内容提要 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-11页 |
Abstract | 第11-16页 |
第1章 绪论 | 第22-42页 |
1.1 电离辐射 | 第22-26页 |
1.1.1 电离辐射的概念和作用类型 | 第22-23页 |
1.1.2 电离辐射引起DNA损伤与修复 | 第23页 |
1.1.3 细胞的放射敏感性 | 第23-24页 |
1.1.4 电离辐射对细胞周期进程的影响 | 第24页 |
1.1.5 电离辐射诱导细胞死亡的形式 | 第24-25页 |
1.1.6 辐射诱导的细胞突变及恶性转化 | 第25页 |
1.1.7 放射治疗 | 第25-26页 |
1.2 细胞凋亡及分子调控机制 | 第26-33页 |
1.2.1 细胞凋亡的概念 | 第26页 |
1.2.2 细胞凋亡的基本特征 | 第26-28页 |
1.2.3 细胞凋亡的检测方法 | 第28页 |
1.2.4 细胞凋亡的信号传导通路 | 第28-30页 |
1.2.5 细胞凋亡的基因调控 | 第30-32页 |
1.2.6 细胞凋亡与肿瘤辐射敏感性 | 第32-33页 |
1.3 细胞自噬及分子调控机制 | 第33-39页 |
1.3.1 自噬的概述 | 第33页 |
1.3.2 自噬的分类 | 第33-34页 |
1.3.3 自噬的主要作用 | 第34页 |
1.3.4 自噬的发生过程 | 第34-35页 |
1.3.5 自噬体的检测 | 第35-36页 |
1.3.6 真核细胞中自噬的分子调控 | 第36-39页 |
1.4 自噬和凋亡在肿瘤中的作用 | 第39-41页 |
1.4.1 参与调控自噬和凋亡的癌基因和抑癌基因 | 第39-40页 |
1.4.2 自噬在肿瘤中的作用 | 第40-41页 |
1.5 自噬与凋亡的关系 | 第41-42页 |
1.5.1 自噬与凋亡对细胞的影响 | 第41页 |
1.5.2 参与自噬和凋亡的重要分子 | 第41页 |
1.5.3 自噬与凋亡的联系 | 第41-42页 |
第2章 材料与方法 | 第42-60页 |
2.1 试剂与器材 | 第42-45页 |
2.1.1 主要试剂 | 第42-44页 |
2.1.2 主要仪器 | 第44页 |
2.1.3 器材 | 第44-45页 |
2.2 细胞生物学实验方法 | 第45-47页 |
2.2.1 细胞的培养 | 第45页 |
2.2.2 细胞培养试剂的配制 | 第45页 |
2.2.3 细胞的冻存及复苏 | 第45-46页 |
2.2.4 细胞增殖检测 | 第46页 |
2.2.5 PI单染法检测细胞周期 | 第46页 |
2.2.6 Annexin V-EGFP/PI双染法检测细胞凋亡 | 第46页 |
2.2.7 MDC荧光染色检测自噬 | 第46-47页 |
2.2.8 电离辐射诱导MCF-7细胞凋亡的检测 | 第47页 |
2.3 分子生物学实验方法 | 第47-59页 |
2.3.1 细菌培养技术 | 第47-49页 |
2.3.2 beclin-1过表达载体的构建 | 第49-52页 |
2.3.3 beclin-1过表达细胞模型的建立 | 第52页 |
2.3.4 beclin-1基因干扰细胞模型的建立 | 第52-53页 |
2.3.5 Akt1基因过表达和干扰细胞模型的建立 | 第53页 |
2.3.6 Real time PCR检测基因mRNA水平表达 | 第53-54页 |
2.3.7 Western blot检测MCF-7细胞蛋白表达 | 第54-59页 |
2.4 统计学处理 | 第59-60页 |
第3章 实验结果 | 第60-92页 |
3.1 电离辐射诱导MCF-7细胞自噬与凋亡的检测 | 第60-61页 |
3.1.1 MDC染色检测MCF-7细胞自噬 | 第60页 |
3.1.2 DNA ladder检测MCF-7细胞凋亡 | 第60-61页 |
3.2 自噬/凋亡诱导剂或抑制剂对MCF-7细胞自噬与凋亡的影响 | 第61-71页 |
3.2.1 不同剂量X射线照射MCF-7细胞对细胞增殖的影响 | 第61-62页 |
3.2.2 4Gy照射联合自噬诱导剂及自噬和凋亡抑制剂对MCF-7细胞增殖的作用 | 第62-63页 |
3.2.3 4Gy照射联合自噬诱导剂及自噬和凋亡抑制剂对MCF-7细胞凋亡的作用 | 第63页 |
3.2.4 电离辐射联合自噬和凋亡诱导剂、抑制剂对MCF-7细胞基因水平表达的影响 | 第63-71页 |
3.3 BECLIN-1基因在电离辐射诱导MCF-7细胞自噬与凋亡中的作用 | 第71-81页 |
3.3.1 beclin-1基因过表达与干扰模型的构建及鉴定 | 第71-75页 |
3.3.2 4Gy照射对MCF-7细胞beclin-1基因过表达和干扰的生物效应的影响 | 第75-80页 |
3.3.3 4Gy照射后beclin-1和p53蛋白表达的时程变化 | 第80-81页 |
3.4 AKT1基因在电离辐射诱导MCF-7细胞自噬与凋亡中的作用 | 第81-92页 |
3.4.1 MCF-7细胞中Akt1基因过表达与干扰细胞模型的建立 | 第81-82页 |
3.4.2 4Gy照射对MCF-7细胞Akt1基因过表达和干扰的生物效应影响 | 第82-86页 |
3.4.3 4Gy照射MCF-7、MCF-7-Akt1和MCF-7-Akt1Ri细胞后自噬和凋亡基因水平的表达 | 第86-92页 |
第4章 讨论 | 第92-104页 |
4.1 离辐射诱导肿瘤细胞自噬与凋亡 | 第92-94页 |
4.1.1 离辐射诱导肿瘤细胞自噬 | 第92页 |
4.1.2 电离辐射诱导肿瘤细胞凋亡 | 第92-94页 |
4.2 电离辐射联合自噬/凋亡诱导剂或抑制剂对MCF-7细胞自噬与凋亡的影响 | 第94-98页 |
4.2.1 X射线照射联合自噬诱导剂及自噬和凋亡抑制剂对MCF-7细胞增殖的作用 | 第94页 |
4.2.2 4Gy照射联合自噬诱导剂及自噬和凋亡抑制剂对MCF-7细胞凋亡的作用 | 第94-95页 |
4.2.3 电离辐射联合自噬和凋亡诱导剂、抑制剂对MCF-7细胞基因水平表达的影响 | 第95-98页 |
4.3 BECLIN-1基因的作用 | 第98-100页 |
4.3.1 beclin-1基因过表达与干扰模型的构建及鉴定 | 第98页 |
4.3.2 4Gy照射对MCF-7细胞beclin-1基因过表达和干扰的生物效应的影响 | 第98-99页 |
4.3.3 4Gy照射人乳腺癌细胞beclin-1和p53蛋白表达的变化 | 第99-100页 |
4.4 AKT1基因的作用 | 第100-104页 |
4.4.1 MCF-7细胞中Akt1基因过表达与干扰细胞模型的建立 | 第101页 |
4.4.2 4Gy照射对MCF-7细胞Akt1基因过表达和干扰的生物效应影响 | 第101页 |
4.4.3 4Gy照射MCF-7、MCF-7-Akt1和MCF-7-Akt1Ri细胞后自噬和凋亡基因的表达 | 第101-104页 |
第5章 结论 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-116页 |
个人简历 | 第116-118页 |
教育背景 | 第116页 |
发表论著 | 第116-118页 |
致谢 | 第118页 |