摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第8-19页 |
1.1 两栖类晶状体的形成过程 | 第8-9页 |
1.2 晶状体再生 | 第9-10页 |
1.2.1 非洲爪蟾晶状体再生 | 第9-10页 |
1.2.2 蝾螈晶状体再生 | 第10页 |
1.2.3 哺乳动物晶状体再生 | 第10页 |
1.3 与晶状体发育及再生相关的转录因子 | 第10-14页 |
1.3.1. Pax6 | 第11页 |
1.3.2. Sox2 | 第11-12页 |
1.3.3. Six3 | 第12-14页 |
1.4 晶状体再生过程中相关的信号通路 | 第14页 |
1.5 调控晶状体发育及再生过程中各转录因子之间的相互作用关系 | 第14-16页 |
1.5.1 L-maf、Sox2和Pax6在调节δ-晶状体蛋白表达中的作用 | 第14-15页 |
1.5.2 Pax6、Sox2对Six3的调节 | 第15-16页 |
1.5.3 在晶状体发育过程中Pax6,AP2α,Prox1和Six3对Sox2表达的影响 | 第16页 |
1.6 实验方法介绍 | 第16-18页 |
1.6.1 多克隆抗体的制备 | 第16-17页 |
1.6.2 Western Blotting | 第17页 |
1.6.3 酵母双杂交实验 | 第17-18页 |
1.7 实验目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 实验材料 | 第19-24页 |
2.1 实验动物及菌种 | 第19页 |
2.2 主要实验仪器 | 第19-20页 |
2.3 实验药品 | 第20页 |
2.4 载体 | 第20-21页 |
2.5 实验试剂 | 第21-24页 |
2.5.1 基因克隆与蛋白原核表达所需试剂 | 第21-22页 |
2.5.2 抗体制备及纯化所需试剂 | 第22页 |
2.5.3 Western blot所需试剂 | 第22-23页 |
2.5.4 酵母双杂交所需试剂 | 第23-24页 |
第三章 实验方法 | 第24-28页 |
3.1 基因克隆与载体构建 | 第24页 |
3.2 预诱导蛋白原核表达 | 第24-25页 |
3.3 Sox2蛋白大量表达及纯化 | 第25页 |
3.4 多克隆兔抗抗体的制备及纯化 | 第25页 |
3.5 Western Blot检测晶状体正常发育及再生过程中Sox2的表达 | 第25-26页 |
3.6 酵母双杂交检测几种转录因子间的相互作用 | 第26-28页 |
3.6.1 重组质粒构建 | 第26-27页 |
3.6.2 酵母双杂交实验 | 第27-28页 |
第四章 实验结果 | 第28-36页 |
4.1 sox2兔抗的制备 | 第28-30页 |
4.1.1 胚胎组织总RNA提取电泳检测 | 第28页 |
4.1.2 Sox2融合基因的扩增以及pET-30-sox2载体的构建 | 第28-29页 |
4.1.3 蛋白诱导纯化与抗体制备 | 第29-30页 |
4.2 western blot检测转录因子的表达 | 第30-33页 |
4.2.1 western blot检测眼睛正常发育过程中三种转录因子表达 | 第30-32页 |
4.2.2 western blot检测晶状体再生过程中三种转录因子表达 | 第32-33页 |
4.3 酵母双杂交 | 第33-36页 |
第五章 讨论与结论 | 第36-42页 |
5.1 讨论 | 第36-41页 |
5.1.1 Anti-Sox2多克隆抗体制备 | 第36页 |
5.1.2 western blot检测转录因子的表达 | 第36-39页 |
1. Pax6、Sox2、Six3三种转录因子在胚胎正常发育过程中的表达 | 第36-38页 |
2. Pax6、Sox2、Six3三种转录因子在晶状体再生过程中的表达 | 第38-39页 |
5.1.3 酵母双杂交结果讨论 | 第39-41页 |
5.2 结论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
在学期间研究成果 | 第49-50页 |
致谢 | 第50页 |