缩略词表(Abbreviation) | 第6-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
前言 | 第15-20页 |
第一部分 人细小病毒B19通用核酸检测体系中竞争性内标的优化与评价 | 第20-36页 |
1 材料与方法 | 第21-26页 |
1.1 材料 | 第21-22页 |
1.2 定量PCR检测引物与探针的合成 | 第22页 |
1.3 参考品质粒的制备 | 第22-23页 |
1.4 定量PCR反应体系和反应条件 | 第23页 |
1.5 竞争性噬菌体内标的构建及鉴定 | 第23-24页 |
1.6 竞争性噬菌体内标添加量的确定 | 第24-25页 |
1.7 B19病毒核酸检测体系标准曲线的建立 | 第25页 |
1.8 B19病毒国际标准品标定参考品质粒 | 第25页 |
1.9 方法学评价 | 第25-26页 |
1.10 统计学处理 | 第26页 |
2 结果 | 第26-33页 |
2.1 竞争性噬菌体内标的构建及鉴定 | 第26-27页 |
2.2 竞争性噬菌体内标添加量的确定 | 第27-29页 |
2.3 B19病毒核酸检测体系标准曲线的建立 | 第29页 |
2.4 B19病毒国际标准品标定结果 | 第29-30页 |
2.5 方法学评价 | 第30-33页 |
3 讨论 | 第33-35页 |
4 小结 | 第35-36页 |
第二部分 人细小病毒B19-人细小病毒4双重核酸检测体系的建立与评价 | 第36-58页 |
1 材料与方法 | 第37-42页 |
1.1 材料 | 第37-38页 |
1.2 引物与探针的合成 | 第38页 |
1.3 参考品质粒的构建与制备 | 第38-39页 |
1.4 定量PCR反应体系和反应条件的优化 | 第39-40页 |
1.5 B19病毒-PARV4双重定量PCR检测下限的初步确定 | 第40页 |
1.6 非竞争性噬菌体内标添加量的确定 | 第40-41页 |
1.7 B19病毒-PARV4双重核酸检测体系标准曲线的建立 | 第41页 |
1.8 方法学评价 | 第41-42页 |
1.9 统计学处理 | 第42页 |
2 结果 | 第42-55页 |
2.1 参考品质粒的构建及鉴定 | 第42-43页 |
2.2 定量PCR反应体系和反应条件的确定 | 第43-50页 |
2.3 B19病毒-PARV4双重定量PCR检测下限的初步确定 | 第50-51页 |
2.4 非竞争性噬菌体内标添加量的确定 | 第51-52页 |
2.5 B19病毒-PARV4双重核酸检测体系标准曲线的建立 | 第52-53页 |
2.6 方法学评价 | 第53-55页 |
3 讨论 | 第55-57页 |
4 小结 | 第57-58页 |
第三部分 我国献血/献浆人群中血源性人细小病毒的检测 | 第58-66页 |
1 材料与方法 | 第59-60页 |
1.1 材料 | 第59页 |
1.2 血浆样品的预处理 | 第59页 |
1.3 血浆样品核酸的提取 | 第59-60页 |
1.4 实时荧光定量PCR检测样品中病毒核酸 | 第60页 |
1.5 统计学处理 | 第60页 |
2 结果 | 第60-62页 |
2.1 单人份血浆样品中B19病毒和PARV4核酸阳性率 | 第60-61页 |
2.2 单人份血浆样品中B19病毒载量 | 第61页 |
2.3 混合原料血浆样品中B19病毒核酸阳性率 | 第61-62页 |
2.4 混合原料血浆样品中B19病毒载量 | 第62页 |
3 讨论 | 第62-65页 |
4 小结 | 第65-66页 |
第四部分 我国献血/献浆人群中人细小病毒B19分子特性分析 | 第66-91页 |
1 材料与方法 | 第66-69页 |
1.1 材料 | 第66-67页 |
1.2 引物的设计与合成 | 第67页 |
1.3 PCR扩增 | 第67-68页 |
1.4 PCR产物克隆与鉴定 | 第68页 |
1.5 序列测定与系统发育分析 | 第68-69页 |
1.6 重组分析 | 第69页 |
2 结果 | 第69-87页 |
2.1 B19病毒NS1-VP1u区序列克隆与鉴定结果 | 第69-70页 |
2.2 B19病毒NS1-VP1u区序列序列测定与系统发育分析 | 第70-72页 |
2.3 B19病毒3型NS1-VP1u区序列的核苷酸差异分析 | 第72-74页 |
2.4 B19病毒NS1-VP1u区序列重组分析结果 | 第74-78页 |
2.5 B19病毒重组型序列的进一步分析 | 第78-84页 |
2.6 B19病毒近全长序列克隆与鉴定结果 | 第84-85页 |
2.7 B19病毒近全长序列测定与初步分析 | 第85-86页 |
2.8 B19病毒近全长序列系统发育分析及基因型鉴定 | 第86-87页 |
3 讨论 | 第87-90页 |
4 小结 | 第90-91页 |
结论 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-103页 |
个人简历 | 第103-106页 |
致谢 | 第106页 |