| 摘要 | 第4-6页 |
| Abslrad | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 土壤微中微生物的多样性和土壤中微生物量 | 第11-13页 |
| 1.1.1 土壤中微生物的多样性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 土壤中微生物量 | 第12-13页 |
| 1.2 土壤中的氮素循环 | 第13页 |
| 1.3 硝化作用与氨氧化微生物 | 第13-15页 |
| 1.3.1 硝化作用 | 第13-14页 |
| 1.3.2 土壤中的氨氧化微生物 | 第14-15页 |
| 1.4 amoA基因在氨氧化细菌及氨氧化古菌中的应用与研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 土壤中微生物的多样性测定方法的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.5.1 生物标志物分析法(Biomarker) | 第16-17页 |
| 1.5.2 Biolog微平板分析法 | 第17页 |
| 1.5.3 现代分子生物学分析法 | 第17-21页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 1.7 技术路线 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-33页 |
| 2.1 试剂、培养基及试剂盒 | 第23页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.3 PCR及测序引物 | 第24页 |
| 2.4 试验设计及试供土壤样品采集 | 第24-25页 |
| 2.5 肖化培养实验 | 第25页 |
| 2.6 土壤PH值测定 | 第25-26页 |
| 2.7 土壤铵态氮的测定 | 第26页 |
| 2.8 土壤硝态氮的测定 | 第26-27页 |
| 2.9 土壤微生物量C、N测定 | 第27-28页 |
| 2.10 土壤氨氧化潜势测定 | 第28页 |
| 2.11 壤中微生物DNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.12 amoA和Arch-amoA基因片段PCR扩增 | 第29-30页 |
| 2.13 PCR扩增产物的回收纯化 | 第30页 |
| 2.14 高效感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| 2.15 克隆文库的构建 | 第31-32页 |
| 2.16 文库多样性分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-43页 |
| 3.1 土壤化学性质测定 | 第33页 |
| 3.2 土壤N_2O释放 | 第33-34页 |
| 3.3 土壤硝化作用 | 第34-36页 |
| 3.4 土壤微生物量C、N分析 | 第36页 |
| 3.5 基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
| 3.6 目的DNA片段的PCR扩增 | 第37-40页 |
| 3.6.1 氨氧化细菌的amoA基因片段PCR扩增 | 第37页 |
| 3.6.2 PCR扩增产物的纯化 | 第37-38页 |
| 3.6.3 PCR产物的T/A克隆及文库的构建 | 第38-40页 |
| 3.7 氨氧化细菌和氨氧化古菌种群多样性分析 | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-48页 |
| 4.1 土壤化学性质测定 | 第43页 |
| 4.2 土壤N_2O的释放 | 第43-44页 |
| 4.3 土壤硝化作用 | 第44页 |
| 4.4 土壤微生物量C、N测定 | 第44页 |
| 4.5 土壤总DNA的提取与纯化 | 第44-45页 |
| 4.6 关于amoA引物的选择 | 第45页 |
| 4.7 关于amoA基因克隆文库的构建 | 第45-46页 |
| 4.8 不同施肥处理对氨氧化细菌和氨氧化古菌多样性影响 | 第46页 |
| 4.9 不同施肥处理对氨氧化细菌和氨氧化古菌种群多样性影响 | 第46-48页 |
| 5 结论与展望 | 第48-51页 |
| 5.1 结论 | 第48-49页 |
| 5.2 研究展望 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
