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集胞藻PCC6803中S2P蛋白酶Slr1821参与铵胁迫响应的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
缩略语表第9-13页
第一章 绪论第13-24页
    1.1 蓝细菌概述第13页
    1.2 集胞藻PCC6803概述第13-15页
    1.3 参与环境胁迫响应的信号接收和传导机制第15-17页
        1.3.1 激酶和调控蛋白组成的二元系统第16页
        1.3.2 RNA聚合酶 σ 因子第16-17页
    1.4 S2P级联调控第17-19页
        1.4.1 S2P级联第17-18页
        1.4.2 S2P蛋白酶第18-19页
    1.5 集胞藻PCC6803中的S2P研究现状第19-20页
    1.6 集胞藻PCC6803对铵同化机理的研究第20-22页
    1.7 本论文研究研究内容以及意义第22-24页
        1.7.1 本论文的研究内容第22页
        1.7.2 本论文的研究意义第22-24页
第二章 Δslr1821突变体的构建第24-43页
    2.1 引言第24页
    2.2 材料与方法第24-26页
        2.2.1 主要材料与试剂第24-25页
        2.2.2 主要仪器与设备第25-26页
    2.3 主要培养基和试剂配制第26-29页
    2.4 实验方法第29-35页
        2.4.1 集胞藻培养第29页
        2.4.2 大肠杆菌DH10B感受态细胞制备第29页
        2.4.3 质粒转化并提取第29-30页
        2.4.4 质粒转化到集胞藻PCC6803中第30页
        2.4.5 集胞藻PCC 6803 基因组DNA提取第30-31页
        2.4.6 目的基因获取第31-32页
        2.4.7 同源双交换质粒的构建方案第32-33页
        2.4.8 集胞藻PCC6803总RNA提取第33页
        2.4.9 去除RNA样品中的DNA第33-34页
        2.4.10 PCR反应体系(Taq酶和Primer star酶)第34页
        2.4.11 RT-PCR第34-35页
        2.4.12 生长曲线测定第35页
    2.5 结果与讨论第35-42页
        2.5.1 目的片段的扩增第35-37页
        2.5.2 同源双交换质粒酶切鉴定第37页
        2.5.3 slr1821基因突变体藻种的筛选第37-38页
        2.5.4 slr1821完全敲除突变体的筛选及鉴定第38-41页
        2.5.5 各突变体的生长曲线第41-42页
    2.6 本章小结第42-43页
第三章 S2P成员Slr1821在多种胁迫下的表型分析第43-67页
    3.1 引言第43-44页
    3.2 材料与方法第44-48页
        3.2.1 实验材料第44页
        3.2.2 实验试剂的配置第44-45页
        3.2.3 实验方法第45-47页
        3.2.4 低温叶绿素荧光值测定第47页
        3.2.5 RT-qPCR引物设计与合成第47-48页
    3.3 结果与讨论第48-65页
        3.3.1 slr1821基因在热胁迫调控中起关键作用第48-53页
        3.3.2 slr1821在铵胁迫调控中起关键作用第53-62页
        3.3.3 Δslr1821突变体在其他胁迫条件下生长情况分析第62-65页
    3.4 本章小结第65-67页
第四章 铵胁迫下转录组测序分析第67-88页
    4.1 引言第67页
    4.2 试剂和仪器第67页
    4.3 实验方法第67-69页
        4.3.1 测序实验流程第67-69页
        4.3.2 信息化分析流程第69页
    4.4 实验结果第69-85页
        4.4.1 实验设计和RNA质量检测第69-71页
        4.4.2 上机测序实验数据统计第71页
        4.4.3 原始测序数据质控第71-72页
        4.4.4 测序数据质量剪切及统计第72-73页
        4.4.5 转录组整体质量评估第73-75页
        4.4.6 基因表达差异分析第75-77页
        4.4.7 第二组 σ 因子参与铵胁迫响应第77-78页
        4.4.8 S2P在铵胁迫下的响应以及互相之间的关系第78页
        4.4.9 Δslr1821突变体藻在铵盐胁迫下蛋白合成受到抑制第78-80页
        4.4.10 slr1821的缺失抑制了光合系统的基因表达第80-81页
        4.4.11 slr1821的缺失下调了碳固定效率第81-82页
        4.4.12 集胞藻PCC6803在铵胁迫下氮的转运和利用第82-85页
    4.5 本章小结第85-88页
结论与展望第88-91页
    1. 结论第88-89页
    2. 创新点第89页
    3. 展望第89-91页
参考文献第91-100页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第100-101页
致谢第101-102页
附件第102页

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