菊花再生体系的建立及农杆菌介导绿色荧光蛋白(GFP)基因转化的研究
目录 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-10页 |
1 引言 | 第10-12页 |
2 研究进展 | 第12-25页 |
2.1 菊花的育种现状 | 第12-19页 |
2.1.1 菊花的种质资源 | 第12-13页 |
2.1.2 菊花传统育种及品种改良 | 第13-17页 |
2.1.3 菊花基因工程育种 | 第17-19页 |
2.2 GFP 研究进展 | 第19-22页 |
2.2.1 GFP 的基本特征 | 第20-21页 |
2.2.2 GFP 在分子生物学研究中的应用 | 第21-22页 |
2.3 农杆菌的研究进展 | 第22-25页 |
2.3.1 农杆菌转化植物的步骤 | 第23-24页 |
2.3.2 转化方法 | 第24-25页 |
3 材料和方法 | 第25-36页 |
3.1 试验材料 | 第25-27页 |
3.1.1 品种 | 第25页 |
3.1.2 农杆菌菌种 | 第25页 |
3.1.3 质粒 | 第25页 |
3.1.4 培养基 | 第25-26页 |
3.1.5 试剂 | 第26页 |
3.1.6 PCR 引物 | 第26页 |
3.1.7 常用溶液 | 第26-27页 |
3.1.8 常用仪器 | 第27页 |
3.2 试验方法 | 第27-36页 |
3.2.1 再生体系的建立 | 第27-28页 |
3.2.2 转基因植株的获得 | 第28-31页 |
3.2.3 转基因植株的鉴定 | 第31-36页 |
4 结果与分析 | 第36-53页 |
4.1 再生体系的建立 | 第36-40页 |
4.1.1 愈伤组织的诱导 | 第36页 |
4.1.2 芽的诱导 | 第36-39页 |
4.1.3 直接诱导芽再生培养基的筛选 | 第39-40页 |
4.1.4 生根和向温室移栽 | 第40页 |
4.2 转基因植株的获得 | 第40-53页 |
4.2.1 农杆菌动态生长曲线的绘制 | 第40-41页 |
4.2.2 选择压力的确定 | 第41-44页 |
4.2.3 叶盘的预培养 | 第44-45页 |
4.2.4 农杆菌侵染叶盘 | 第45-50页 |
4.2.4.1 农杆菌OD600值对转化率的影响 | 第45-46页 |
4.2.4.2 不同的侵染时间对转化率的影响 | 第46-47页 |
4.2.4.3 不同的共培养时间对转化率的影响 | 第47-49页 |
4.2.4.4 滤纸帽法(CFP)对转化率的影响 | 第49-50页 |
4.2.5 转基因植株的鉴定 | 第50-53页 |
4.2.5.1 转基因苗抗性芽筛选培养 | 第50页 |
4.2.5.2 转基因苗抗性生根筛选培养 | 第50页 |
4.2.5.3 PCR检测 | 第50-52页 |
4.2.5.4 转基因菊花苗园艺性状变化的观察 | 第52-53页 |
5 讨论 | 第53-56页 |
6 结论 | 第56-59页 |
参考文献 | 第59-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
发表论文情况 | 第69-70页 |
图版说明 | 第70-72页 |