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转录因子Pax6、Sox2、Six3在非洲爪蟾晶状体发育及再生过程中的表达及相互作用分析

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 前言第8-19页
    1.1 两栖类晶状体的形成过程第8-9页
    1.2 晶状体再生第9-10页
        1.2.1 非洲爪蟾晶状体再生第9-10页
        1.2.2 蝾螈晶状体再生第10页
        1.2.3 哺乳动物晶状体再生第10页
    1.3 与晶状体发育及再生相关的转录因子第10-14页
        1.3.1. Pax6第11页
        1.3.2. Sox2第11-12页
        1.3.3. Six3第12-14页
    1.4 晶状体再生过程中相关的信号通路第14页
    1.5 调控晶状体发育及再生过程中各转录因子之间的相互作用关系第14-16页
        1.5.1 L-maf、Sox2和Pax6在调节δ-晶状体蛋白表达中的作用第14-15页
        1.5.2 Pax6、Sox2对Six3的调节第15-16页
        1.5.3 在晶状体发育过程中Pax6,AP2α,Prox1和Six3对Sox2表达的影响第16页
    1.6 实验方法介绍第16-18页
        1.6.1 多克隆抗体的制备第16-17页
        1.6.2 Western Blotting第17页
        1.6.3 酵母双杂交实验第17-18页
    1.7 实验目的及意义第18-19页
第二章 实验材料第19-24页
    2.1 实验动物及菌种第19页
    2.2 主要实验仪器第19-20页
    2.3 实验药品第20页
    2.4 载体第20-21页
    2.5 实验试剂第21-24页
        2.5.1 基因克隆与蛋白原核表达所需试剂第21-22页
        2.5.2 抗体制备及纯化所需试剂第22页
        2.5.3 Western blot所需试剂第22-23页
        2.5.4 酵母双杂交所需试剂第23-24页
第三章 实验方法第24-28页
    3.1 基因克隆与载体构建第24页
    3.2 预诱导蛋白原核表达第24-25页
    3.3 Sox2蛋白大量表达及纯化第25页
    3.4 多克隆兔抗抗体的制备及纯化第25页
    3.5 Western Blot检测晶状体正常发育及再生过程中Sox2的表达第25-26页
    3.6 酵母双杂交检测几种转录因子间的相互作用第26-28页
        3.6.1 重组质粒构建第26-27页
        3.6.2 酵母双杂交实验第27-28页
第四章 实验结果第28-36页
    4.1 sox2兔抗的制备第28-30页
        4.1.1 胚胎组织总RNA提取电泳检测第28页
        4.1.2 Sox2融合基因的扩增以及pET-30-sox2载体的构建第28-29页
        4.1.3 蛋白诱导纯化与抗体制备第29-30页
    4.2 western blot检测转录因子的表达第30-33页
        4.2.1 western blot检测眼睛正常发育过程中三种转录因子表达第30-32页
        4.2.2 western blot检测晶状体再生过程中三种转录因子表达第32-33页
    4.3 酵母双杂交第33-36页
第五章 讨论与结论第36-42页
    5.1 讨论第36-41页
        5.1.1 Anti-Sox2多克隆抗体制备第36页
        5.1.2 western blot检测转录因子的表达第36-39页
            1. Pax6、Sox2、Six3三种转录因子在胚胎正常发育过程中的表达第36-38页
            2. Pax6、Sox2、Six3三种转录因子在晶状体再生过程中的表达第38-39页
        5.1.3 酵母双杂交结果讨论第39-41页
    5.2 结论第41-42页
参考文献第42-49页
在学期间研究成果第49-50页
致谢第50页

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