摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第11-13页 |
第2章 材料与方法 | 第13-27页 |
2.1 材料 | 第13页 |
2.1.1 临床标本收集 | 第13页 |
2.1.2 排除标准 | 第13页 |
2.2 主要仪器设备 | 第13-14页 |
2.3 主要试剂 | 第14-15页 |
2.4 主要试剂的配制 | 第15-16页 |
2.4.1 磷酸盐缓冲液(PBS) | 第15页 |
2.4.2 TBE电泳缓冲液 | 第15页 |
2.4.3 SDS-PAGE分离胶(10%)和浓缩胶(5%): | 第15-16页 |
2.4.4 蛋白免疫印迹(WesternBlot)主要缓冲液及洗涤液配制 | 第16页 |
2.5 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测CTSHmRNA的表达 | 第16-21页 |
2.5.1 总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.5.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第18页 |
2.5.3 RNA逆转录合成cDNA | 第18-19页 |
2.5.4 核酸浓度测定 | 第19页 |
2.5.5 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第19-21页 |
2.6 蛋白免疫印迹(WesternBlot)法检测CTSH蛋白表达 | 第21-24页 |
2.6.1 总蛋白提取 | 第21页 |
2.6.2 使用蛋白定量试剂盒(BCA法)检测蛋白浓度 | 第21-22页 |
2.6.3 SDS-PAGE凝胶配制 | 第22页 |
2.6.4 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第22-23页 |
2.6.5 转膜 | 第23页 |
2.6.6 免疫反应 | 第23-24页 |
2.6.7 显色反应 | 第24页 |
2.7 免疫组织化学(IHC)SP法检测CTSH蛋白表达 | 第24-26页 |
2.7.1 制作切片 | 第25页 |
2.7.2 染色 | 第25-26页 |
2.7.3 免疫组化结果判断 | 第26页 |
2.8 统计学分析 | 第26-27页 |
第3章 结果 | 第27-32页 |
3.1 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测CTSHmRNA的表达 | 第27页 |
3.2 蛋白免疫印迹(WesternBlot)法检测CTSH蛋白的表达 | 第27-28页 |
3.3 免疫组织化学S-P法检测CTSH蛋白的表达 | 第28-30页 |
3.4 CTSH蛋白的表达与甲状腺乳头状癌的临床病理特征的关系 | 第30-32页 |
第4章 讨论 | 第32-35页 |
第5章 结论 | 第35-36页 |
致谢 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-40页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第40-41页 |
综述 | 第41-48页 |
参考文献 | 第46-48页 |