOX家族 | 第26页 |
| 1.4.2 FOXA2分子结构 | 第26页 |
| 1.4.3 FOXA2的基因组定位与自身活性 | 第26-27页 |
| 1.4.4 FOXA2的生物学功能 | 第27-29页 |
| 1.5 本文的研究背景及内容 | 第29-31页 |
| 第2章 FOXA2的表达与乳腺癌上皮表型相关 | 第31-47页 |
| 2.1 前言 | 第31-32页 |
| 2.2 实验材料及实验仪器 | 第32-34页 |
| 2.2.1 临床样本及细胞 | 第32页 |
| 2.2.2 其它实验材料和试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.3 主要试验仪器 | 第33-34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-43页 |
| 2.3.1 乳腺癌临床样本 | 第34页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第34-36页 |
| 2.3.3 提取总RNA以及逆转录c DNA | 第36-38页 |
| 2.3.4 聚合酶链式反应（PCR） | 第38-39页 |
| 2.3.5 Weatern Blotting（WB） | 第39-42页 |
| 2.3.6 Transwell实验 | 第42-43页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第43-46页 |
| 2.4.1 乳腺癌临床样本中FOXA2与上皮特性相关 | 第43-44页 |
| 2.4.2 EGF诱导MCF-10A的EMT过程中，FOXA2表达下调 | 第44-45页 |
| 2.4.3 FOXA2在乳腺癌上皮型细胞中高表达 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-47页 |
| 第3章 FOXA2抑制乳腺癌细胞的间质表型及其迁移能力 | 第47-58页 |
| 3.1 前言 | 第47页 |
| 3.2 实验材料及实验仪器 | 第47-49页 |
| 3.2.1 细胞 | 第47-48页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第48页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第48-49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-53页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第49页 |
| 3.3.2 Transwell实验 | 第49页 |
| 3.3.3 荧光定量PCR实验 | 第49页 |
| 3.3.4 WB实验 | 第49页 |
| 3.3.5 慢病毒的构建 | 第49-52页 |
| 3.3.6 稳定表达细胞株筛选 | 第52-53页 |
| 3.3.7 脂质体转染实验 | 第53页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第53-57页 |
| 3.4.1 FOXA2的敲除激活了MCF-7 的EMT过程 | 第53-54页 |
| 3.4.2 p LV-h FOXA2-IRES-EGFP质粒构建及表达检测 | 第54-55页 |
| 3.4.3 稳定表达FOXA2细胞株的构建 | 第55-56页 |
| 3.4.4 稳定表达FOXA2促使MDA-MB-231 细胞间质特征的丧失 | 第56-57页 |
| 3.5 小结 | 第57-58页 |
| 第4章 FOXA2通过调控下游靶基因E-cadherin和ZEB2抑制乳腺癌细胞的EMT过程 | 第58-70页 |
| 4.1 前言 | 第58-59页 |
| 4.2 实验材料及实验仪器 | 第59-60页 |
| 4.2.1 细胞 | 第59页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第59页 |
| 4.2.3 主要仪器 | 第59-60页 |
| 4.3 实验方法 | 第60-64页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第60页 |
| 4.3.2 CHIP实验 | 第60-61页 |
| 4.3.3 EMSA实验 | 第61-63页 |
| 4.3.4 双荧光素酶报告基因实验 | 第63页 |
| 4.3.5 启动子构建 | 第63-64页 |
| 4.3.6 免疫荧光染色 | 第64页 |
| 4.3.7 Transwell实验 | 第64页 |
| 4.3.8 脂质体转染实验 | 第64页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第64-69页 |
| 4.4.1 FOXA2直接绑定E-cdherin的启动子并促使其表达 | 第64-65页 |
| 4.4.2 在乳腺癌细胞中FOXA2抑制ZEB2的表达 | 第65-66页 |
| 4.4.3 在乳腺癌临床样本中FOXA2与ZEB2表达呈负相关 | 第66-67页 |
| 4.4.4 FOXA2直接绑定ZEB2的启动子并抑制其表达 | 第67页 |
| 4.4.5 ZEB2能够补偿FOXA2引起的EMT过程改变 | 第67-68页 |
| 4.4.6 在乳腺癌细胞中ZEB2能够抑制FOXA2的表达 | 第68-69页 |
| 4.5 小结 | 第69-70页 |
| 第5章 FOXA2通过招募TLE3抑制ZEB2的表达 | 第70-75页 |
| 5.1 前言 | 第70页 |
| 5.2 实验材料及实验仪器 | 第70-71页 |
| 5.2.1 细胞 | 第70页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第70-71页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第71页 |
| 5.3 实验方法 | 第71-72页 |
| 5.3.1 Co-IP实验 | 第71-72页 |
| 5.3.2 CHIP实验 | 第72页 |
| 5.3.3 EMSA | 第72页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第72-74页 |
| 5.5.1 TLE3的缺失促进了MCF-7 细胞的EMT过程 | 第73页 |
| 5.5.2 FOXA2与TLE3相互作用进而抑制ZEB2的转录 | 第73-74页 |
| 5.5 小结 | 第74-75页 |
| 第6章 稳定表达FOXA2抑制乳腺癌细胞体内转移过程 | 第75-80页 |
| 6.1 前言 | 第75页 |
| 6.2 实验材料及实验仪器 | 第75-76页 |
| 6.3 实验方法 | 第76-77页 |
| 6.3.1 小鼠乳腺癌转移模型建立 | 第76页 |
| 6.3.2 血液样本RNA提取，组织样本RNA和蛋白提取 | 第76页 |
| 6.3.3 石蜡切片 | 第76-77页 |
| 6.3.4 HE染色 | 第77页 |
| 6.4 实验结果与讨论 | 第77-79页 |
| 6.5 小结 | 第79-80页 |
| 结论 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-93页 |
| 附录A 常用缓冲液和试剂配方 | 第93-94页 |
| 附录B 攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
