| 作者简介 | 第6-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 前言 | 第18-33页 |
| §1.1 非洲黄爪蝎介绍 | 第18-20页 |
| 1.1.1 蝎子的种类 | 第18页 |
| 1.1.2 分类地位与形态学特征 | 第18页 |
| 1.1.3 分布与生境 | 第18-20页 |
| §1.2 蝎毒素的研究进展 | 第20-24页 |
| 1.2.1 蝎毒素的特征与分类 | 第20页 |
| 1.2.2 蝎含二硫键多肽 | 第20-22页 |
| 1.2.3 蝎无二硫键多肽 | 第22-24页 |
| §1.3 蝎无二硫键多肽 | 第24-30页 |
| 1.3.1 蝎无二硫键多肽的特征与分类 | 第24-27页 |
| 1.3.2 蝎无二硫键多肽的抗菌活性和溶血性 | 第27-29页 |
| 1.3.3 蝎无二硫键多肽的缓激肽增强活性 | 第29-30页 |
| 1.3.4 蝎无二硫键多肽的免疫调节活性 | 第30页 |
| 1.3.5 蝎无二硫键多肽的其他生物活性 | 第30页 |
| §1.4 抗菌肽结构与功能关系 | 第30-32页 |
| 1.4.1 肽链长度的影响 | 第30-31页 |
| 1.4.2 电荷的影响 | 第31页 |
| 1.4.3 疏水性的影响 | 第31页 |
| 1.4.4 两亲性的影响 | 第31页 |
| 1.4.5 α-螺旋结构的影响 | 第31-32页 |
| §1.5 本课题研究目的及意义 | 第32-33页 |
| 第二章 非洲黄爪蝎(Opistophthalmus glabrifrons)转录组学研究 | 第33-45页 |
| §2.1 引言 | 第33-34页 |
| §2.2 材料和方法 | 第34-36页 |
| 2.2.1 材料及主要试剂 | 第34页 |
| 2.2.2 非洲黄爪蝎毒腺组织总RNA提取 | 第34页 |
| 2.2.3 mRNA分离纯化 | 第34-35页 |
| 2.2.4 cDNA第一链合成 | 第35页 |
| 2.2.5 cDNA第二链合成 | 第35-36页 |
| 2.2.6 连接与转化 | 第36页 |
| 2.2.7 PCR策略筛选cDNA文库 | 第36页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第36页 |
| §2.3 实验结果 | 第36-44页 |
| 2.3.1 cDNA文库的初步筛选 | 第36-37页 |
| 2.3.2 非洲黄爪蝎毒腺转录本概况 | 第37-38页 |
| 2.3.3 非洲黄爪蝎转录组蛋白和多肽序列的数据库匹配分析 | 第38-39页 |
| 2.3.4 蝎短链钾离子通道毒素 | 第39-41页 |
| 2.3.5 蝎长链钾离子通道毒素 | 第41页 |
| 2.3.6 蝎阴离子肽 | 第41-42页 |
| 2.3.7 蝎抗菌肽 | 第42-44页 |
| §2.4 小结 | 第44-45页 |
| 第三章 一种抗耐药菌蝎毒素多肽Opisin的生物信息学分析与活性鉴定 | 第45-58页 |
| §3.1 引言 | 第45-46页 |
| §3.2 材料与仪器 | 第46-47页 |
| 3.2.1 试剂配制 | 第46页 |
| 3.2.2 实验菌株 | 第46页 |
| 3.2.3 分析工具 | 第46-47页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第47页 |
| §3.3 实验方法 | 第47-49页 |
| 3.3.1 非洲黄爪蝎cDNA文库的构建 | 第47页 |
| 3.3.2 cDNA文库的初步筛选 | 第47页 |
| 3.3.3 生物信息学分析 | 第47-48页 |
| 3.3.4 多肽合成 | 第48页 |
| 3.3.5 抗菌活性实验 | 第48页 |
| 3.3.6 溶血活性实验 | 第48-49页 |
| 3.3.7 杀菌实验 | 第49页 |
| 3.3.8 肽与DNA的结合实验 | 第49页 |
| §3.4 实验结果 | 第49-57页 |
| 3.4.1 非洲黄爪蝎新无二硫键多肽 | 第49-51页 |
| 3.4.2 Opisin理化特性分析 | 第51-52页 |
| 3.4.3 Opisin固相合成 | 第52-53页 |
| 3.4.4 Opisin抗菌活性检测 | 第53-55页 |
| 3.4.5 Opisin溶血活性检测 | 第55-56页 |
| 3.4.6 Opisin杀菌活性检测 | 第56-57页 |
| 3.4.7 Opisin与DNA结合分析 | 第57页 |
| §3.5 小结 | 第57-58页 |
| 第四章 非洲黄爪蝎(Opistophthalmus glabrifrons)抗菌肽结构与功能关系研究 | 第58-79页 |
| §4.1 引言 | 第58-59页 |
| §4.2 实验材料 | 第59页 |
| 4.2.1 试剂配制 | 第59页 |
| 4.2.2 实验菌株 | 第59页 |
| 4.2.3 分析工具 | 第59页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第59页 |
| §4.3 实验方法 | 第59-62页 |
| 4.3.1 Opisin衍生肽的设计 | 第59-60页 |
| 4.3.2 肽的理化特性分析 | 第60页 |
| 4.3.3 肽两亲性分析 | 第60页 |
| 4.3.4 肽二级结构预测 | 第60页 |
| 4.3.5 多肽合成 | 第60-61页 |
| 4.3.6 多肽鉴定 | 第61页 |
| 4.3.7 多肽分离纯化 | 第61页 |
| 4.3.8 抗菌活性检测 | 第61页 |
| 4.3.9 溶血性检测 | 第61-62页 |
| §4.4 实验结果 | 第62-77页 |
| 4.4.1 Opisin及其衍生肽的序列 | 第62页 |
| 4.4.2 肽的理化特性 | 第62页 |
| 4.4.3 肽的两亲性螺旋轮 | 第62-64页 |
| 4.4.4 肽的二级结构预测 | 第64页 |
| 4.4.5 抗菌肽的合成 | 第64-66页 |
| 4.4.6 抗菌肽的鉴定 | 第66-68页 |
| 4.4.7 抗菌肽的分离纯化 | 第68页 |
| 4.4.8 抗菌肽的疏水性 | 第68-70页 |
| 4.4.9 疏水面对Opisin的抗菌活性和溶血性的影响 | 第70-73页 |
| 4.4.10 疏水性对Opisin的抗菌活性和溶血性的影响 | 第73-75页 |
| 4.4.11 电荷数对Opisin的抗菌活性和溶血性的影响 | 第75-77页 |
| §4.5 小结 | 第77-79页 |
| 第五章 蝎活性抗菌肽CeAP1功能鉴定及蝎源短链阳离子抗菌肽适应性进化分析 | 第79-98页 |
| §5.1 引言 | 第79-80页 |
| §5.2 实验材料 | 第80-81页 |
| 5.2.1 实验菌株 | 第80页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第80页 |
| 5.2.3 在线服务器网址及软件 | 第80-81页 |
| §5.3 实验方法 | 第81-82页 |
| 5.3.1 CeAP1序列获取及序列特征分析 | 第81页 |
| 5.3.2 CeAP1多肽合成及纯化 | 第81页 |
| 5.3.3 CeAP1抗菌活性鉴定 | 第81页 |
| 5.3.4 CeAP1溶血活性检测 | 第81页 |
| 5.3.5 CeAP1及同源多肽进化分析 | 第81-82页 |
| 5.3.6 蝎源短链阳离子抗菌肽选择压力分析 | 第82页 |
| §5.4 实验结果 | 第82-97页 |
| 5.4.1 CeAP1前体序列特征分析 | 第82页 |
| 5.4.2 CeAP1二级结构预测及理化性质分析 | 第82-83页 |
| 5.4.3 CeAP1合成及纯度鉴定 | 第83-85页 |
| 5.4.4 CeAP1抗菌活性鉴定 | 第85-86页 |
| 5.4.5 CeAP1对红细胞溶血活性鉴定 | 第86页 |
| 5.4.6 蝎源短链阳离子抗菌肽序列特征 | 第86-87页 |
| 5.4.7 蝎源短链阳离子抗菌肽进化树分析 | 第87-89页 |
| 5.4.8 蝎源短链抗菌肽选择压力分析 | 第89-97页 |
| §5.5 小结 | 第97-98页 |
| 主要结论与展望 | 第98-101页 |
| 论文主要结论 | 第98-99页 |
| 展望 | 第99-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-111页 |
