| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 前言 | 第17-31页 |
| 1.1 植物抗逆的机制 | 第17-24页 |
| 1.1.1 盐和干旱胁迫对植物的危害 | 第17-19页 |
| 1.1.2 植物适应盐和干旱胁迫的生理机制 | 第19-21页 |
| 1.1.3 植物对干旱和盐胁迫的信号应答机制 | 第21-24页 |
| 1.2 植物非生物胁迫转录因子DREB/CBF的研究进展 | 第24-30页 |
| 1.2.1 植物AP2/ERF转录因子家族 | 第25-27页 |
| 1.2.2 植物DREB/CBF转录因子的结构特征 | 第27-28页 |
| 1.2.3 植物DREB/CBF转录因子基因的生物学功能 | 第28页 |
| 1.2.4 植物DREB/CBF转录因子基因的表达调控 | 第28-29页 |
| 1.2.5 DREB/CBF转录因子在植物抗逆工程中的应用 | 第29-30页 |
| 1.3 棉花DREB/CBF基因的研究进展 | 第30页 |
| 1.4 立题依据及研究意义 | 第30-31页 |
| 第二章 棉花CBF基因筛选鉴定和表达分析 | 第31-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第31页 |
| 2.1.2 工具酶 | 第31页 |
| 2.1.3 常用的化学试剂 | 第31页 |
| 2.1.4 常用储液和缓冲液 | 第31页 |
| 2.1.5 MS培养基 | 第31-32页 |
| 2.1.6 PCR扩增引物及试剂 | 第32页 |
| 2.2 实验器材 | 第32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.3.1 GhCBF基因的电子克隆及生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 2.3.2 GhCBF基因的序列分析 | 第33页 |
| 2.3.3 棉花无菌苗的培养及材料的收取 | 第33页 |
| 2.3.4 棉花总RNA提取、纯化以及逆转录反应 | 第33-35页 |
| 2.3.5 实时定量RT-PCR分析 | 第35-37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-51页 |
| 2.4.1 GhCBF基因筛选鉴定 | 第37-41页 |
| 2.4.2 GhCBF基因的进化树分析 | 第41-42页 |
| 2.4.3 GhCBF基因的鉴定和序列分析 | 第42-44页 |
| 2.4.4 GhCBF基因在冷胁迫条件下的表达分析 | 第44-47页 |
| 2.4.5 GhCBF基因在干旱胁迫条件下的表达分析 | 第47-48页 |
| 2.4.6 GhCBF基因在盐胁迫条件下的表达分析 | 第48-50页 |
| 2.4.7 GhCBF基因在各组织中的表达分析 | 第50-51页 |
| 2.5 讨论 | 第51-53页 |
| 第三章 棉花GHCBF3基因分离鉴定和表达分析 | 第53-77页 |
| 3.1 实验材料 | 第53-56页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第53页 |
| 3.1.2 菌株和载体 | 第53页 |
| 3.1.3 工具酶 | 第53页 |
| 3.1.4 常用的化学试剂和试剂盒 | 第53页 |
| 3.1.5 常用储液和缓冲液 | 第53-54页 |
| 3.1.6 培养基 | 第54-56页 |
| 3.1.7 棉花基因组DNA提取试剂 | 第56页 |
| 3.1.8 PCR扩增引物及试剂 | 第56页 |
| 3.1.9 DNA测序 | 第56页 |
| 3.2 实验器材 | 第56页 |
| 3.3 实验方法 | 第56-64页 |
| 3.3.1 DNA及蛋白质序列分析 | 第56页 |
| 3.3.2 棉花无菌苗的培养及材料的收取 | 第56页 |
| 3.3.3 棉花基因组DNA的提取 | 第56-57页 |
| 3.3.4 拟南芥的培养 | 第57页 |
| 3.3.5 棉花和拟南芥总RNA提取、纯化以及逆转录反应 | 第57-58页 |
| 3.3.6 实时定量RT-PCR分析 | 第58页 |
| 3.3.7 GhCBF3基因全长序列的克隆 | 第58-61页 |
| 3.3.8 GhCBF3：eGFP载体构建和亚细胞定位分析 | 第61-62页 |
| 3.3.9 GhCBF3基因启动子全长序列的克隆 | 第62-63页 |
| 3.3.10 GhCBF3基因自激活检测 | 第63-64页 |
| 3.4 实验结果 | 第64-75页 |
| 3.4.1 GhCBF3基因的分离、鉴定和序列分析 | 第64-67页 |
| 3.4.2 GhCBF3基因的进化树分析 | 第67-68页 |
| 3.4.3 GhCBF3基因在棉花各组织中的表达分析 | 第68-69页 |
| 3.4.4 GhCBF3基因受盐、干旱和ABA的诱导表达 | 第69-70页 |
| 3.4.5 GhCBF3蛋白的亚细胞定位分析 | 第70-71页 |
| 3.4.6 GhCBF3自激活分析 | 第71-72页 |
| 3.4.7 GhCBF3基因启动子受盐和干旱胁迫诱导 | 第72-75页 |
| 3.5 讨论 | 第75-77页 |
| 第四章 棉花GHCBF3基因的抗逆功能分析 | 第77-99页 |
| 4.1 实验材料 | 第77-79页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第77页 |
| 4.1.2 菌株和载体 | 第77页 |
| 4.1.3 工具酶 | 第77页 |
| 4.1.4 常用的化学试剂 | 第77页 |
| 4.1.5 常用储液和缓冲液 | 第77页 |
| 4.1.6 培养基 | 第77-78页 |
| 4.1.7 PCR扩增引物、试剂 | 第78-79页 |
| 4.2 实验器材 | 第79页 |
| 4.3 实验方法 | 第79-83页 |
| 4.3.1 拟南芥的培养 | 第79页 |
| 4.3.2 GhCBF3过量表达载体的构建 | 第79-80页 |
| 4.3.3 过量表达GhCBF3基因拟南芥的转化和阳性苗PCR检测 | 第80页 |
| 4.3.4 过量表达GhCBF3基因拟南芥RNA水平检测表达量 | 第80页 |
| 4.3.5 拟南芥的非生物胁迫处理方法 | 第80-81页 |
| 4.3.6 拟南芥生理指标测定方法 | 第81-82页 |
| 4.3.7 拟南芥气孔导度测定方法 | 第82页 |
| 4.3.8 qRT-PCR分析ABA相关基因的表达 | 第82-83页 |
| 4.4 实验结果 | 第83-97页 |
| 4.4.1 gDNA和RNA水平检测转基因拟南芥中GhCBF3基因的表达 | 第83-84页 |
| 4.4.2 过量表达GhCBF3基因提高转基因拟南芥耐盐性分析 | 第84-88页 |
| 4.4.3 过量表达GhCBF3基因提高转基因拟南芥抗旱性 | 第88-93页 |
| 4.4.4 过量表达GhCBF3基因提高转基因拟南芥对ABA的敏感性 | 第93-96页 |
| 4.4.5 过量表达GhCBF3基因对拟南芥ABA和抗性相关基因的表达分析 | 第96-97页 |
| 4.5 讨论 | 第97-99页 |
| 第五章 棉花GHCBF2基因的克隆、鉴定和抗逆功能分析 | 第99-120页 |
| 5.1 实验材料 | 第99页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第99页 |
| 5.1.2 菌株载体和工具酶 | 第99页 |
| 5.1.3 常用的化学试剂 | 第99页 |
| 5.1.4 常用储液、缓冲液和培养基 | 第99页 |
| 5.1.5 PCR扩增引物、试剂 | 第99页 |
| 5.2 实验方法 | 第99-101页 |
| 5.2.1 GhCBF2过量表达载体的构建 | 第99-100页 |
| 5.2.2 过量表达GhCBF2基因拟南芥的转化和阳性苗PCR检测 | 第100页 |
| 5.2.3 拟南芥的非生物胁迫处理方法 | 第100页 |
| 5.2.4 拟南芥生理指标测定方法 | 第100页 |
| 5.2.5 qRT-PCR分析ABA相关基因的表达 | 第100-101页 |
| 5.3 实验结果 | 第101-117页 |
| 5.3.1 GhCBF2基因的诱导表达分析 | 第101-102页 |
| 5.3.2 GhCBF2基因的克隆 | 第102页 |
| 5.3.3 GhCBF2基因鉴定和序列分析 | 第102-104页 |
| 5.3.4 GhCBF2进化树分析 | 第104-105页 |
| 5.3.5 GhCBF2基因的组织表达分析 | 第105-106页 |
| 5.3.6 GhCBF2蛋白亚细胞定位分析 | 第106-107页 |
| 5.3.7 过量表达GhCBF2基因拟南芥阳性苗gDNA和RNA水平检测 | 第107-108页 |
| 5.3.8 过量表达GhCBF2基因提高逆境条件下拟南芥种子萌发率 | 第108-110页 |
| 5.3.9 过量表达GhCBF2基因提高拟南芥幼苗抗逆性 | 第110-112页 |
| 5.3.10 过量表达GhCBF2基因提高拟南芥抗逆性 | 第112-114页 |
| 5.3.11 过量表达GhCBF2基因抗性生理指标测定 | 第114-116页 |
| 5.3.12 过量表达GhCBF2基因拟南芥抗逆相关基因的表达分析 | 第116-117页 |
| 5.4 讨论 | 第117-120页 |
| 结论 | 第120-121页 |
| 本论文的主要创新点 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-133页 |
| 附录 | 第133-134页 |
| 博士期间撰写和发表的学术论文 | 第134-135页 |
| 致谢 | 第135页 |
