| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-18页 |
| 引言 | 第12页 |
| 1.1 六价铬概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 Cr (Ⅵ)的毒性危害 | 第12-13页 |
| 1.1.2 Cr (Ⅵ)与皮肤毒性 | 第13页 |
| 1.2 叶酸概述 | 第13-14页 |
| 1.3 Cr(Ⅵ)与表观遗传、一碳单位的关系 | 第14-15页 |
| 1.4 DNA错配修复系统简介 | 第15-16页 |
| 1.5 HaCaT细胞的特点 | 第16页 |
| 1.6 研究意义 | 第16-17页 |
| 1.7 研究内容 | 第17-18页 |
| 1.7.1 HaCaT细胞活力检测 | 第17页 |
| 1.7.2 HaCaT细胞全基因组DNA甲基化测定 | 第17页 |
| 1.7.3 HaCaT细胞DNA损伤检测 | 第17页 |
| 1.7.4 HaCaT细胞hMLH1基因及其蛋白表达检测 | 第17-18页 |
| 第二章 HaCaT细胞培养及增殖活力测定 | 第18-26页 |
| 2.1 前言 | 第18页 |
| 2.2 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-20页 |
| 2.3.1 HaCaT细胞的培养条件与传代方法 | 第19页 |
| 2.3.2 细胞冻存方法与复苏步骤 | 第19-20页 |
| 2.3.3 MTT法测细胞活力 | 第20页 |
| 2.3.4 数据统计分析 | 第20页 |
| 2.4 结果 | 第20-24页 |
| 2.4.1 方差分析检验组间吸光度差异 | 第20-21页 |
| 2.4.2 Cr(Ⅵ)剂量与吸光度相关分析 | 第21-24页 |
| 2.5 讨论 | 第24-25页 |
| 2.6 本章小结 | 第25-26页 |
| 第三章 Cr(Ⅵ)致HaCaT细胞DNA损伤及叶酸的保护作用 | 第26-36页 |
| 3.1 前言 | 第26页 |
| 3.2 实验材料 | 第26-27页 |
| 3.2.1 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第27页 |
| 3.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 3.3.1 溶液的配制 | 第27页 |
| 3.3.2 琼脂糖载玻片制备 | 第27-28页 |
| 3.3.3 细胞裂解、碱化与电泳 | 第28页 |
| 3.3.4 中和、染色 | 第28页 |
| 3.3.5 彗星图片观察和结果统计分析 | 第28-29页 |
| 3.4 结果 | 第29-33页 |
| 3.4.1 镜下图像观察 | 第29-31页 |
| 3.4.2 非参数检验各组间DNA损伤水平 | 第31-33页 |
| 3.4.3 剂量与DNA损伤水平相关分析 | 第33页 |
| 3.5 讨论 | 第33-35页 |
| 3.6 本章小结 | 第35-36页 |
| 第四章 Cr(Ⅵ)对细胞DNA甲基化水平的影响及叶酸的干预作用 | 第36-45页 |
| 4.1 前言 | 第36-37页 |
| 4.2 实验材料 | 第37-38页 |
| 4.2.1 主要仪器设备 | 第37页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 4.3 实验方法 | 第38-39页 |
| 4.3.1 制HaCaT细胞爬片 | 第38页 |
| 4.3.2 HaCaT细胞染毒与叶酸预处理 | 第38页 |
| 4.3.3 HaCaT细胞爬片的处理 | 第38页 |
| 4.3.4 细胞爬片的观察与结果统计分析 | 第38-39页 |
| 4.4 结果 | 第39-42页 |
| 4.4.1 镜下细胞爬片观察 | 第39-40页 |
| 4.4.2 方差分析检验组间光密度差异 | 第40-42页 |
| 4.4.3 剂量与平均光密度相关分析 | 第42页 |
| 4.5 讨论 | 第42-44页 |
| 4.6 本章小结 | 第44-45页 |
| 第五章 Cr(Ⅵ)对细胞hMLH1基因及蛋白表达的影响及叶酸的干预作用 | 第45-58页 |
| 5.1 前言 | 第45页 |
| 5.2 实验材料 | 第45-46页 |
| 5.2.1 主要仪器设备 | 第45-46页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第46页 |
| 5.3 实验方法 | 第46-49页 |
| 5.3.1 荧光定量PCR测hMLH1 m RNA表达 | 第46-48页 |
| 5.3.2 Western blot测hMLH1蛋白表达 | 第48-49页 |
| 5.3.3 结果统计分析 | 第49页 |
| 5.4 结果 | 第49-56页 |
| 5.4.1 HaCaT细胞中hMLH1基因的表达 | 第49-52页 |
| 5.4.2 HaCaT细胞中hMLH1蛋白的表达 | 第52-54页 |
| 5.4.3 hMLH1基因及其蛋白表达趋势 | 第54-56页 |
| 5.5 讨论 | 第56-57页 |
| 5.6 本章小结 | 第57-58页 |
| 第六章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 6.1 本研究结论 | 第58页 |
| 6.2 本研究创新点 | 第58-59页 |
| 6.3 不足与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
