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血源性人细小病毒核酸检测体系建立与人细小病毒B19分子特性分析

缩略词表(Abbreviation)第6-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-14页
前言第15-20页
第一部分 人细小病毒B19通用核酸检测体系中竞争性内标的优化与评价第20-36页
    1 材料与方法第21-26页
        1.1 材料第21-22页
        1.2 定量PCR检测引物与探针的合成第22页
        1.3 参考品质粒的制备第22-23页
        1.4 定量PCR反应体系和反应条件第23页
        1.5 竞争性噬菌体内标的构建及鉴定第23-24页
        1.6 竞争性噬菌体内标添加量的确定第24-25页
        1.7 B19病毒核酸检测体系标准曲线的建立第25页
        1.8 B19病毒国际标准品标定参考品质粒第25页
        1.9 方法学评价第25-26页
        1.10 统计学处理第26页
    2 结果第26-33页
        2.1 竞争性噬菌体内标的构建及鉴定第26-27页
        2.2 竞争性噬菌体内标添加量的确定第27-29页
        2.3 B19病毒核酸检测体系标准曲线的建立第29页
        2.4 B19病毒国际标准品标定结果第29-30页
        2.5 方法学评价第30-33页
    3 讨论第33-35页
    4 小结第35-36页
第二部分 人细小病毒B19-人细小病毒4双重核酸检测体系的建立与评价第36-58页
    1 材料与方法第37-42页
        1.1 材料第37-38页
        1.2 引物与探针的合成第38页
        1.3 参考品质粒的构建与制备第38-39页
        1.4 定量PCR反应体系和反应条件的优化第39-40页
        1.5 B19病毒-PARV4双重定量PCR检测下限的初步确定第40页
        1.6 非竞争性噬菌体内标添加量的确定第40-41页
        1.7 B19病毒-PARV4双重核酸检测体系标准曲线的建立第41页
        1.8 方法学评价第41-42页
        1.9 统计学处理第42页
    2 结果第42-55页
        2.1 参考品质粒的构建及鉴定第42-43页
        2.2 定量PCR反应体系和反应条件的确定第43-50页
        2.3 B19病毒-PARV4双重定量PCR检测下限的初步确定第50-51页
        2.4 非竞争性噬菌体内标添加量的确定第51-52页
        2.5 B19病毒-PARV4双重核酸检测体系标准曲线的建立第52-53页
        2.6 方法学评价第53-55页
    3 讨论第55-57页
    4 小结第57-58页
第三部分 我国献血/献浆人群中血源性人细小病毒的检测第58-66页
    1 材料与方法第59-60页
        1.1 材料第59页
        1.2 血浆样品的预处理第59页
        1.3 血浆样品核酸的提取第59-60页
        1.4 实时荧光定量PCR检测样品中病毒核酸第60页
        1.5 统计学处理第60页
    2 结果第60-62页
        2.1 单人份血浆样品中B19病毒和PARV4核酸阳性率第60-61页
        2.2 单人份血浆样品中B19病毒载量第61页
        2.3 混合原料血浆样品中B19病毒核酸阳性率第61-62页
        2.4 混合原料血浆样品中B19病毒载量第62页
    3 讨论第62-65页
    4 小结第65-66页
第四部分 我国献血/献浆人群中人细小病毒B19分子特性分析第66-91页
    1 材料与方法第66-69页
        1.1 材料第66-67页
        1.2 引物的设计与合成第67页
        1.3 PCR扩增第67-68页
        1.4 PCR产物克隆与鉴定第68页
        1.5 序列测定与系统发育分析第68-69页
        1.6 重组分析第69页
    2 结果第69-87页
        2.1 B19病毒NS1-VP1u区序列克隆与鉴定结果第69-70页
        2.2 B19病毒NS1-VP1u区序列序列测定与系统发育分析第70-72页
        2.3 B19病毒3型NS1-VP1u区序列的核苷酸差异分析第72-74页
        2.4 B19病毒NS1-VP1u区序列重组分析结果第74-78页
        2.5 B19病毒重组型序列的进一步分析第78-84页
        2.6 B19病毒近全长序列克隆与鉴定结果第84-85页
        2.7 B19病毒近全长序列测定与初步分析第85-86页
        2.8 B19病毒近全长序列系统发育分析及基因型鉴定第86-87页
    3 讨论第87-90页
    4 小结第90-91页
结论第91-92页
参考文献第92-103页
个人简历第103-106页
致谢第106页

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