| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 缩写词(Abbreviation) | 第13-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 1. 综述 | 第15-24页 |
| 1.1 植物转基因的研究进展 | 第15-20页 |
| 1.1.1 农杆菌介导技术在育种上的应用 | 第16-18页 |
| 1.1.1.1 根癌农杆菌的研究历史 | 第16页 |
| 1.1.1.2 农杆菌介导技术的原理 | 第16-17页 |
| 1.1.1.3 影响农杆菌介导转化的因素 | 第17-18页 |
| 1.1.1.3.1 外源基因供体的影响 | 第17页 |
| 1.1.1.3.2 转基因受体的影响 | 第17-18页 |
| 1.1.2 基因枪导入技术 | 第18-19页 |
| 1.1.2.1 基因枪导入技术研究历史 | 第18页 |
| 1.1.2.2 基因枪导入技术转化率及其影响因素 | 第18-19页 |
| 1.1.2.2.1 金属微粒对转化率的影响 | 第18-19页 |
| 1.1.2.2.2 DNA 沉淀辅助剂对转化率的影响 | 第19页 |
| 1.1.2.2.3 DNA 的浓度及浓度对转化率的影响 | 第19页 |
| 1.1.2.2.4 微弹速度对转化率的影响 | 第19页 |
| 1.1.3 其他转基因技术 | 第19-20页 |
| 1.2 植物光合作用研究进展 | 第20-22页 |
| 1.2.1 植物的光合途径 | 第20-21页 |
| 1.2.2 高光效育种研究 | 第21-22页 |
| 1.3 遗传转化与安全性 | 第22页 |
| 1.4 研究目标与研究思路 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-36页 |
| 2.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.1 质粒 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 工具酶及试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 植物材料 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-36页 |
| 2.2.1 大肠杆菌DH5α和农杆菌EHA105 的质粒转化 | 第24-26页 |
| 2.2.1.1 大肠杆菌DH5α质粒转化 | 第24-25页 |
| 2.2.1.2 表达载体质粒冻融法转化农杆菌 | 第25-26页 |
| 2.2.2 农杆菌介导的水稻转化 | 第26-28页 |
| 2.2.2.1 培养基 | 第26页 |
| 2.2.2.2 水稻成熟胚愈伤组织的诱导、继代 | 第26-27页 |
| 2.2.2.3 农杆菌转化水稻 | 第27页 |
| 2.2.2.4 抗性愈伤的继代与再生成完整植株 | 第27-28页 |
| 2.2.3 转基因植株的鉴定 | 第28-35页 |
| 2.2.3.1 PCR 检测 | 第28-30页 |
| 2.2.3.1.1 CTAB 提取法提取水稻基因组DNA | 第28页 |
| 2.2.3.1.2 标记基因Hyg 的PCR 检测 | 第28-29页 |
| 2.2.3.1.3 目的基因pepc 的PCR 检测 | 第29-30页 |
| 2.2.3.2 southern bolt 检测 | 第30-35页 |
| 2.2.3.2.1 Southern 杂交用试剂 | 第30-31页 |
| 2.2.3.2.2 Southern 杂交步骤 | 第31-35页 |
| 2.2.4 转基因后代的筛选 | 第35-36页 |
| 2.2.4.1 确定非转基因水稻的抗生素致死浓度 | 第35页 |
| 2.2.4.2 抗生素致死浓度下筛选可能的转基因水稻种子 | 第35-36页 |
| 2.2.4.2.1 种子消毒 | 第35页 |
| 2.2.4.2.2 培养液和抗生素的配置 | 第35页 |
| 2.2.4.2.3 转基因后代的筛选 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-42页 |
| 3.1 甘蔗pepc 基因转导水稻航I 号 | 第36-37页 |
| 3.1.1 水稻抗性愈伤的筛选分化 | 第36页 |
| 3.1.2 转基因植株的PCR检测 | 第36-37页 |
| 3.2 转甘蔗pepc 基因籼稻恢复系N175T_1 代转基因材料的遗传学分析 | 第37-42页 |
| 3.2.1 确定水稻不同品种Hyg 致死浓度 | 第37-38页 |
| 3.2.2 在40mg/LHyg浓度下筛选N175可能的转基因T1代种子 | 第38-39页 |
| 3.2.3 N175T_1 代转基因株系的PCR 及Southern blot 检测 | 第39-40页 |
| 3.2.3.1 N175T_1 代转基因株系的PCR 检测 | 第39页 |
| 3.2.3.2 Southern blot 检测 | 第39-40页 |
| 3.2.4 转基因水稻株系的光合速率测定 | 第40-42页 |
| 4 讨论 | 第42-46页 |
| 4.1 航1 号愈伤组织诱导过程中的影响因素 | 第42-43页 |
| 4.2 农杆菌侵染与抗性植株的再生 | 第43页 |
| 4.3 甘蔗pepc 基因在水稻中的表达 | 第43-44页 |
| 4.4 工作的延续性 | 第44-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
