| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-15页 |
| 第一章 乳腺癌耐阿霉素相关miRNAs的筛选与鉴定 | 第15-34页 |
| 1.1 前言 | 第15页 |
| 1.2 实验材料 | 第15页 |
| 1.2.1 标本收集 | 第15页 |
| 1.2.2 主要试剂及仪器 | 第15页 |
| 1.3 实验方法 | 第15-23页 |
| 1.3.1 细胞培养 | 第15-17页 |
| 1.3.2 加阿霉素处理观察MCF-7 与MCF-7/ADR细胞形态的变化 | 第17-18页 |
| 1.3.3 WST-1 法检测MCF-7 与MCF-7/Adr细胞对阿霉素的耐药性 | 第18-19页 |
| 1.3.4 流式细胞术测细胞周期和凋亡 | 第19-21页 |
| 1.3.5 细胞总RNA的提取与鉴定 | 第21-22页 |
| 1.3.6 琼脂糖凝胶电泳检测RNA的质量 | 第22页 |
| 1.3.7 高通量测序筛选差异表达的miRNAs | 第22-23页 |
| 1.3.8 Real-time RT-PCR对测序分析中部分差异表达的miRNAs的表达水平验证 | 第23页 |
| 1.4 数据分析 | 第23-24页 |
| 1.5 结果 | 第24-32页 |
| 1.5.1 加药处理后细胞形态 | 第24页 |
| 1.5.2 WST-1 细胞增殖实验结果 | 第24-26页 |
| 1.5.3 流式细胞术测细胞凋亡和周期结果 | 第26-27页 |
| 1.5.4 高通量测序筛选差异表达的miRNAs结果 | 第27-32页 |
| 1.5.5 Real-time PT-PCR验证结果 | 第32页 |
| 1.6 讨论 | 第32-34页 |
| 第二章 miR-375、miR-217 在乳腺癌耐药细胞系中的功能研究 | 第34-61页 |
| 2.1 前言 | 第34页 |
| 2.2 实验材料 | 第34-35页 |
| 2.2.1 乳腺癌细胞 | 第34页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第34-35页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第35页 |
| 2.3 实验方法 | 第35-48页 |
| 2.3.1 细胞转染 | 第35-40页 |
| 2.3.2 采用流式细胞术检测细胞周期和凋亡 | 第40-43页 |
| 2.3.3 transwell迁移实验 | 第43-45页 |
| 2.3.4 transwell侵袭实验 | 第45-47页 |
| 2.3.5 细胞划痕实验 | 第47-48页 |
| 2.3.6 实验数据分析 | 第48页 |
| 2.4 结果 | 第48-59页 |
| 2.4.1 WST-1 细胞增殖实验结果 | 第48-50页 |
| 2.4.2 转染miRNA对MCF-7/Adr细胞周期和凋亡的影响 | 第50-52页 |
| 2.4.3 transwell迁移实验结果 | 第52-54页 |
| 2.4.4 transwell侵袭实验结果 | 第54-56页 |
| 2.4.5 划痕实验结果 | 第56-59页 |
| 2.5 讨论 | 第59-61页 |
| 全文总结 | 第61-62页 |
| 实验研究的创新点 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 缩写词及中英文对照表 | 第71-72页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
