| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 绪论整合素与恶性肿瘤的关系及以其为靶点的RGD肽抗肿瘤研究进展 | 第10-18页 |
| 1.1 肿瘤血管新生与肿瘤微环境 | 第10-13页 |
| 1.1.1 肿瘤血管新生 | 第10-11页 |
| 1.1.2 肿瘤微环境 | 第11-12页 |
| 1.1.3 小结 | 第12-13页 |
| 1.2 整合素与恶性肿瘤 | 第13-15页 |
| 1.3 RGD多肽研究新进展 | 第15-16页 |
| 1.4 总结 | 第16-18页 |
| 2 rLj-RGD3蛋白的纯化及鉴定 | 第18-23页 |
| 2.1 材料 | 第18页 |
| 2.1.1 试剂 | 第18页 |
| 2.1.2 仪器 | 第18页 |
| 2.2 方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 rLj-RGD3蛋白的纯化 | 第18-19页 |
| 2.2.2 rLj-RGD3蛋白的SDS PAGE | 第19-20页 |
| （2）15% SDS PAGE浓缩胶和分离胶的配制 | 第19-20页 |
| 2.2.3 rLj-RGD3蛋白浓度的测定 | 第20页 |
| 2.3 结果 | 第20-21页 |
| 2.3.1 rLj-RGD3的诱导表达与纯化 | 第20-21页 |
| 2.3.2 标准曲线的绘制 | 第21页 |
| 2.4 讨论 | 第21-22页 |
| 2.5 结论 | 第22-23页 |
| 3 rLj-RGD3对Hep2细胞体外生物活性及部分机制的研究 | 第23-49页 |
| 3.1 材料 | 第23页 |
| 3.1.1 试剂 | 第23页 |
| 3.1.2 仪器 | 第23页 |
| 3.2 方法 | 第23-29页 |
| 3.2.1 MTT法检测rLj-RGD3对Hep2细胞存活情况的影响 | 第23-24页 |
| 3.2.2 姬姆萨染色观察rLj-RGD3对Hep2细胞形态的影响 | 第24页 |
| 3.2.3 DNA LADDER检测rLj-RGD3对Hep2细胞凋亡的影响 | 第24页 |
| 3.2.4 流式细胞术检测rLj-RGD3对Hep2细胞凋亡的影响 | 第24-25页 |
| 3.2.5 Hoechst 33258 和TUNEL染色观察rLj-RGD3对Hep2细胞凋亡的影响 | 第25页 |
| 3.2.6 划痕实验检测rLj-RGD3对Hep2细胞迁移能力的影响 | 第25页 |
| 3.2.7 Hoechst 33258 和FITC-鬼笔环肽双染法观察rLj-RGD3对Hep2细胞细胞骨架形态的改变 | 第25-26页 |
| 3.2.8 Transwell迁移实验检测rLj-RGD3对Hep2细胞迁移能力的影响 | 第26-27页 |
| 3.2.9 Transwell侵袭实验检测rLj-RGD3对Hep2细胞侵袭能力的影响 | 第27页 |
| 3.2.10 Western Blot实验rLj-RGD3对Hep2细胞内凋亡相关信号因子表达的影响 | 第27-28页 |
| 3.2.11 数据处理 | 第28-29页 |
| 3.3 结果 | 第29-45页 |
| 3.3.1 rLj-RGD3蛋白对Hep2细胞增殖的抑制作用 | 第29页 |
| 3.3.2 rLj-RGD3蛋白对Hep2细胞形态的改变 | 第29-30页 |
| 3.3.3 rLj-RGD3蛋白对Hep2细胞凋亡的促进作用 | 第30-34页 |
| 3.3.4 rLj-RGD3蛋白对Hep2细胞骨架形态的改变 | 第34-35页 |
| 3.3.5 rLj-RGD3蛋白对Hep2细胞迁移能力的抑制作用 | 第35-38页 |
| 3.3.6 rLj-RGD3蛋白对Hep2细胞侵袭能力的抑制作用 | 第38-39页 |
| 3.3.7 rLj-RGD3蛋白对Hep2细胞凋亡通路信号分子的影响 | 第39-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-48页 |
| 3.5 结论 | 第48-49页 |
| 4 rLj-RGD3对Hep2细胞移植瘤裸鼠体内抗肿瘤活性的研究 | 第49-57页 |
| 4.1 材料 | 第49页 |
| 4.1.1 试剂 | 第49页 |
| 4.1.2 实验动物 | 第49页 |
| 4.2 方法 | 第49-51页 |
| 4.2.1 Hep2移植瘤裸鼠模型的建立 | 第49页 |
| 4.2.2 rLj-RGD3对Hep2移植瘤生长的影响 | 第49-50页 |
| 4.2.3 石蜡切片与肿瘤组织的HE染色 | 第50页 |
| 4.2.4 数据处理 | 第50-51页 |
| 4.3 结果 | 第51-55页 |
| 4.3.1 rLj-RGD3对Hep2移植瘤裸鼠体重的影响 | 第51页 |
| 4.3.2 rLj-RGD3对Hep2移植瘤裸鼠肿瘤体积增长的影响 | 第51-52页 |
| 4.3.3 rLj-RGD3对Hep2移植瘤裸鼠瘤体积和瘤重的抑制作用 | 第52-54页 |
| 4.3.4 rLj-RGD3对Hep2移植瘤裸鼠肿瘤切片的HE染色 | 第54-55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-56页 |
| 4.5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
