| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 常用缩写词 | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| 1.1 禽流感简介 | 第12-13页 |
| 1.2 H7亚型AIV的分子生物学特征 | 第13-16页 |
| 1.2.1 H7亚型AIV的基因组及编码蛋白功能 | 第13-15页 |
| 1.2.2 H7亚型AIV的复制及变异机制 | 第15-16页 |
| 1.3 H7亚型AIV的流行病学特征及现状 | 第16-18页 |
| 1.3.1 H7亚型AIV的传播 | 第16页 |
| 1.3.2 H7亚型AIV流行动态 | 第16-17页 |
| 1.3.3 H7亚型AI的防控措施 | 第17-18页 |
| 1.4 疫苗概述 | 第18-20页 |
| 1.4.1 疫苗的定义 | 第18页 |
| 1.4.2 灭活疫苗 | 第18-20页 |
| 1.4.2.1 灭活疫苗的定义 | 第18-19页 |
| 1.4.2.2 影响灭活疫苗免疫效果的因素 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-32页 |
| 2.1 毒株、标准阳性血清与抗原 | 第20-21页 |
| 2.2 鸡胚及实验动物 | 第21页 |
| 2.3 H7亚型AI灭活疫苗制备材料 | 第21页 |
| 2.4 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.5 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.6 相关生物学软件 | 第23页 |
| 2.7 HA试验与HI试验 | 第23页 |
| 2.8 疫苗种毒全基因序列分析 | 第23-27页 |
| 2.8.1 引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| 2.8.2 病毒RNA的抽提及反转录 | 第24页 |
| 2.8.3 目的基因的扩增 | 第24-25页 |
| 2.8.4 目的基因的回收 | 第25页 |
| 2.8.5 目的基因与载体的连接 | 第25-26页 |
| 2.8.6 连接产物的转化 | 第26页 |
| 2.8.7 阳性重组质粒的筛选 | 第26-27页 |
| 2.8.8 质粒DNA序列的测定及进化分析 | 第27页 |
| 2.9 种毒鸡胚繁殖最佳条件及感染力研究 | 第27-28页 |
| 2.9.1 最佳稀释度 | 第27页 |
| 2.9.2 最佳收毒时间 | 第27页 |
| 2.9.3 最佳接毒量 | 第27页 |
| 2.9.4 病毒对鸡胚与鸡的感染力研究 | 第27-28页 |
| 2.10 种毒鸡胚繁殖HA效价的稳定性 | 第28页 |
| 2.11 疫苗的制作、安全性及有效性评价 | 第28-32页 |
| 2.11.1 疫苗的制作 | 第28-29页 |
| 2.11.1.1 抗原的制备 | 第28-29页 |
| 2.11.1.2 常用油包水型疫苗的制作 | 第29页 |
| 2.11.1.3 不同免疫佐剂疫苗的制作 | 第29页 |
| 2.11.2 疫苗成品检验 | 第29-31页 |
| 2.11.2.1 性状 | 第29-30页 |
| 2.11.2.2 无菌检验 | 第30页 |
| 2.11.2.3 疫苗安全性检验 | 第30-31页 |
| 2.11.3 疫苗效力检验 | 第31-32页 |
| 2.11.3.1 免疫有效期试验 | 第31页 |
| 2.11.3.2 最小免疫剂量试验 | 第31页 |
| 2.11.3.3 抗体滴度与免疫攻毒保护相关性研究 | 第31页 |
| 2.11.3.4 种毒疫苗稳定性 | 第31-32页 |
| 2.11.3.5 最佳免疫佐剂试验 | 第32页 |
| 3 实验结果 | 第32-45页 |
| 3.1 疫苗种毒全基因序列结果 | 第32-35页 |
| 3.1.1 疫苗种毒8片段基因PCR扩增结果 | 第32页 |
| 3.1.2 疫苗种毒8个片段全长基因序列分析 | 第32-35页 |
| 3.1.2.1 遗传进化分析 | 第32-33页 |
| 3.1.2.2 病毒HA基因序列分析 | 第33-34页 |
| 3.1.2.3 病毒NA基因序列分析 | 第34页 |
| 3.1.2.4 病毒6个内部基因序列分析 | 第34-35页 |
| 3.2 种毒鸡胚繁殖最佳条件及致病性 | 第35-37页 |
| 3.2.1 最佳稀释度 | 第35页 |
| 3.2.2 最佳收毒时间 | 第35-36页 |
| 3.2.3 最佳接毒量 | 第36页 |
| 3.2.4 病毒对鸡胚及鸡的致病力 | 第36-37页 |
| 3.3 疫苗种毒鸡胚中繁殖的稳定性 | 第37页 |
| 3.4 疫苗的制备、安全性及有效性评价结果 | 第37-45页 |
| 3.4.1 抗原的制备 | 第37-38页 |
| 3.4.2 疫苗性状、稳定性 | 第38页 |
| 3.4.3 疫苗的安全性 | 第38-39页 |
| 3.4.4 疫苗效力检验 | 第39-45页 |
| 3.4.4.1 免疫有效期 | 第39-40页 |
| 3.4.4.2 最小免疫剂量 | 第40-42页 |
| 3.4.4.3 抗体滴度与免疫攻毒保护相关性 | 第42页 |
| 3.4.4.4 种毒疫苗稳定性 | 第42-44页 |
| 3.4.4.5 最佳免疫佐剂 | 第44-45页 |
| 4 分析与讨论 | 第45-51页 |
| 4.1 两株H7N9疫苗种毒基因序列分析 | 第45-48页 |
| 4.2 鸡胚繁殖最佳条件及感染力分析 | 第48-49页 |
| 4.2.1 鸡胚繁殖最佳条件分析 | 第48页 |
| 4.2.2 病毒感染力分析 | 第48-49页 |
| 4.3 种毒鸡胚繁殖稳定性分析 | 第49页 |
| 4.4 疫苗性状、稳定性及安全性分析 | 第49页 |
| 4.5 疫苗效力检验分析 | 第49-51页 |
| 全文总结 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |