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电离辐射诱导人乳腺癌MCF-7细胞自噬及其与凋亡关系的研究

内容提要第5-6页
中文摘要第6-11页
Abstract第11-16页
第1章 绪论第22-42页
    1.1 电离辐射第22-26页
        1.1.1 电离辐射的概念和作用类型第22-23页
        1.1.2 电离辐射引起DNA损伤与修复第23页
        1.1.3 细胞的放射敏感性第23-24页
        1.1.4 电离辐射对细胞周期进程的影响第24页
        1.1.5 电离辐射诱导细胞死亡的形式第24-25页
        1.1.6 辐射诱导的细胞突变及恶性转化第25页
        1.1.7 放射治疗第25-26页
    1.2 细胞凋亡及分子调控机制第26-33页
        1.2.1 细胞凋亡的概念第26页
        1.2.2 细胞凋亡的基本特征第26-28页
        1.2.3 细胞凋亡的检测方法第28页
        1.2.4 细胞凋亡的信号传导通路第28-30页
        1.2.5 细胞凋亡的基因调控第30-32页
        1.2.6 细胞凋亡与肿瘤辐射敏感性第32-33页
    1.3 细胞自噬及分子调控机制第33-39页
        1.3.1 自噬的概述第33页
        1.3.2 自噬的分类第33-34页
        1.3.3 自噬的主要作用第34页
        1.3.4 自噬的发生过程第34-35页
        1.3.5 自噬体的检测第35-36页
        1.3.6 真核细胞中自噬的分子调控第36-39页
    1.4 自噬和凋亡在肿瘤中的作用第39-41页
        1.4.1 参与调控自噬和凋亡的癌基因和抑癌基因第39-40页
        1.4.2 自噬在肿瘤中的作用第40-41页
    1.5 自噬与凋亡的关系第41-42页
        1.5.1 自噬与凋亡对细胞的影响第41页
        1.5.2 参与自噬和凋亡的重要分子第41页
        1.5.3 自噬与凋亡的联系第41-42页
第2章 材料与方法第42-60页
    2.1 试剂与器材第42-45页
        2.1.1 主要试剂第42-44页
        2.1.2 主要仪器第44页
        2.1.3 器材第44-45页
    2.2 细胞生物学实验方法第45-47页
        2.2.1 细胞的培养第45页
        2.2.2 细胞培养试剂的配制第45页
        2.2.3 细胞的冻存及复苏第45-46页
        2.2.4 细胞增殖检测第46页
        2.2.5 PI单染法检测细胞周期第46页
        2.2.6 Annexin V-EGFP/PI双染法检测细胞凋亡第46页
        2.2.7 MDC荧光染色检测自噬第46-47页
        2.2.8 电离辐射诱导MCF-7细胞凋亡的检测第47页
    2.3 分子生物学实验方法第47-59页
        2.3.1 细菌培养技术第47-49页
        2.3.2 beclin-1过表达载体的构建第49-52页
        2.3.3 beclin-1过表达细胞模型的建立第52页
        2.3.4 beclin-1基因干扰细胞模型的建立第52-53页
        2.3.5 Akt1基因过表达和干扰细胞模型的建立第53页
        2.3.6 Real time PCR检测基因mRNA水平表达第53-54页
        2.3.7 Western blot检测MCF-7细胞蛋白表达第54-59页
    2.4 统计学处理第59-60页
第3章 实验结果第60-92页
    3.1 电离辐射诱导MCF-7细胞自噬与凋亡的检测第60-61页
        3.1.1 MDC染色检测MCF-7细胞自噬第60页
        3.1.2 DNA ladder检测MCF-7细胞凋亡第60-61页
    3.2 自噬/凋亡诱导剂或抑制剂对MCF-7细胞自噬与凋亡的影响第61-71页
        3.2.1 不同剂量X射线照射MCF-7细胞对细胞增殖的影响第61-62页
        3.2.2 4Gy照射联合自噬诱导剂及自噬和凋亡抑制剂对MCF-7细胞增殖的作用第62-63页
        3.2.3 4Gy照射联合自噬诱导剂及自噬和凋亡抑制剂对MCF-7细胞凋亡的作用第63页
        3.2.4 电离辐射联合自噬和凋亡诱导剂、抑制剂对MCF-7细胞基因水平表达的影响第63-71页
    3.3 BECLIN-1基因在电离辐射诱导MCF-7细胞自噬与凋亡中的作用第71-81页
        3.3.1 beclin-1基因过表达与干扰模型的构建及鉴定第71-75页
        3.3.2 4Gy照射对MCF-7细胞beclin-1基因过表达和干扰的生物效应的影响第75-80页
        3.3.3 4Gy照射后beclin-1和p53蛋白表达的时程变化第80-81页
    3.4 AKT1基因在电离辐射诱导MCF-7细胞自噬与凋亡中的作用第81-92页
        3.4.1 MCF-7细胞中Akt1基因过表达与干扰细胞模型的建立第81-82页
        3.4.2 4Gy照射对MCF-7细胞Akt1基因过表达和干扰的生物效应影响第82-86页
        3.4.3 4Gy照射MCF-7、MCF-7-Akt1和MCF-7-Akt1Ri细胞后自噬和凋亡基因水平的表达第86-92页
第4章 讨论第92-104页
    4.1 离辐射诱导肿瘤细胞自噬与凋亡第92-94页
        4.1.1 离辐射诱导肿瘤细胞自噬第92页
        4.1.2 电离辐射诱导肿瘤细胞凋亡第92-94页
    4.2 电离辐射联合自噬/凋亡诱导剂或抑制剂对MCF-7细胞自噬与凋亡的影响第94-98页
        4.2.1 X射线照射联合自噬诱导剂及自噬和凋亡抑制剂对MCF-7细胞增殖的作用第94页
        4.2.2 4Gy照射联合自噬诱导剂及自噬和凋亡抑制剂对MCF-7细胞凋亡的作用第94-95页
        4.2.3 电离辐射联合自噬和凋亡诱导剂、抑制剂对MCF-7细胞基因水平表达的影响第95-98页
    4.3 BECLIN-1基因的作用第98-100页
        4.3.1 beclin-1基因过表达与干扰模型的构建及鉴定第98页
        4.3.2 4Gy照射对MCF-7细胞beclin-1基因过表达和干扰的生物效应的影响第98-99页
        4.3.3 4Gy照射人乳腺癌细胞beclin-1和p53蛋白表达的变化第99-100页
    4.4 AKT1基因的作用第100-104页
        4.4.1 MCF-7细胞中Akt1基因过表达与干扰细胞模型的建立第101页
        4.4.2 4Gy照射对MCF-7细胞Akt1基因过表达和干扰的生物效应影响第101页
        4.4.3 4Gy照射MCF-7、MCF-7-Akt1和MCF-7-Akt1Ri细胞后自噬和凋亡基因的表达第101-104页
第5章 结论第104-106页
参考文献第106-116页
个人简历第116-118页
    教育背景第116页
    发表论著第116-118页
致谢第118页

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