| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1.1 微藻研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.1 微藻定义 | 第13页 |
| 1.1.2 微藻的利用价值 | 第13页 |
| 1.1.3 微藻生产利用的优点 | 第13-14页 |
| 1.1.4 微藻产油研究现状 | 第14页 |
| 1.2 影响微藻生长和油脂积累的环境因素 | 第14-17页 |
| 1.2.1 氮浓度对微藻油脂积累的影响 | 第15页 |
| 1.2.2 温度对微藻油脂积累的影响 | 第15页 |
| 1.2.3 光照强度对微藻油脂积累的影响 | 第15-16页 |
| 1.2.4 磷元素对微藻油脂积累的影响 | 第16页 |
| 1.2.5 盐度对微藻油脂积累的影响 | 第16页 |
| 1.2.6 CO_2通气量对微藻油脂积累的影响 | 第16页 |
| 1.2.7 铁离子浓度对微藻油脂积累的影响 | 第16-17页 |
| 1.3 微藻油脂代谢基因工程研究进展 | 第17-22页 |
| 1.3.1 油脂在细胞内合成的步骤 | 第17-18页 |
| 1.3.2 与油脂积累相关的基因 | 第18-22页 |
| 1.4 转录组学研究进展 | 第22-24页 |
| 1.4.1 转录组学简介 | 第22页 |
| 1.4.2 高通量测序原理 | 第22-23页 |
| 1.4.3 目前常用的高通量测序平台 | 第23-24页 |
| 1.5 课题研究目的和意义 | 第24-27页 |
| 1.6 技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 微拟球藻不同时期转录组差异文库的构建 | 第28-43页 |
| 2.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-33页 |
| 2.2.1 总 RNA 提取 | 第29-30页 |
| 2.2.2 RNA 样品的前处理及测序 | 第30-32页 |
| 2.2.3 序列分析 | 第32页 |
| 2.2.4 转录组表达差异，序列注释及 KEGG 代谢通路注释分析 | 第32页 |
| 2.2.5 COG，GO 功能注释及分类 | 第32-33页 |
| 2.3 结果 | 第33-41页 |
| 2.3.1 总 RNA 质量及测序文库质量的检测 | 第33页 |
| 2.3.2 样本测序数据及有效数据获取 | 第33-34页 |
| 2.3.3 测序平台获得的短序列软件拼接 | 第34-35页 |
| 2.3.4 基因整体表达差异分析 | 第35页 |
| 2.3.5 转录组序列 COG 功能注释及分类分析 | 第35-37页 |
| 2.3.6 GO 功能注释及分类 | 第37-38页 |
| 2.3.7 KEGG 代谢通路注释及油脂代谢相关通路 | 第38-40页 |
| 2.3.8 转录因子 | 第40页 |
| 2.3.9 油脂代谢相关基因 | 第40-41页 |
| 2.4 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 微拟球藻丙二酰 CoA:ACP 转酰基酶基因的克隆及环境胁迫响应分析 | 第43-61页 |
| 3.1 材料 | 第43-44页 |
| 3.1.1 藻种及目的基因序列片段来源 | 第43-44页 |
| 3.1.2 试验常用溶液及培养基 | 第44页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第44页 |
| 3.2 方法 | 第44-50页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第44-45页 |
| 3.2.2 微拟球藻的培养及总 RNA 提取 | 第45页 |
| 3.2.3 编码 NgMCAT 蛋白的基因全长获得 | 第45-48页 |
| 3.2.4 NgMCAT 生物信息学分析 | 第48页 |
| 3.2.5 温度、氮浓度及盐浓度胁迫条件设置 | 第48-49页 |
| 3.2.6 荧光实时定量 PCR | 第49-50页 |
| 3.2.7 数据分析处理 | 第50页 |
| 3.3 结果 | 第50-58页 |
| 3.3.1 微拟球藻 RNA 提取结果及测序 | 第50页 |
| 3.3.2 编码 NgMCAT 蛋白全长基因的获得 | 第50-53页 |
| 3.3.3 NgMCAT 系统发育信息分析 | 第53-54页 |
| 3.3.4 NgMCAT 氨基酸序列同源性分析 | 第54-56页 |
| 3.3.5 温度胁迫对 NgMCAT 表达变化的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.6 氮胁迫对 NgMCAT 表达变化的影响 | 第57-58页 |
| 3.3.7 富盐胁迫对 NgMCAT 表达变化的影响 | 第58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-61页 |
| 第四章 不同培养条件对微拟球藻脂肪酸组成的影响 | 第61-73页 |
| 4.1 材料 | 第61页 |
| 4.1.1 材料 | 第61页 |
| 4.1.2 仪器 | 第61页 |
| 4.2 方法 | 第61-63页 |
| 4.2.1 微拟球藻培养及生长曲线建立 | 第61页 |
| 4.2.2 微拟球藻不同培养条件的设置 | 第61页 |
| 4.2.3 微拟球藻细胞收集 | 第61-62页 |
| 4.2.4 微拟球藻脂肪酸测定前处理 | 第62页 |
| 4.2.5 微拟球藻脂肪酸测定 | 第62-63页 |
| 4.3 结果 | 第63-72页 |
| 4.3.1 微拟球藻生长曲线的建立 | 第63-64页 |
| 4.3.2 正常培养条件下脂肪酸变化分析 | 第64页 |
| 4.3.3 缺氮培养条件下脂肪酸变化分析 | 第64-65页 |
| 4.3.4 富氮培养条件下脂肪酸变化分析 | 第65页 |
| 4.3.5 低温培养条件下脂肪酸变化分析 | 第65-66页 |
| 4.3.6 高温培养条件下脂肪酸变化分析 | 第66页 |
| 3.3.7 高盐培养条件下脂肪酸变化分析 | 第66-67页 |
| 4.3.8 几类主要脂肪酸在不同培养条件下的变化规律 | 第67-72页 |
| 4.4 讨论 | 第72-73页 |
| 第五章 全文总结 | 第73-75页 |
| 5.1 转录组学方面 | 第73页 |
| 5.2 NgMCAT 克隆转录方面 | 第73-74页 |
| 5.3 油脂变化方面 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 作者简介 | 第85页 |
