| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第22-49页 |
| ·引言 | 第22-23页 |
| ·蛇孢菌素简介 | 第23-33页 |
| ·蛇孢菌素化合物的分布和分类 | 第23-27页 |
| ·蛇孢菌素化合物的性质 | 第27页 |
| ·蛇孢菌素化合物的作用 | 第27-29页 |
| ·蛇孢菌素化合物的作用机制 | 第29-30页 |
| ·蛇孢菌素化合物结构与功能关系 | 第30页 |
| ·蛇孢菌素化合物的应用 | 第30-32页 |
| ·提高蛇孢菌素 A 产量的途径 | 第32-33页 |
| ·蛇孢菌素的生物合成 | 第33-44页 |
| ·萜类前体 IPP 的生物合成 | 第33-40页 |
| ·蛇孢菌素 25 碳前体骨架 GFPP 的生物合成 | 第40-43页 |
| ·蛇孢菌素环化酶催化 GFPP 环化生成 5-8-5 环骨架 | 第43页 |
| ·蛇孢菌素官能化过程中涉及到其它化合物 | 第43-44页 |
| ·研究基础 | 第44-45页 |
| ·研究目的和意义 | 第45-49页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第45-47页 |
| ·研究目的 | 第47页 |
| ·研究意义 | 第47-49页 |
| 第二章 试验材料与方法 | 第49-64页 |
| ·试验材料 | 第49-51页 |
| ·供试菌株 | 第49页 |
| ·培养基 | 第49页 |
| ·主要试剂、溶液及购买的试剂盒 | 第49-50页 |
| ·主要仪器及设备 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-64页 |
| ·菌株活化和培养 | 第51页 |
| ·真菌基因组 DNA 的提取 | 第51页 |
| ·真菌总 RNA 的提取 | 第51-52页 |
| ·蟋蟀草平脐蠕孢菌转录组序列测定 | 第52页 |
| ·反转录总 RNA 为第一链 cDNA | 第52-53页 |
| ·EST 片段验证 | 第53页 |
| ·RACE 扩增中用到的引物 | 第53-54页 |
| ·5 ’RACE 扩增基因 5’末端 | 第54-56页 |
| ·3 ’RACE 扩增目的基因 3’末端 | 第56页 |
| ·目的基因全长 cDNA 的克隆 | 第56-57页 |
| ·PCR 产物电泳目的条带纯化回收 | 第57-58页 |
| ·氯化钙法制备新鲜大肠杆菌感受态细胞 | 第58页 |
| ·回收片段与 pMD 18-T vetor 的连接 | 第58-59页 |
| ·连接产物转化感大肠杆菌感受态细胞 | 第59页 |
| ·质粒小量提取 | 第59页 |
| ·阳性克隆的 PCR 筛选和鉴定 | 第59-60页 |
| ·阳性克隆的限制酶切筛选和鉴定 | 第60-61页 |
| ·目的基因基因组序列的扩增和测序 | 第61页 |
| ·生物信息学分析 | 第61页 |
| ·目的基因在茉莉酸甲酯处理下的表达分析 | 第61-64页 |
| 第三章 蟋蟀草平脐蠕孢菌转录组序列分析 | 第64-68页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·结果和分析 | 第64-66页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第64-65页 |
| ·转录组序列分析结果 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66-68页 |
| 第四章 产蛇孢菌素菌株 HMGR 基因的克隆和特征分析 | 第68-85页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-83页 |
| ·3’RACE 和 5’RACE 克隆 BeHMGR 基因的 3’末端和 5’末端 | 第68-69页 |
| ·Be 菌株 HMGR 基因全长的克隆与特征分析 | 第69-74页 |
| ·Be 菌株 HMGR 基因 ORF 扩增、克隆和检测 | 第74-75页 |
| ·Be 菌株 HMGR 基因 DNA 序列扩增 | 第75页 |
| ·BeHMGR 蛋白的生物信息学分析 | 第75-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-85页 |
| 第五章 产蛇孢菌素菌株 IPPI 基因的克隆和特征分析 | 第85-95页 |
| ·引言 | 第85页 |
| ·结果与分析 | 第85-93页 |
| ·3’RACE 和 5’RACE 克隆 BeIPPI 基因的 3’末端和 5’末端 | 第85-86页 |
| ·Be 菌株 IPPI 基因全长的克隆与特征分析 | 第86-88页 |
| ·Be 菌株 IPPI 基因 ORF 扩增、克隆和检测 | 第88-89页 |
| ·Be 菌株 IPPI 基因 DNA 序列扩增 | 第89页 |
| ·BeIPPI 蛋白的生物信息学分析 | 第89-93页 |
| ·讨论 | 第93-94页 |
| ·小结 | 第94-95页 |
| 第六章 产蛇孢菌素菌株 FPPS 基因的克隆和特征分析 | 第95-106页 |
| ·引言 | 第95页 |
| ·结果与分析 | 第95-104页 |
| ·3’RACE 克隆 BeFPPS 基因的 3’末端 | 第95-96页 |
| ·Be 菌株 FPPS 基因全长的克隆与特征分析 | 第96-98页 |
| ·Be 菌株 FPPS 基因 ORF 扩增、克隆和检测 | 第98-99页 |
| ·Be 菌株 FPPS 基因 DNA 序列扩增 | 第99-100页 |
| ·BeFPPS 蛋白的生物信息学分析 | 第100-104页 |
| ·讨论 | 第104-105页 |
| ·小结 | 第105-106页 |
| 第七章 BE 菌株 GGPPS 基因的克隆和特征分析 | 第106-118页 |
| ·引言 | 第106页 |
| ·结果与分析 | 第106-116页 |
| ·3’RACE 和 5’RACE 方法克隆 BeGGPPS 基因的 3’端和 5’端 | 第106-107页 |
| ·Be 菌株 GGPPS 基因全长的克隆与特征分析 | 第107-109页 |
| ·Be 菌株 GGPPS 基因 ORF 扩增、克隆和检测 | 第109-110页 |
| ·Be 菌株 GGPPS 基因 DNA 序列扩增 | 第110-111页 |
| ·BeGGPPS 蛋白的生物信息学分析 | 第111-116页 |
| ·讨论 | 第116页 |
| ·小结 | 第116-118页 |
| 第八章 茉莉酸甲酯对蛇孢菌素 A 合成相关基因的影响 | 第118-122页 |
| ·前言 | 第118页 |
| ·结果和分析 | 第118-120页 |
| ·茉莉酸甲酯对 BeHMGR 基因表达的影响 | 第118-119页 |
| ·茉莉酸甲酯对 BeIPPI 基因表达的影响 | 第119页 |
| ·茉莉酸甲酯对 BeFPPS 和 BeGGPPS 基因表达的影响 | 第119-120页 |
| ·讨论 | 第120-121页 |
| ·小结 | 第121-122页 |
| 第九章 结论 | 第122-125页 |
| ·研究结论 | 第122-123页 |
| ·主要创新性 | 第123页 |
| ·今后研究方向 | 第123-125页 |
| 参考文献 | 第125-137页 |
| 致谢 | 第137-138页 |
| 作者简历 | 第138页 |
