摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 引言 | 第10-16页 |
1.1 白僵菌简述 | 第10-11页 |
1.2 白僵菌菌株的退化 | 第11页 |
1.3 白僵菌菌株退化营养条件、毒力及产孢量等的研究 | 第11-12页 |
1.3.1 营养条件的研究 | 第12页 |
1.3.2 毒力、产孢量、生长速率的研究 | 第12页 |
1.4 白僵菌菌株退化的遗传多样性的研究 | 第12-15页 |
1.4.1 DNA 分子标记技术 | 第13页 |
1.4.2 RFLP 在遗传进化中的应用 | 第13-14页 |
1.4.3 ITS 序列分析在遗传进化中的应用 | 第14页 |
1.4.4 酯酶同工酶技术在遗传进化中的应用 | 第14-15页 |
1.5 研究目的意义 | 第15-16页 |
2 试验材料与试剂 | 第16-18页 |
2.1 供试菌株 | 第16页 |
2.2 供试昆虫 | 第16页 |
2.3 培养基 | 第16页 |
2.4 试验仪器 | 第16页 |
2.5 试验试剂 | 第16-18页 |
3 试验方法 | 第18-25页 |
3.1 桑天牛幼虫高毒力白僵菌菌株紫外线诱变选育 | 第18-20页 |
3.1.1 产孢量测定 | 第18页 |
3.1.2 孢子悬浮液的制备 | 第18页 |
3.1.3 紫外线诱变处理 | 第18-19页 |
3.1.4 突变株筛选 | 第19页 |
3.1.5 初筛高毒力菌株 | 第19页 |
3.1.6 复筛高毒力菌株 | 第19页 |
3.1.7 突变株稳定性测定 | 第19-20页 |
3.2 球孢白僵菌耐吡虫啉突变株的紫外线诱变选育 | 第20-21页 |
3.2.1 供试菌株的紫外线诱变处理 | 第20页 |
3.2.2 含药培养基驯化诱变菌株 | 第20页 |
3.2.3 耐药性突变菌株对吡虫啉敏感性测定 | 第20-21页 |
3.2.4 耐药性突变菌株对其他杀虫剂的交互耐受性 | 第21页 |
3.2.5 耐药性突变菌株的遗传稳定性测定 | 第21页 |
3.3 白僵菌菌株退化的 RFLP 及 ITS 序列分析 | 第21-23页 |
3.3.1 DNA 的提取 | 第21-22页 |
3.3.1.1 菌体制备 | 第21-22页 |
3.3.1.2 DNA 的提取 | 第22页 |
3.3.2 白僵菌菌株的 ITS 序列扩增 | 第22页 |
3.3.2.1 引物的选择 | 第22页 |
3.3.2.2 ITS-PCR 扩增 | 第22页 |
3.3.2.3 扩增产物的限制性内切酶酶切 | 第22页 |
3.3.3 ITS 的 PCR 扩增产物的测序 | 第22-23页 |
3.4 白僵菌菌株退化的酯酶同工酶比较分析 | 第23-25页 |
3.4.1 菌丝体的制备 | 第23页 |
3.4.2 球孢白僵菌全蛋白溶液的制备 | 第23页 |
3.4.3 电泳 | 第23-24页 |
3.4.4 染色 | 第24页 |
3.4.5 数据处理和聚类分析 | 第24-25页 |
4 结果与分析 | 第25-36页 |
4.1 桑天牛幼虫高毒力白僵菌菌株紫外线诱变选育 | 第25-28页 |
4.1.1 正突变株的获得 | 第25页 |
4.1.2 正突变株几丁质酶活性 | 第25-26页 |
4.1.3 突变株对桑天牛幼虫的致病力测定 | 第26页 |
4.1.4 正突变高毒力株继代菌株的产孢量和致病力 | 第26-28页 |
4.2 球孢白僵菌耐吡虫啉突变株的紫外线诱变选育 | 第28-29页 |
4.2.1 球孢白僵菌突变菌株的获得 | 第28页 |
4.2.2 突变菌株对吡虫啉的耐受性 | 第28页 |
4.2.3 耐药性突变菌株对其他杀虫剂的交互耐受性 | 第28-29页 |
4.2.4 耐药性突变菌株的遗传稳定性 | 第29页 |
4.3 白僵菌菌株退化的 RFLP 及 ITS 序列分析 | 第29-32页 |
4.3.1 DNA 提取结果 | 第29-30页 |
4.3.2 rDNA-ITS 序列的 PCR 扩增结果 | 第30-31页 |
4.3.3 限制性内切酶的酶切 | 第31页 |
4.3.4 rDNA-ITS 区序列分析 | 第31-32页 |
4.4 白僵菌菌株退化的酯酶同工酶比较分析 | 第32-36页 |
4.4.1 各代球孢白僵菌的相对迁移率 | 第32-33页 |
4.4.2 各代菌株的酯酶同工酶酶谱分析 | 第33-34页 |
4.4.3 聚类分析 | 第34-36页 |
5 结论与讨论 | 第36-38页 |
5.1 桑天牛幼虫高毒力白僵菌菌株紫外线诱变选育 | 第36页 |
5.2 球孢白僵菌耐吡虫啉突变株的紫外线诱变选育 | 第36页 |
5.3 白僵菌菌株退化的 RFLP 及 ITS 序列分析 | 第36-37页 |
5.4 白僵菌菌株退化的酯酶同工酶比较分析 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-43页 |
在读期间发表学术论文 | 第43-44页 |
作者简历 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |